无菌注射剂在生产过程中的无菌检查

顾少薇

（哈药集团三精制药有限公司 黑龙江 哈尔滨 150000）

摘 要：近些年来，各大媒体相继报道了因为注射剂污染造成的输液污染导致了患者出现败血症甚至严重的出现死亡等事件，这些事件的报道使医学界和社会各界对于注射剂的安全无菌给予了大量的关注，在生产过程中的灭菌杀菌也得到了各个注射剂生产厂商的关注和重视。其实注射剂细菌感染主要过程是药物中的微生物通过人体的机体作用导致的人体出现过敏、中毒、身体特征发生改变等严重的可能会危及生命。本文从无菌注射剂在生产过程中的问题以及在生产过程中各种无菌方法的验证检查来表现微生物感染在人类有机体中的运作，同事提出无菌注射剂在生产中应该注意的问题和对策建议。本文本着不断地完善我国注射剂的质量，为我国人民的健康负责的目的来进行研究，希望本文的研究成果能够对本行业中的有关学者有一定的借鉴意义，同时对注射剂的生产厂家有一定的现实指导意义。

关键词：无菌注射剂；生产过程；无菌检查

前言：无菌首先需要做的一件事就是灭菌，而灭菌在传统意义上来说是指能够在一定空间和时间内把环境中所存货的所有微生物杀死就是灭菌。经过近现代的发展，我们的灭菌工艺其实已经发展的较为完善。无菌检查则是建立在灭菌基础上的一种检测活动，现在每个国家都已经发展出自己体系下的无菌检查法。从灭菌的理论实验上看，灭菌的规律是遵循着数学意义上的对数原则的，从这个角度出发，就以为着其实每一次的灭菌都是不完全的灭菌，无论我们使用什么样的物理或者化学的方法，我们都不能保证所有的微生物已经在灭菌试验后不存在了； 从理论数量的角度来看，我们可以看到，尽管各国的在此方面的发展繁荣，无菌检查依然存在着很多争议，在研究过程中，我们需要充分的了解无菌检查法对于检查效度和信度方面的局限性。

1.无菌注射剂在生产过程中的无菌检查的方法

1.1薄膜过滤法

薄膜过滤法在抑制真菌和抑制细菌的效果在世界各国的药典中的操作步骤大概是差不多的，都是有对照组和实验组通过在不同杀菌条件下进行对比，检验注射液的无菌性。薄膜过滤法主要是通过盐酸地卡因和普鲁卡因这两种注射液来进行实验研究，为了防止实验偏离普遍性，实验人员在进行实验时每种注射液的批号各取20瓶，同一批号的这20瓶供试品通过集菌仪抽滤集菌，最后将霉菌培养基、液体硫乙醇酸盐培养基各120ml分别通过集菌仪抽到各自集菌器内，放置霉菌培养箱、隔水式恒温培养箱内，通过控制室内恒定的温度来保证环境的客观性，在这种规定的温度下，实验员逐日观察并记录是否有细菌生长。通过观察得出结论，我们可以知道通过薄膜过滤法进行的灭菌从理论上来讲是非常成功的，我们通过实验观察两周之后发现培养基中并没有明显的细菌生长，对照管中阳性检查为（+），符合规定，所以薄膜过滤法是一种很好的无菌检查办法。需要注意的是在使用不同的滤膜时，首先要分清样品的特性，有的样品是亲水性的，有的样品是亲脂性的，亲水性的样品应该选用硝酸纤维素滤膜，亲脂性的则选用醋酸纤维素滤膜；抗生素类的样品则可以考虑采用对抗生素本身不具有破坏性的一些滤膜。

