丹红注射液辅助治疗对糖尿病肾病患者血小板CD62p、血小板激活复合物-1表达的影响

李明霞 于 佩 王俊芳 赵轶峰 任卫东 张 斌

(河北北方学院附属第一医院，河北 张家口 075000)

丹红注射液辅助治疗对糖尿病肾病患者血小板CD62p、血小板激活复合物-1表达的影响

李明霞 于 佩1王俊芳2赵轶峰 任卫东 张 斌

(河北北方学院附属第一医院，河北 张家口 075000)

目的 观察丹红注射液辅助治疗对糖尿病肾病(DN)患者血小板活化依赖性颗粒表面膜蛋白(CD62p)、血小板激活复合物(PAC)-1表达的影响。方法 95例DN患者随机分为对照组与治疗组，治疗组在常规疗法的基础上静注丹红注射液(20 ml/次)，采用流式细胞术检测治疗前后CD62p、PAC-1的表达。结果 治疗前两组DN患者的血小板CD62p、PAC-1无显著差异；对照组常规治疗后血小板CD62p、PAC-1无明显变化；治疗组联合丹红注射液治疗显著降低了血小板CD62p、PAC-1阳性表达率；且治疗组治疗后的血小板CD62p、PAC-1显著低于对照组治疗后。结论 丹红注射液辅助治疗可明显抑制DN患者血小板活化，这对于降低血栓形成是有利的。

丹红注射液；糖尿病肾病；血小板活化依赖性颗粒表面膜蛋白；血小板激活复合物-1

微血管病变引起的肾小球硬化、肾小管上皮细胞坏死是导致糖尿病肾病(DN)最终发展为慢性肾衰竭乃至死亡的关键环节〔1，2〕。在DN的发展过程中，血小板活化或血管内皮细胞损伤引起的微血栓形成起了关键作用。为此从防止血小板活化角度延缓DN的进展，已成为目前糖尿病治疗的关键〔3〕。血小板活化依赖性颗粒表面膜蛋白(CD62p)与血小板激活复合物(PAC)-1是引起血小板活化、形成微血栓的关键介质〔4，5〕，因此，从抑制CD62p与PAC-1表达的角度，抑制血小板活化，已成为DN治疗的新靶点〔6，7〕。目前，中药治疗糖尿病及其并发症已取得了很好的效果〔8〕。其中，丹红注射液具有抑制微血栓形成、改善微循环的作用，目前已用于DN的辅助治疗，并已取得了一定的疗效〔9〕。但其是否通过抑制DN患者血小板的CD62p与PAC-1表达、从而减少血小板活化与微血栓形成还不清楚。为此，本研究观察丹红注射液辅助治疗对DN患者血小板CD62p与PAC-1表达的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2006年10月至2010年3月在我院内分泌科、肾内科住院的DN患者95例。纳入标准：病程≥10年；2型糖尿病；尿白蛋白排泄率(UAER)值>200 μg/min〔10～12〕。排除标准：排除入院前发生过心肌梗死、心绞痛、脑梗死、间歇性跛行等糖尿病大血管病变及下肢动静脉血栓、慢性肝病、肺部疾病、慢性心功能不全、尿路感染、酮症酸中毒及使用肾毒性药物等；排除入院前无急慢性炎症；排除近1个月未应用阿司匹林、华法林、潘生丁等作用于血小板的药物。其中男45例，女50例；平均年龄(55.18±6.32)岁；平均糖尿病病程(14.35±2.34)年。随机分为对照组(n=45)、治疗组(n=50)，两组患者性别、年龄、体重指数(BMI)等基线资料无显著差异(P>0.05)。

1.2 治疗方法 两组患者常规治疗：应用化学降糖药和胰岛素强化降糖，严格将血糖控制在7 mmol/L水平以下；应用同种类型同一厂家生产的血管肾张素转换酶抑制剂类降压药物，严格控制血压在130/80 mmHg以下(除外血压低者)；血脂异常者应用常规方法调脂药疗；限制蛋白质饮食1.0～1.2 g·kg-1·d-1。治疗组在此基础上加用丹红注射液(济南步长制药有限公司)20 ml静脉滴注，1次/d，2 w为1个疗程。

