胃癌组织EGFR、c-Met、Ki-67表达变化及其临床意义

王爱民，焦海涛，吴建龙，王学文，李建辉

(1承德市中心医院，河北承德067000；2承德医学院)

胃癌组织EGFR、c-Met、Ki-67表达变化及其临床意义

王爱民1，焦海涛2，吴建龙1，王学文1，李建辉1

(1承德市中心医院，河北承德067000；2承德医学院)

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)、c-Met、Ki-67在胃癌发生、发展中的作用。方法 选取胃癌组织88例份、正常胃黏膜组织46例份，采用免疫组化一步法检测EGFR、c-Met、Ki-67表达，并分析三者表达的关系。结果 胃癌组织EGFR阳性表达率为86.36%(76/88)、c-Met阳性表达率为82.95%(73/88)、Ki-67高表达率为94.32%(83/88)，正常胃黏膜组织分别为19.57%(9/46)、17.39%(8/46)、21.74%(10/46)，二者比较P均<0.05。胃癌组织EGFR、c-Met阳性表达和Ki-67高表达两两互呈正相关关系(P均<0.05)。结论 胃癌组织EGFR、c-Met和Ki-67表达均升高，三者在促进胃癌的发生、发展中具有协同作用。

胃癌；表皮生长因子受体；c-Met；Ki-67；免疫组织化学

据2011年统计，我国胃癌的发病率为31.21/10万、病死率为22.08/10万[1]，分别居所有恶性肿瘤的第2、3位[2]。近年来，随着诊疗手段的不断进步，早期胃癌患者预后有了较大改善，但晚期胃癌患者预后仍较差，5年生存率仅为15%左右[3]。故寻找预测胃癌发生、发展的分子生物学标记物具有重要意义[4,5]。本研究观察了表皮生长因子受体(EGFR)、c-Met和Ki-67在胃癌组织中的表达变化。现分析结果，并探讨其在胃癌发生、发展中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2010年10月～2012年7月承德市中心医院手术切除的胃癌标本88例份。所有标本经组织病理检查证实。根据2010年美国癌症联合会《恶性肿瘤TNM分期》(第7版)标准TNM分期为T2N1M0期，Lauren分型为肠型；患者男52例、女36例，年龄(58.0±4.8)岁。同期选择正常胃黏膜组织标本46例份，患者男26例、女20例，年龄(54.0±6.7)岁。胃癌患者及正常胃黏膜者性别、年龄具有可比性。所有病例临床病理资料及随访记录齐全。本研究经医院伦理委员会批准，患者均知情同意。

1.2 胃癌组织和正常胃黏膜组织EGFR、c-Met、Ki-67表达检测 采用免疫组化一步法。取手术切除的胃癌组织、正常胃黏膜组织，10%中性甲醛固定，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，4 μm厚连续切片。切片经80 ℃烤箱烤片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇脱苯，双蒸水冲洗；高压抗原修复，灭活内源性过氧化物酶，鼠抗人多克隆一抗4 ℃孵育过夜，羊抗鼠/兔IgG聚合物二抗37 ℃孵育20 min，DAB显色5～10 min，蒸馏水冲洗，苏木素复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，随机选取5个400倍视野，显微镜下观察。结果判定：① EGFR、c-Met表达：采用Volm双评分法[6]。阳性表达定位于细胞膜和细胞质，呈棕黄色颗粒。阳性细胞所占比例：≤10%为0分，>10%～≤25%为1分，>25%～≤50%为2分，>50%为3分；染色强度：未着色为0分，浅黄色为1分，黄色为2分，褐色或棕黄色为3分。二者之和≥1分为阳性。②Ki-67表达：胃癌组织Ki-67阳性表达定位于细胞核，呈棕黄色颗粒状、灶状或弥漫分布；正常胃黏膜组织Ki-67阳性表达局限于黏膜层的腺体颈部。根据Lee等[7]分类方法，以Ki-67指数(Ki-67 LI)20%作为截断值，Ki-67 LI>20%为Ki-67高表达，Ki-67 LI≤20%为Ki-67低表达。Ki-67 LI=Ki-67阳性细胞数/100个细胞。分析胃癌组织EGFR、c-Met、Ki-67表达的关系。

