miRNA—204和miRNA—672热性惊厥患儿血清中的表达及临床意义

徐健+刘金龙+江娇

【中图分类号】R72.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2017）02--01

热性惊厥（Febrile seizures， FS）是小儿时期较常见的中枢神经系统功能异常的紧急症状[1] ， 如果反复发生，具有发展成癫痫的可能性，导致智力低下，增加死亡的危险。随着对非编码RNA的深入研究，尤其MicroRNA（miRNA）在神经系统疾病中的作用日益受到重视。miRNA在神经系统中特异表达，与神经系统的发育、生长等相关[1]。miR-204和672是研究较为广泛的一种miRNA，它们大鼠海马和皮层中都有着丰富的表达，参与了神经元存活与凋亡、轴突延伸及重塑及突触形成过程的调控。本研究通过检测FS患儿血清中miRNA-204和miRNA-672表达情况，探讨miRNA在FS中的临床价值，提供更好的临床指导。

1资料与方法

1.1 研究对象

（1）FS组：选取2016年5月—2016 年12月来我院就诊的50例FS儿童（不包括新生儿）， 根据病史及临床特征， 男25例， 女25例， 年龄1-5岁。（2）对照组： 25例为健康体检者儿童， 男15例，女10例。既往均无FS及癫痫病史。所有FS患儿治疗方案均告知家长，并在家长签署同意书的情况下执行。

1.2 研究方法

1.2.1 临床血液样本收集

抽取FS患儿静脉血5 ml， 3000rpm/min， 离心10 min，取上清凍存于-80℃，准备PCR表达检测。对照组样本按上述方法进行同样的处理。

1.2.2 荧光定量PCR检测 PCR扩增反应参数：预变性95℃、10min， 变性95℃、15s，退火60℃、15s，延伸72℃、30s ，40个循环。β-actin基因为内参基因。根据公式2-△△ct=[ct（target）-ct（actin）]A -[ct（target）- ct（actin）]B，分析两组间相对表达量。引物序列如表1所示

1.3 统计学处理

各组数据均以 （ x ± s） 表示，采用SPSS 17. 0 统计软件进行统计学分析。两组间统计分析采用t检验，P<0.05具有显著性差异。

2.结果

2.1 miRNA-204在FS患儿血清中的表达检测

FS组患者血清中miRNA-204表达水平显著高于正常对照组，具有显著性差异（P<0.01），如图1所示。

2.2 miRNA-672在FS患儿血清中的表达检测

FS组血清中miRNA-627表达水平显著高于正常对照组，具有显著性差异（P<0.01），如图2所示。

3.讨论

本临床实验研究结果显示，miRNA-204和miRNA-672在FS组中表达水平呈现高表达模式，说明它们参与了FS疾病的发生发展过程。miRNA在神经元发育过程中发挥重要作用，包括神经元存活、突触可塑性，参与癫痫、脑卒中等疾病发生过程。研究发现，miR-204在神经元具有高表达现象，可能在维持神经元功能发挥重要作用。miRNA通过对靶基因进行调控实现生物学功效，而靶基因的筛选是探索miRNAs具体功能的关键。研究表明，miR-204可以通过影响其靶基因SIRT1表达影响惊厥发生。SIRT1高表达可以阻止神经元死亡，对神经系统起到一种保护作用[2]。

综上所述，本文通过检测FS患儿血清中miRNA-204miRNA-672的临床表达情况，提示miRNA-204miRNA-672在FS中的发生发展过程中发挥着重要作用。miRNA可能会成为一种新的潜在的临床干预靶点，希望能够为临床FS的治疗提供更可靠的临床依据。

参考文献

[1] Smith B，et al. Large-Scale Expression Analysis Reveals Distinct MicroRNA Profiles at Different Stages of Human Neurodevelopment[J]. Plos One， 2010， 5（6）：e11109.

[2]Wang J， et al. Protective effects of resveratrol through the up-regulation of SIRT1 expression in the mutant hSOD1-G93A-bearing motor neuron-like cell culture model of amyotrophic lateral sclerosis[J]. Neuroscience Letters， 2011， 503（3）：250-255.。