420例流产物染色体核型分析

邓月月 刘文华 戴莺莺

420例流产物染色体核型分析

邓月月 刘文华 戴莺莺

目的 探究流产物染色体异常核型。方法 选择420例首次流产（早期流产）患者的宫腔搔刮或负压抽吸的流产物进行染色体核型分析。 结果 420例样本染色体核型分析结果正常145例（34．5%），异常230例（54．8%），体外培养未见细胞生长45例（10．7%）。230例染色体异常样本中以染色体数目异常最为常见，主要有16-三体42例（18．2%）、三倍体28例（12．2%）、X单体25例（10．8%）、四倍体12例（5．2%）、15-三体12例（5．2%），其他类型染色体异常包括染色体片段缺失、重复、插入、易位等。结论染色体异常是早期流产的重要原因，其中16-三体是最常见的染色体异常核型。

核型分析 流产物 染色体异常

流产是指妊娠不足28周、胎儿体重不足1 000g而终止的情况。有文献报道临床诊断妊娠者发生流产的概率约为15%，其中2次及上自然流产的发生率为2.2%～4.0%[1]。相关研究表明胚胎、胎儿染色体异常是早期流产的常见病因之一，占50%～60%[2]。染色体异常主要包括数目异常和结构异常，常见的异常核型有三倍体、多倍体、X单体等。妊娠合并染色体异常的结局为流产的概率高达99%。复发性流产者的流产物染色体异常发生率较高，目前可采用胚胎或胎儿流产组织体外培养法检测染色体异常。有学者推荐对一次流产者的流产物进行细胞遗传学分析，故笔者收集420例首次流产（早期流产）患者的宫腔搔刮或负压抽吸的流产物进行染色体核型分析，以探究流产物染色体异常核型，现将研究结果报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 收集2014年12月至2016年6月在本院计划生育门诊就诊的528例首次流产（早期流产）患者的宫腔搔刮或负压抽吸的流产物，并存于密封的容器。本研究获得本院人体研究伦理委员会批准。

1.2 方法 由高年资的细胞遗传学研究者分离流产物样本，取胚胎或绒毛组织进行体外培养，供染色体核型分析；其中108例不含胚胎或绒毛组织的样本均丢弃，共分析染色体核型样本420例。将样品置于5ml的培养基（pH7.0）中，在CO2、37℃环境中培养24～48h；然后置于2个Leighton管[一个含有半Chang DⓇ，另一个含有AmniomaxⓇ（2.5ml，pH7.0）]中制备培养物，在CO2、37℃的环境中温育；当有足够的组织生长时，每5ml培养物中加入60μl秋水仙碱，持续45min；最后除去生长培养基，在室温下加入1%柠檬酸钠10min。以上步骤重复2次，然后制板并用G带染色。

1.3 观察指标 计算早期流产患者的流产物各种类型染色体异常所占的比例，即某类型染色体异常例数/染色体异常总数。

2 结果

2.1 染色体核型分析结果 420例样本染色体核型分析结果正常145例（34.5%），异常230例（54.8%），体外培养未见细胞生长45例（10.7%）。230例染色体异常样本中以染色体数目异常最为常见，主要有16-三体42例（18.2%）、三倍体28例（12.2%）、X单体25例（10.8%）、四倍体12例（5.2%）、15-三体12例（5.2%），其他类型染色体异常包括染色体片段缺失、重复、插入、易位等，异常类型包括[+13，+15]、[+7，+16]、[+13，+21]、[+9，+13]、[+ 18，+21]、[+9，+14]、[+15，+21]、[+15，+16]、[Der（14；14）]、[Der（13；14）]、[Der（13；14）]、[Der（16；18）]、[Dup（7）（q21q34）]、[Der（10）t（10；16）（q25；q13）]、[R（14）（p11.2q32）]、[Der（6）t（6；X）（q11；q13）]、[48，XXY，+16]、[Add（17）（p11.2）]、[91，XXYY，+6，-21，-21]、[T（3；4）（q13；q35）]、[70，XXX，+ 22]、[68，XXX，-21]、[68，XXY，-17]、[Add（3）（p25，p26）]、[Dup（9）（q21q34）]、[Der（11；22）]、[-22，t（9；22）]、[Inv（Y）]、[T（3；13）（q27；q14）]、[Der（7）t（7；X）（q11；q12）]，见表1。

表1 染色体数目异常核型分析结果（n=230）

3 讨论

目前诊断不良孕产病因的主要方法是对流产物进行细胞遗传学分析，以便于指导治疗方案的制定，降低病因诊断成本[1]。早期流产的主要病因是染色体异常，相关研究表明55.4%的流产病因是染色体异常[3]。本研究结果表明最常见的染色体异常类型是16-三体，与以往研究结果一致[4-5]。三体多与流产者年龄相关，年龄越大则染色体异常发生率越高；对于年龄＜35岁且不伴有染色体异常的流产者，流产病因主要包括内分泌因素、免疫因素、解剖因素等。多倍体、X单体亦是流产的常见病因，但相关研究表明与年龄未见相关性[5]。本研究结果表明54.8%的流产病因是染色体异常，与以往研究结果基本一致[5-6]。一项115例早期流产者流产物核型分析结果表明，61%的流产病因是染色体异常，其中染色体数目异常占90%，染色体结构异常占10%[3]。一项相似的研究显示420例早期流产者流产物染色体核型分析结果异常率为46%。因此，流产物核型分析可用于早期病因诊断及指导治疗方案制定，降低病因诊断成本[1]。笔者建议对流产物核型分析结果正常的二次早期流产者，需查找其他病因。

综上所述，染色体异常尤其是非整倍体，是流产的重要病因。其中16-三体是最常见的染色体异常类型，其次为三倍体、X单体、四倍体、15-三体等。细胞遗传学分析对流产（尤其是复发性流产）具有重要的诊断价值。

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Cytogenetic analysis of miscarriage samples

Objective To examine the chromosome abnormalities in miscarriage samples．MethodsTissue samples were collected from uterine curettage or vocuum suction in 420 miscarriage patients,and the karyotype analysis was performed．Results There were 145 cases of normal results(34．5%),230 cases of abnormal results(54．8%),and in 45 samples there was no cell growth(10．7%)．In 230 abnormal samples numerical abnormalities were the most frequent,including 16-trisomy(42 cases), triploidy(28 cases),monosomy X(25 cases),tetraploidy(12 cases)and 15-trisomy (12 cases);the other abnormalities were chromosome deletion,duplication,insertion and translocation． Conclusion Cytogenetic alterations are important cause of miscarriages and 16-trisomy is the most frequent one．

Karyotype analysis Miscarriage Chromosomal alterations

2016-12-16）

（本文编辑：陈丹）

10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.5.2016-2119

310008 杭州市妇产科医院妇产科

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