分光光度计测定种公猪精液密度

何经纬，冯波，刘一辉

（四川省畜牧总站，四川 成都 610041）

分光光度计测定种公猪精液密度

何经纬，冯波，刘一辉

（四川省畜牧总站，四川 成都 610041）

1 操作步骤

1.1 打开721型分光光度计电源开关和比色皿室的箱盖，使光电管在无光照情况下预热20min。

1.2 旋转波长调节器，选择450nm为测定所需的单色光波长。

1.3 选择适当的灵敏度，一般先将灵敏度旋钮旋至最低档位。

1.4 调0%：打开比色皿室的箱盖（关闭光门），用零点调节器调节旋钮使电表指针在通光度（T值）为0%处。

1.5 调100%：在比色皿中加入猪精液稀释剂溶液4mL，拉动拉杆使其置于光路中，盖上比色皿室箱盖（打开光门），调节光量调节旋钮，使电表指针在T值为100%处。

1.6 反复调节旋钮，直到关闭光门和打开光门时指针分别指在T值为0%和100%处为止。

如果T值不能调节到100%，就增大灵敏度，重新调0%、100%。

1.7 待测溶液的配制：取比色皿一支（以容量为4mL比色皿为例），分别加入3.6mL猪精液稀释剂溶液，0.4mL猪原精液混匀，用擦镜纸擦干比色皿透光面，使其光亮，无气泡。

1.8 将待测溶液置于比色皿并放入比色皿室中，盖上箱盖，拉动拉杆将待测溶液置于光路中，此时从指针的位置读得待测溶液的T值或吸光率（A值）。T值或吸光率（A值）根据对照表读取精液密度。

2 操作技巧

2.1 使用比色皿时，只能拿毛玻璃的两面，并且必须用擦镜纸擦干透光面，以保护透光面不受损坏或产生斑痕。用比色皿装液前必须用所装溶液冲洗3次，避免改变溶液的浓度。

2.2 T值和A值成一定函数关系，可以相互转换。根据目前研究，T值读数误差较小。

2.3 生猪精液取样时应取精液瓶中间的液样。

2.4 生猪精液长期放置会下沉到容器底部，因此，取样时应摇匀，测量时速度要快，读数要准。

2.5 测量时生猪精液稀释了10倍，因此，要根据其参照的密度标准作相应调整。

3 计算方法

利用分光光度计测出T值后，根据对照表读取精液密度（ρ），用于计算稀释液的加入量和确定分装瓶数，计算公式如下：

注：ρ为精液密度，V为猪精液体积，m为精子活力，n为精子畸形率，Y为瓶数，V0为采精量，V1为猪精液稀释后的体积，V2为加入稀释液的体积。

按照国家标准GB/T 25172-2010，精液产品中总精液数为30～35亿个/瓶，每剂80mL。

实际生产过程中，精子畸形率通过普通显微镜难以检测，因此，精子畸形率=0%，稀释后精子活力与之前保持不变。

S814.8

C

1001-8964（2017）11-0039-01

2017-09-27