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0统计软件。计数资料比较采用χ2检验。相关性分析采用Spearman等级相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胃癌组织和正常胃黏膜组织EGFR、c-Met、Ki-67表达比较 胃癌组织及正常胃黏膜组织EGFR阳性表达率分别为86.36%(76/88)、19.57%(9/46)，c-Met阳性表达率分别为82.95%(73/88)、17.39%(8/46)，Ki-67高表达率分别为94.32%(83/88)、21.74%(10/46)；二者比较P均<0.05。

2.2 胃癌组织EGFR、c-Met、Ki-67表达的关系 胃癌组织EGFR阳性表达与c-Met阳性表达、Ki-67高表达均呈正相关(r分别为0.463、0.524，P均<0.05)，c-Met阳性表达与Ki-67高表达呈正相关(r=0.429，P<0.05)。

3 讨论

近年来，随着内镜等诊断技术的不断进步，大量早期胃癌得以发现并及时治疗，明显改善了患者的总体生存率及近期预后，但对于进展期胃癌患者，即使积极、正规治疗近期预后仍不理想。因此，寻找早期检测胃癌的特异性分子生物学标记物具有重要意义。

EGFR是一种分子量约为180 kDa的跨膜糖蛋白，具有配体诱导的酪氨酸蛋白激酶活性，一旦与表皮生长因子(EGF)结合，即可启动细胞核内的相关基因，促进细胞分裂增殖、抑制细胞凋亡。有研究发现，在胃癌、乳腺癌、膀胱癌等多种肿瘤组织中EGFR高表达[8～10]，其高表达者预后差、肿瘤转移可能性大[11]。c-Met是一种由c-Met原癌基因编码的蛋白产物，亦具有酪氨酸激酶活性，与多种癌基因产物和调节蛋白相关，参与细胞信息传导、细胞骨架重排的调控，是细胞增殖、分化的重要调节因子。目前认为，c-Met与多种恶性肿瘤的发生、发展和转移密切相关。在胃癌组织中c-Met高表达，其高表达与胃癌转移密切相关[12，13]。Peng等[14]经Meta分析发现，胃癌组织c-Met表达越高，患者生存时间越短。表明c-Met高表达参与胃癌的发展与侵袭，可导致患者病情恶化，预后不良。Ki-67是一种具有非组蛋白特点的核蛋白，存在于具有增殖活性的细胞核中，由第10号染色体长臂所属基因转录、翻译而成。该蛋白与细胞增殖活性密切相关，是目前评估肿瘤细胞增殖的蛋白之一。有研究证实，胃癌组织Ki-67阳性表达明显高于正常胃黏膜组织[15]，表明Ki-67高表达可能参与了胃癌的发生、发展过程。

本研究结果显示，胃癌组织EGFR、c-Met阳性表达率及Ki-67高表达率均高于正常胃黏膜组织，表明EGFR、c-Met和Ki-67可能参与了胃癌的发生、发展过程。目前，对EGFR、c-Met和Ki-67在胃癌组织中表达的关系尚未明确。本研究发现，随EGFR表达增加，c-Met表达亦呈增加趋势，二者呈正相关关系，由此推测EGFR、c-Met在胃癌的发生、发展过程中可能具有协同作用；EGFR与Ki-67、c-Met与Ki-67表达同样呈正相关关系，说明三者对胃癌的发展具有协同作用，但目前关于三者相互影响的具体机制尚不明确。

综上所述，胃癌组织EGFR、c-Met、Ki-67表达升高，三者在促进胃癌的发生、发展中具有协同作用。

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(稿件编号：2016-09-22)

承德市科学技术研究与发展计划(201601A018)。

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.08.024

R735.2

B

1002-266X(2017)08-0075-02