胃癌患者血清VEGF-C、VEGF-D浓度水平与淋巴结转移状态相关性的临床研究

徐冬冬,王大广,所 剑

(吉林大学白求恩第一医院 胃结直肠肛门外科,吉林 长春130021)

*通讯作者

胃癌患者血清VEGF-C、VEGF-D浓度水平与淋巴结转移状态相关性的临床研究

徐冬冬,王大广,所 剑*

(吉林大学白求恩第一医院 胃结直肠肛门外科,吉林 长春130021)

胃癌是临床常见恶性肿瘤之一,位居所有恶性肿瘤第2位[1]。淋巴结转移是其恶性生物学行为之一,与胃癌患者的分期、预后密切相关,同时也是临床上决定是否给予进一步治疗的依据。目前对淋巴结转移状态准确判断是术后病理分期。但如何能在术前对淋巴结转移状态进行判断是临床研究的热点。血管内皮生长因子(VEGF)是一种内皮调控因子,其中VEGF-C、VEGF-D在新生淋巴管的形成上发挥重要的作用。此文旨在探究胃癌与健康志愿者、相同T分期不同淋巴结转移状态下VEGF-C、VEGF-D的差异性,以期寻找可预测淋巴结转移状态的指标。

1 资料和方法

1.1 一般资料 本研究中实验组血清样本来自2008年8月至2012年8月吉林大学第一医院胃肠外科的手术患者。术前明确诊断为胃癌,且初发肿瘤、癌灶单发、无远处转移、术前未接受治疗、无明显急性炎症反应、术前检查未见明显异常。其中45例患者术后病理确认为T2N0期10例、T2Nx期35例。对照组来自20例健康自愿者。所有受试者血液采集均在术前一日,空腹采肘静脉血,血样采集后离心取上清,于-80℃下冰冻保存,室温下解冻使用。

1.2 方法 使用人VEGF-C、VEGF-D检测试剂盒(上海源叶生物科技有限公司)检测血清VEGF-C、VEGF-D的浓度水平,设置12个标准孔,样本和标准品均进行双孔检测取平均值。严格按照试剂说明书进行,稀释倍数5倍,测定各孔在450 nm下的光密度值。根据标准曲线得出VEGF-C、VEGF-D的浓度水平。

1.3 统计学处理 采用 SPSS 17.0 软件对所得数据进行统计分析。胃癌患者和健康人的血清VEGF-C、VEGF-D浓度水平分布情况未知。相关文献也未见相关介绍。因此首先应用统计分析软件Shapiro-Wilk法对样本进行正态性检验,本研究计量资料符合正态分布,计量资料用 (x—±s) 表示,采用t检验。检验水准定为0.05,P<0.05认为有统计学差异。

2 结果

2.1 胃癌患者血清VEGF-C、D的浓度分别为233.3±127.9 pg/ml、268.3±133.0 pg/ml。健康成人VEGF-C、D的浓度分别92.83±37.00 pg/ml、128.3±64.7 pg/ml。VEGF-C、D在胃癌患者和健康人间,差异均有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 胃癌患者和健康人VEGF-C、VEGF-D浓度水平(pg/ml)

2.2 胃癌患者血清VEGF-C、D浓度与临床病理学特征相关性分析 T2期胃癌患者血清VEGF-C、D浓度水平与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置、病理类型无关,但在淋巴结转移阳性和阴性之间差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

