ELISA在预防鸡传染性支气管炎早期感染中的作用和意义

谭长江 于沛江 王群义

(1.即墨市畜牧兽医局，山东即墨 266200；2.青岛易邦生物工程有限公司，山东青岛 266032)

ELISA在预防鸡传染性支气管炎早期感染中的作用和意义

谭长江1于沛江1王群义2*

(1.即墨市畜牧兽医局，山东即墨 266200；2.青岛易邦生物工程有限公司，山东青岛 266032)

鸡传染性支气管炎是危害养殖业较大的传染性疾病之一。近几年该病的发病率有增加趋势。特别是白羽肉鸡的呼吸道综合征和蛋鸡、种鸡的生殖系统障碍对养殖业的危害最大。早期采用ELISA检测法对监控和预防肉鸡呼吸道综合征和蛋鸡、种鸡的生殖系统障碍具有重要意义和良好的经济价值。

ELISA 传染性支气管炎 早期感染 呼吸道综合征 生殖系统障碍

1 近期肉鸡（白羽肉鸡等品种为代表）呼吸道综合征的流行特点

（1）冬季、春季或季节交替时多发；

（2）3～10日龄的鸡群最易感。传支本身引起的发病率和死亡率不高，临床症状不典型，但会破坏气管纤毛的完整性；

（3）感染过传支的鸡群，5～7天后再次感染H9亚型禽流感时常导致严重的临床症状，如聚堆、张口呼吸、怪叫、采食下降，死亡率高达5%～30%；

（4）剖检症状主要为：气管充出血，支气管被黄白色干扰物堵塞。

（5）青岛易邦实验室对2010～2013年临床样品检测发现，96份H9亚型AIV阳性的样品中，有约67%的样品为IBV阳性，且混合感染鸡群死亡率一般均高达30%以上。这充分说明传支在白羽肉鸡呼吸道综合征的发生过程中起着重要作用。

2 蛋、种雏鸡早期感染传染性支气管炎引起生殖系统障碍的流行特点

（1）冬季、春季育雏的鸡群多发；

（2）育雏频繁，空栏时间较短的鸡场多发；

（3）鸡群感染后一般无临床症状；

（4）鸡群开产后，卵壳蛋、沙壳蛋、小蛋较多；蛋清稀薄如水；产蛋率上升缓慢，无产蛋高峰，严重的仅有50%～60%；

（5）开产后的鸡群进行病原分离，很难分离到病毒。

3 鸡传染性支气管炎防控的难点

（1）肉雏鸡和蛋雏鸡感染传染性支气管炎具有早期和隐形的特点，很难被大家在第一时间发现，发现时已经引起了较大的损失。比如蛋雏鸡在2周内感染传染性支气管炎，一直到开产后出现蛋壳质量问题，无产蛋高峰等生殖障碍时，我们才意识到鸡群在小日龄感染了传支；这期间会导致多批次鸡群感染发病。

（2）单靠疫苗的免疫不能取得100%的保护：经调查，传支在冬季、春季多发。在同一个鸡场，在同样的疫苗免疫、饲养管理水平下，夏季和秋季很少发病，一到冬季和春季发病率就会增加。实验证明，在健康和生产性能正常的鸡群中能检测到野毒和感染IBV后抗体水平大幅上升现象。这说明传染性支气管炎需要综合防控，不能单靠疫苗。

4 ELISA早期检测的意义

（1）通过ELISA检测可及时发现鸡群是否感染传支野毒。比如ELISA抗体滴度在1500以上，预示着鸡群早期感染了野毒。及时采取措施来减少损失非常重要；

（2）评估疫苗的免疫效果；免疫良好的疫苗，可以阻断病毒的传播和降低病毒在机体内的繁殖概率。

（3）在高发季节，可以根据ELISA抗体，评估鸡群感染传支的损失情况。比如在冬季，蛋雏鸡的ELISA抗体明显高出免疫值，这表明该鸡群感染了传染性支气管炎野毒，鸡群开产后出现生殖障碍的概率就很高。

5 某蛋鸡场临床检测情况

（1）检测背景：2015.8月份，北方某蛋鸡场年反映有部分鸡舍鸡群开产后无产蛋高峰，经诊断疑似鸡传染性支气管炎早期感染。该免疫程序：1日龄新支活疫苗喷雾，7日龄新支活疫苗点眼。

（2）自2015年10月份开始，对该场新引的雏鸡从1日龄开始，每间隔4周检测一次，一直检测到300日龄，利用间接ELISA法对传染性支气管炎进行了抗体检测。对9批，共计27万只商品鸡进行了跟踪检测。经检测发现，在1～3月份育雏，4周龄ELISA抗体异常的鸡群，开产后无产蛋高峰，蛋壳质量异常；4周龄ELISA抗体正常的鸡群，产蛋率和蛋壳质量正常。以下是两个鸡舍的检测情况。

5#鸡舍：2016.1.27进鸡，20周龄产蛋率达到70.54%后不再上升，卵壳蛋占3.17%，破壳蛋、小蛋等次品蛋占1.3%，蛋清稀薄。表1是该鸡群育雏期间传支的ELISA抗体（OD值）检测结果。

10#鸡舍：2016.3月22号进鸡，30周龄产蛋率96%，蛋壳质量正常。表2是该鸡群雏鸡期间ELISA的检测结果。

表1

表2

6 传支的综合防控措施

（1）科学的饲养管理：1～2周龄内，育雏温度恒定，昼夜温差小。通风换气要循序渐进，重视体感温度。温差较大可能是导致感染鸡群发病的主要原因。

（2）重视生物安全：进鸡前要严格消毒，发病率高的鸡场，空栏时间不少于3周。人员要固定，避免人员较差感染；

（3）做好疫苗免疫工作：传染性支气管炎在我国主要流行的血清型是QX和M型，应重点预防含QX和M株的疫苗。临床发现Ma5和L4/91联合使用对QX和M株有较好的免疫预防效果。在疫苗的免疫过程中，应注意以下几点：早期免疫：免疫越早，发病率和感染率越低；及时二免：二次免疫后，鸡群才能得到真正的免疫保护；免疫方法：生产中可采用喷雾、点眼、饮水的方法。从目前中国的养殖现状，特别是蛋雏鸡建议采用点眼的方法，通过点眼，免疫更确实、有效，保护率高。免疫程序：

1～3日龄：支易灵或新支灵 1羽份 点眼

7～9日龄：新支灵 1羽份 点眼

（4）加强实验室检测。分别在5日龄和12日龄，采气管棉拭子，利用PCR法监测传支野毒的感染；在7日龄、14日龄、21日龄分别采血，采用ELISA法，通过检测抗体水平来监控野毒的感染情况和评估疫苗的保护率。根据抗体水平来对鸡群采取针对性措施。在1-2周感染传支野毒，ELISA OD值可达2000～10000。一旦确定鸡群感染传支应及时采取措施，避免下批次鸡群的感染和发病。

7 小结

ELISA检测技术在我国已比较普及和成熟，利用该技术对传染性支气管炎的监控和预防会起到较好的防控效果。

[1] 李峰，王锡堃.鸡传染性支气管炎间接ELISA方法的研究——Ⅱ.应用ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒抗体[J].中国预防兽医学报，1991，（3）：19-21.

[2] 屈常林，Bart Van，郭龙宗，等.用ELISA方法对鸡传染性支气管炎做出诊断[A].山东畜牧兽医学会禽病学专业委员会第一次学术专业委员会论文集[C].2009：127.