HPLC—MS法测定三子散中川楝素的含量那顺

白乙拉 孟和 王苏宁

【摘要】目的：采用液相色谱-质谱联用法测定三子散中川楝素的含量。方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-001%甲酸溶液（31∶[KG-*3/5]69）为流动相；采用单级四极杆质谱检测器，电喷雾离子化（ESI）负离子模式下选择质荷比（m/z）573离子进行检测。结果：川楝素对照品在000997～014988μg范围之内与两个峰面积之和具有良好的线性关系（r=099999）；平均加样回收率为998%，RSD为06%（n=6）。结论：该方法稳定、准确，可用于三子散的质量控制。

【关键词】三子散；川楝素；高效液相色谱-质谱法

【中图分类号】R284【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2017）06-0023-02

三子散为2015版《中国药典》一部[1]收载的品种，由诃子、川楝子和栀子三味药材组成，具有清热凉血、解毒的功效，主要用于温热、血热、新久热。其中川楝子具有疏肝泄热、行气止痛、杀虫的功效。川楝素是从楝科植物苦楝皮和川楝子中提取、分离得到的一种四环三萜类化合物。作为天然药物，川楝素在驱虫、治疗肉毒毒素中毒、抗肿瘤、抑菌等方面均显示了良好的药理活性。为了该制剂的安全、有效、质量可控，采用高效液相色谱-质谱法测定该药中川楝素的含量。

1仪器和材料

11仪器LCMS-8030液相色谱质谱联用仪（岛津公司）；WatersXBridgeC18色谱柱（21mm×100mm，25μm）；XS3DU百万分之电子天平（梅特勒） 。

12材料川楝素对照品（批号：111842-201503，含量968%，中国食品药品检定研究院），三子散（批号：1511034、1601056、1601057，内蒙古蒙药股份有限公司）。乙腈为色谱纯，水为高纯水。

2方法和结果

21色谱条件流动相为乙腈-001%甲酸溶液（31∶[KG-*3/5]69）；采用单级四极杆质谱检测器，电喷雾离子化（ESI）负离子模式下选择质荷比（m/z）573离子进行检测；进样量：5μL。理论板数按川楝素峰计算应不低于8000。阴性对照色谱在川楝素两个峰保留时间处无干扰。见图1。

22对照品溶液的制备精密称取川楝素对照品，加甲醇制成每1mL含000997mg的溶液，即得。

23样品溶液的制备取三子散1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

24阴性对照溶液按处方比例及生产工艺制备的不含川楝子的粉末，并按样品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

25线性关系考察精密称取川楝素对照品4985mg，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。在精密量取上述对照品溶液2mL，置100mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液1、2、5、8、10、15μL注入仪器中，记录色谱图，以对照品的进样量为纵坐标，以两个峰面积之和为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=33978×107X-20673830，r=099999，结果表明川楝素在000997～014988μg范围之内呈良好的线性关系。

26精密度试验取供试品（批号：1601056），按“23”方法制备样品溶液，连续进样6次，测定川楝素色譜峰面积，川楝素的两个峰面积之和计算6次的平均面积为3119856，RSD为08%。

27重复性试验取供试品（批号：1601056）6份，分别按“23”方法制备样品溶液，进行含量测定，结果川楝素的平均含量为086mg/g，RSD为06%。表明本试验重复性良好。

28稳定性试验取供试品（批号：1601056）样品溶液，分别于0、2、5、10、15、24h进样测定，记录峰面积，结果峰面积的RSD为13%，表明本样品溶液在24h内稳定。

29加样回收率试验[5]取已知含量的样品（批号：1601056，含量：086mg/g）6份，每份约05g，精密称定，分别精密加入川楝素对照品适量，按“23”方法测定含量，并计算回收率。

3讨论

按2015版《中国药典》一部川楝子的含量测定方法对三子散中川楝素进行含量测定，此方法具有样品预处理简单、回收率高、重复性好、专属性强等优点，可作为三子散的质量标准检验方法，能够更有效控制样品的质量。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2015.

[2]杨冠华，李阳，张丽，等. 反相高效液相色谱法测定川楝子中阿魏酸含量[J].广州化工，2011（3）：11-12.

[3]南京中医药大学编.中药大辞典[M].上海：上海科技出版社，2006：308-310.

[4]常新全，丁丽霞.中药活性成分分析手册[M].北京：学苑出版社，2002：292-293.

[5]刘素梅，方忠意，韩立，等.三子散中川楝子的鉴别及栀子苷的含量测定[J].中国兽药杂志，2013（3）：38-40.