对于从事食品生产相关产业的人来说,食品安全是重中之重,是维护消费者信任的首要因素。食品生产商为了确保产品的安全与品质,都会进行食源性致病菌的检测。广州迪奥生物科技有限公司针对目前的致病微生物检测现状开发了全方位的IMSA技术平台,本次课程的主题主要由申洪杰老师对迪奥公司的IMSA技术平台做一个简单的讲解。
现行检测方法概述
微生物学及生化鉴定方法(即国标方法)是传统的培养方法,这种方法的检测结果非常准确,但是具有时间长、效率低的缺点,并且这种方法需要专业人员进行结果分析。
分子生物学方法是目前主流的检测方法之一。第一代PCR检测技术具有反应热循环、操作繁杂、灵敏度高、准确度低、反应时间长、结果判断麻烦、需要专业背景、单指标检测等诸多缺点,已经无法满足日益壮大的市场需求。第二代荧光PCR检测技术分为普通荧光PCR和荧光探针PCR,普通荧光PCR反应热循环,操作很繁杂,但是灵敏度很高;荧光探针PCR的检测时间长、结果分析麻烦、需要专业背景。另外分子生物学方法只适用于大型高端仪器,局限于高端市场,普及推广困难,无法满足基层检测机构的需求。第三代恒温扩增检测技术可实时监测实验过程,操作简单,检测时间短,使用成本低,但也具有扩增结果无法测序和多使用目视判断的缺点。
IMSA技术平台
广州迪奥生物科技有限公司针对目前的致病微生物检测现状开发了全方位的IMSA技术平台。该平台结合了IMSA技术和荧光检测技术,在通过优化之后实现高效率和高准确率。IMSA平台的核心技术是Bst聚合酶,它的来源是湿热脂肪芽孢杆菌bacillus、stearothermophilus DNA聚合酶的部分片段,分子量67KD。Bst聚合酶具有5`→3`DNA聚合酶活性,但不具有5`→3`外切核酸酶活性;链置换活性强;在宽温度范围内具有活性,最佳活性温度为63℃,80℃ 20min酶便失活等特点。
MISA技术平台与其他检测方法的对比见表1、表2、表3。IMSA技术平台的特点有五点:第一、恒温扩增,无需热循环,持续扩增;第二、Bst DNA聚合酶,高效扩增;第三、引物设计,成剪刀状茎环结构,自主扩增;第四、扩增模板浓度需求低,提高低拷贝模板的扩增概率;第五、熒光信号检测,扩增产物检测准确率高,干扰小。
IMSA技术的应用范围非常广,能够检测包括国家规定必检致病菌在内的众多微生物和玉米和大豆等农作物的转基因成分,还能够对猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅等动物源性食品做成分检测,也能检测出水产中细菌和病毒引起的病害。
IMSA检测平台是既适用于食品生产加工企业日常质控,也适用于基层监管部门开展批量风险监测的优秀技术平台。具有更简单、更经济、更纯粹的优势。