3 讨论

VEGF-C和D是VEGF家族的新成员,VEGF-C是 1996 年由Joukov V[1]首次克隆并分离出的 VEGF 家族的一个新成员,由于其是第一个具有诱导淋巴管生成作用的生长因子,故也被称为淋巴管生长因子[1]。VEGF-D 是 1998 年由Achen[2]在核酸数据库中通过同源性搜索发现的第二个淋巴管生长因子。VEGF-C、D是高度糖基化的碱性蛋白,对血管内皮细胞有高度特异性,通过内皮细胞的特异性受体刺激血管内皮细胞增殖和毛细血管袢形成,不仅参与了肿瘤血管的发生、增殖,还直接参与了肿瘤的浸润、转移。研究表明VEGF-C和D与淋巴管内皮细胞上的VEGFR-3受体结合,促进淋巴管再生,进而促进肿瘤淋巴结转移[3,4]。目前,人们对胃癌组织中VEGF-C和D与肿瘤侵润、淋巴转移有较一致意见,胃癌组织中 VEGF-C和D的表达水平明显高于正常组织,表明 VEGF 与 胃癌进展及预后密切相关[5]。Watanabe等[6]证实 VEGF-Cm RNA 水平与胃癌患者淋巴结转移显著性相关,VEGF-C 蛋白表达水平与术后淋巴结组织内淋巴管密度呈正比,提示 VEGF-C 可能参与胃癌淋巴管生成并加速淋巴结转移。但有关胃癌血清中VEGF-C和VEGF-D水平与胃癌淋巴转移的关系研究较少。

表2 T2期胃癌患者血清VEGF-C、VEGF-D浓度水平与临床病理学特征相关性分析

为控制淋巴结转移为单一变量,本研究选取实验组血清样本均为T2期,参照国际抗癌联盟(UICC)的2010第7版分期,包括T2N0、T2N1、T2N2、T2N3。结果表明,T2期胃癌患者血清VEGF-C、D与健康成人对照组有显著差异。进一步分析实验数据,相同浸润深度,但不同淋巴结转移状态的T2N0和T2Nx之间血清VEGF-C、D亦有显著差异。而VEGF-C、D在不同年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、分化类型组别上无统计差异。这一结果提示我们,术前联合测定VEGF-C和VEGF-D可能成为预测淋巴结转移的辅助指标之一。对手术和治疗方案的选择有一定的临床意义。

与其他肿瘤一样,胃癌的发生发展与许多基因、蛋白有关系。临床一线的外科医生希望寻找的一种特异的标志物来对淋巴结转移状态进行预测,以决定手术方式、评估胃癌的发展和预后。但目前尚未发现一个高敏感性、高特异性的标志物。近年新兴的有关胃癌蛋白质组学、代谢组学的相关研究可能为寻找特异性的标志物开辟新的途径。

[1]Van Cutsem E.Treatment of advanced gastric cancer：new findings on the activiti of the taxanes[J].The Oncologist,2004,9(12):9.

[2]Joukov V,K Pajusola,A Kaipainen,et al.A novel vascular endothelial growth factor,VEGF-C,is a ligand for the Flt-4 (VEGFR-3) and KDR(VEGFR-2) receptor tyrosine kinases[J].The EMBO journal,1996,15(2):290.

[3]Achen MG,Jeltsch M,Kukk E,et al.Vascular endothelial growth factor D(VEGF-D) is a ligand for the tyrosine kinases VEGF receptor 2(Flk-1) and VEGF receptor 3 (Flt-4)[J].Proc Natl Acad Sci USA,1998,95(2):548.

[4]Kukk E,Lymboussaki A,Taira S,et al.VEGF-C receptor binding and pattern of expression with VEGFR-3 suggests a role in lymphatic vascular development[J].Development,1996,122(2):3829.

[5]He Y,Rajantie I,Pajusola K,et al.Vascular endothelial cell growth factor receptor 3-mediated activation of lymphatic endothelium is crucial for tumor cell entry and spread via lymphatic vessels[J].Cancer Research,2005,65(11):4739.

[6]Zhao DQ,Chen J,Wu YF,et al.Correlation between vascular endothelial growth factor and somatostatin receptor with progression and prognosis in gastric cancer[J].Hepatogastroenterology,2014,61(132):1154.

[7]Watanabe M,Tanaka H,Ohira M,et al.Intranodal lymphangiogenesis precedes development of lymph node metastasis and accelerates progression of gastric cancer[J].Journal of Gastrointestinal Surgery，2014,18(3):481.

1007-4287(2017)03-0492-02

徐冬冬(1990-),男,辽宁辽阳人,吉林大学第一医院胃结直肠肛门外科,在读硕士研究生。

2016-04-16)