CK19、P53在甲状腺癌中的表达及其临床意义

张伟华+闫斌+刘可心

【关键词】 甲状腺癌；甲状腺癌旁；CK19；P53；病理组织；临床意义

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.01.033

甲状腺癌是内分泌系统最常见的肿瘤， 占头颈部恶性肿瘤的5.11% ， 占所有恶性肿瘤的 3.00% ， 占癌症死亡的0.20% [1]。近些年， 甲状腺癌（thyroid cancer， TC）在全球范围内的发病率逐年升高， 冯红芳等[2]报道从2008～2013年， 甲状腺癌发病率显著增加， 尤以甲状腺乳头状癌（papillary thyroid cancer， PTC）增加了4.09%， 女性患者是男性的3.75倍。乳头状腺癌是甲状腺癌最为常见的一种类型 ， 占甲状腺癌的60%～70%， 与其他类型相比乳头状癌的恶性程度较低， 发展相对缓慢， 从发现肿块到手术确诊， 5年以上存活率大约达到30%左右， 生存率最长可达20年左右。肿瘤常单发， 原发灶大多较小 [3-5]。颈部淋巴结转移灶率较高、出现早、范围广， 但是发展较为缓慢[6]。甲状腺癌组织学上有四种主要类型：乳头状癌、滤泡癌、髓样癌、未分化癌。本次实验中同样乳头状癌（95.1%）最多见， 与其他地区的报道相近[7]；髓样癌、未分化癌低于其他地区的报道。由于颈部超声配合超声下甲状腺穿刺细胞学检查提高了甲状腺癌的检出率， 特别是微小癌的检出率[8]。甲状腺癌的组织学分型除与预后关系相当密切外， 与肿瘤的其他生物学行为的关系也较其他器官明显得多。因此， 遇到一个甲状腺肿瘤， 做好良恶性的判断、组织学分类、预后的判断显得尤为重要。

1 材料与方法

1. 1 标本来源 病理标本来自2014年1月～2015年12月吉林省四平市中心医院普外科行手术且病理证实的102例甲状腺癌患者， 包括甲状腺乳头状癌病理组织标本97例、甲状腺髓样癌3例， 甲状腺混合性癌（滤泡癌、乳头状癌）1例， 甲状腺鳞状细胞癌1例， 术前患者均未行放化疗。甲状腺癌病理组织标本中男 18例， 女84例， 男女比例1：4.7， 年龄 23～68岁， 36～55岁为发病高峰。病理组织标本取材包括肿瘤原发灶及周边组织， 同时避开钙化区及坏死区。

1. 2 试剂 细胞角质白19（CK19）兔抗人抗体购自于福州迈新生物科技公司、兔抗人P53购自于北京中杉金桥生物科技有限公司、SP法免疫组织化学试剂盒购自于北京中杉金桥物科技有限责任公司、枸橼酸钠抗原修复液及联苯二胺（DAB）显色剂购自于中国福州迈新生物科技公司。

1. 3 免疫组织化学技术CK19、P53在甲状腺癌中的阳性表达 具体步骤按照试剂盒的操作说明进行， 组织切片置于显微镜下进行观察， 抗原阳性表达为细胞胞浆中出现棕黄色或棕褐色的颗粒；评价依据阳性表达细胞的染色强度和百分比分别计分， 然后相加得到总积分。

1. 4 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。 P<0.05表示差异具有统计学意义。采用灵敏度、特异度和诊断符合率来评价CK19、P53诊断甲状腺癌及淋巴结转移中的价值。

2 结果

2. 1 CK19、P53 阳性表达为细胞质、细胞核中出现棕黄色或棕褐色颗粒。CK19在 102例甲状腺癌组织中阳性表达的例数102例， 阳性率为 100.0%；在癌旁正常甲状腺组织中阳性表达的例数为36例， 阳性率为35.3%， 比较差异具有统计学意义（P<0.01）。P53在102例甲状腺癌组织中阳性表达的例数为 73例， 阳性率为 71.6% ；在癌旁正常甲状腺组织中的阳性表达例数为28例， 阳性率为27.5%， 比较差异具有统计学意义（P<0.01）。在甲状腺良恶性疾病中CK19鉴别诊断的灵敏度为100.0%、特异度为64.7%、诊断符合率为82.4%；P53阳性表达的灵敏度为 71.6%、特异度为72.5%、诊断符合率为 72.1%。见表1。

2. 2 102例甲状腺癌组织中有26例淋巴结转移， 其中有18例

P53阳性表达， 阳性表达率69.2%；无淋巴结转移P53阳性例数为27例， 阳性率为35.5%， 甲状腺癌淋巴结转移的组织中P53阳性明显高于未转移的甲状腺癌阳性表达， 差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3 讨论

随着甲状腺癌的发病率增高， 病理医生的诊断水平也在逐步提升， 但是对于滤泡上皮排列较为特殊以及极为微小癌的诊断， 临床诊断还较为困难。CK19是由上皮细胞所分泌的一种糖蛋白 ， 主要标记各种单层上皮包括腺上皮， 主要用于腺癌的诊断。对于甲状腺乳头状癌与滤泡癌、滤泡性腺瘤以及良性增生性滤泡的鉴别中具有重要价值[9， 10]。CK免疫组化染色时常常在切片上出现斑点状假阳性反应， 李鹏飞等[11]研究发现 ， 在甲状腺乳头状癌中存在 CK19 弥漫性阳性表达 ， 主要定位于细胞质 ， 阳性率达到95%， 在甲状腺良性病变或正常甲状腺组织中阳性表达占8.5%。因此， CK19在甲状腺癌中表达呈强阳性， 但在甲状腺良性或者正常组织中多呈现弥漫性或者灶性 ， 且阳性较弱。本实验中 ， CK19 在甲状腺癌中的阳性表达率为 100.0%， 并且多呈强阳性， 而在癌旁正常甲状腺中的阳性表达率为35.3%， 对于良恶性病变的诊断敏感度和特异度分别为100.0% 和 64.7%， 特异度并不非常理想 ， 与佟杰等[12]报道接近。但CK19 的强阳性表达对于提高临床诊断准确率有一定的參考价值。

P53蛋白是P53基因编码分子量为53KD的核磷酸蛋白， 野生型P53基因功能与细胞分化、DNA合成修复以及细胞程序性死亡有关， 是一种抑癌基因。P53基因异常， 表现为野生型P53的缺乏， 突变型P53扩增， 是人体恶性肿瘤中常见的基因改变[13]。P53作为细胞周期G1-S期检查点控制因子参与细胞周期调控， P53基因的异常与肿瘤的恶性行为及不良预后有关[14-20]。李田军等[17]对甲状腺肿瘤研究发现P53的突变是甲状腺肿瘤发生中的晚期事件， 其存在常提示预后不良。本实验中， P53在甲状腺癌中的阳性表达率是71.6%， 淋巴结转移率是69.2%， 提示 P53 基因突变可能参与了甲状腺癌的发生、发展， 并与甲状腺癌的进展、侵袭和转移有关。

综上所述， CK19、P53 在甲状腺癌及癌旁正常甲状腺组织中的阳性表达明显增强， 是甲状腺良恶性肿瘤诊断、鉴别诊断的重要辅助指标， 对预后的评估有一定的参考。

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