1.3 指标检测 所有入选病例，在入院后完成常规检查后的第3天，早8：00应用3.8%枸橼酸钠抗凝的真空采血管采集空腹静脉血2 ml，应用FACS Calibur流式细胞(美国Becton Dickion公司)仪检测血小板CD62p、PAC-1以及CD62p+PAC-1的阳性表达率。藻红蛋白标记的抗CD62p单克隆抗体(CD62p PE)、异硫氰酸荧光素标记的抗PAC-1单克隆抗体(PAC-1 FITC)购自美国Becton dickion公司。治疗2个疗程结束后，留取空腹静脉血，检测血小板CD62p、PAC-1的表达情况。

1.4 统计学方法 应用SPSS13.0软件进行t检验。

2 结 果

血小板被十字线分为四群：左下是PAC-1、CD62p同时阴性的血小板；左上是CD62p阳性PAC-1阴性的血小板；右上是PAC-1、CD62p同时阳性的血小板；右下为PAC-1阳性CD62P阴性的血小板。分别以单纯CD62p阳性(CD62p+PAC-1-)血小板、单纯PAC-1阳性血小板(CD62p-PAC-1+)以及CD62p、PAC-1同时阳性(CD62p+PAC-1+)血小板占血小板总数的百分比表示结果。治疗前，两组患者血小板的CD62p+PAC-1-、CD62p-PAC-1+、CD62p+PAC-1+的百分比均无统计学意义(P>0.05)；对照组常规治疗前后血小板CD62p+PAC-1-、CD62p-PAC-1+、CD62p+PAC-1+的百分比无统计学意义(P>0.05)；治疗组联合丹红注射液治疗显著降低了血小板CD62p+PAC-1-、CD62p-PAC-1+、CD62p+PAC-1+的百分比(P<0.05)；且治疗组治疗后的血小板CD62p+PAC-1-、CD62p-PAC-1+、CD62p+PAC-1+的百分比显著低于对照组治疗后(P<0.05)。见表1。

表1 丹红注射液治疗对DN患者血小板CD62p、 PAC-1表达的影响

与本组治疗前比较:1)P<0.05；与对照组治疗后比较:2)P<0.05

3 讨 论

丹红注射液是中药丹参、红花提取物的中药注射剂，丹参与红花均具有抑制血小板聚集、激活纤溶从而发挥抗血栓形成的作用，从而较好地改善微循环。本研究结果表明，丹红注射液辅助治疗DN，可明显降低DN患者血小板CD62p、PAC-1的比例，从而发挥抑制血小板活化的作用，这对于降低血栓形成是有利的。CD62p属黏附分子之一，为分子量为140 kD的膜糖蛋白，位于血小板α颗粒和血管内皮细胞内，在DN发生发展中的作用越来越受到人们的重视〔13〕。研究显示，在发生DN患者的血浆CD62p浓度显著高于无DN患者；高浓度的CD62p是介导单核细胞和T淋巴细胞聚集在肾小球和肾间质、从而恶化炎症反应的主要因素〔14〕。PAC-1是激活的糖蛋白Ⅱb/Ⅲa特异性单克隆抗体，血小板PAC-1表达可作为糖蛋白Ⅱb/Ⅲa激活的特异性标志，是反映血小板活化的早期标志物〔15〕。鉴于CD62p与PAC-1在DN发生、发展以及血栓形成中的作用，本研究结果显示丹红注射液降低CD62p与PAC-1表达的阳性作用。因此，可以说，丹红注射液辅助治疗DN的作用机制与降低血小板CD62p、PAC-1表达有关。以此为研究靶点，可进一步扩展丹红注射液在血栓性疾病中的治疗范围。同时，可能还有许多未知的药理学作用涉及丹红注射液对DN患者的治疗机制，这需要在今后动物实验与临床研究中进一步探讨。

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〔2015-09-23修回〕

(编辑 苑云杰/曹梦园)

于 佩(1972-)，女，主任医师，博士，博士生导师，主要从事内分泌学研究。

李明霞(1980-)，女，硕士，主治医师，主要从事糖尿病治疗的临床研究。

R587.1；R285.6

A

1005-9202(2017)04-0882-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.043

1 天津医科大学代谢病医院 2 秦皇岛卫生学院