1.2直接接种法

直接接种方法的原理就是检验通过环境的改变，注射液在环境改变中阳性菌不生长或者几乎不生长，我们就可以把其看作是一个合格的灭菌操作。这种检查方法主要是把定量的样品放进培养基中进行观察得出实验结论。为了实验的方便性和后期比较的直观性我们还是用盐酸地卡因注射液和盐酸普鲁卡因注射液来进行实验，分别取这两种注射剂20瓶，把同一个批号的样品试剂用无菌注射器直接取样，分别放入不同的培养基中，培养基按照《中国药典》的要求，一般是选用硫乙醇酸盐培养基管和霉菌培养基管这两种培养基基液，同时也需要作阳性的对照，这样通过两周的时间进行培养、观察、记录，我们得出结论，在两种培养基中都没有明显的细菌生长，这说明了其无菌生产合格。在一些细节方面，关于这个方法的操作过程，不同的流派有不同的观点，CHP认为消除样品的抑菌性可以采用稀释来完成，它规定了样品和培养基之间的确定比例；BP则认为要用改变环境的方法来消除样品的抑菌性。不管怎么说，他们的方法都通过了众多实验的研究，都有自身的立足的根据，在具体的实验中采取什么方法应该按照具体的试剂具体问题具体分析。

1.3两种方法的应用比较讨论

通过上述两种方法的实验研究，我们可以看出这两种方法都具有较高的科学性，实验的成功性是母庸置疑的，但是两种方法各有利弊，直接取样法节约资源只需要一点少量的试剂，但是这种方法很容易受到外界环境的干扰，它对实验人员和实验步骤有较高的要求。薄膜过滤则相对直接取样法来说花费更多的试剂，但是能够一定程度上减少环境对实验的影响，操作较为简单，对实验人员的要求较低，较容易完成。而且薄膜过滤法对于仪器的要求也十分简单，同时也能够大大的增强实验的可靠性，近些年来也得到了众多学者的信赖。薄膜过滤法的另外一个缺点就是集菌仪的价格昂贵，很少有科研机构或者研究者能够支付其巨大的仪器费用，直接取样法在这个方面就显得非常经济实惠，也是众多条件有限的学者们的首选之一。

2.关于如何在无菌注射剂生产过程中进行有效的无菌检查的建议

2.1不断提高研究的深度和实验人员的专业素养

灭菌工艺是一种十分专业工艺，需要在灭菌之前对整个工艺进行深入的研究和充分的了解，在一些需要控制含量的地方不断的加以深入的研究，掌握不同的剂量杜宇实验产生的差异和变化，掌握哪些因素会影响试剂的改变，在控制环境的时候需要做到的具体步骤，例如室内温度和湿度的控制应该如何实现，每种不同性质的試剂采取的处理方法是不一样的等等问题的研究都是非常必要的，这需要专业人员经过长时间的训练和操作才能形成的经验和知识素养。

2.2制定出标准型的规范是必要的

实验的操作规范是我们进行一项可靠的实验的基本保证，但是由于国内外的标准不统一，很多学科上的建设不够完善，导致试验过程中还是有很多规范的标准是难以统一，这对于学术进行国际间的交流的影响是深远的，这也造成了很多国家学术之间的隔阂，这种隔阂应该是现代我们的研究应该规避的方面，由此可见，出台一项通行的标准是具有跨时代的意义的。在无菌检查发方面的标准各国也是有不同的标准，合格与不合格的标准难以统一直接就导致了很多人钻了空子，损害了人民群众的根本利益。

2.3相关器皿的灭菌操作也是必要的

采用无菌制造工艺，与产品直接接触的容器、橡塞、与配制和灌装相关的储罐、管路、缓冲罐、灌装用具等均应灭菌，这项过过程能够充分地保证了实验的可靠性和科学性，能够方式其他污染源对于实验的破坏，所以说这一点也是非常重要的，但是往往在很多实验中没有得到实验人员的充分重视，导致了实验的失败。空气的净化也是应该得到重视的一个方面，空气是微生物直接赖以生存的一种很重要的因素，women实验中对于环境的控制其实就是对于空气中各个因素之间的控制。

3.结语

总而言之，无菌注射剂的安全范畴已经是社会各界关注的重点，相信在这样的关注下，我们的无菌注射剂的质量将会大大提高，得到人民群众的广泛的信任。两种较为常见的检查无菌注射剂的方法现在已经十分成熟，但是依然要看到其不足之处，希望在将来能够进行有效的修改。

参考文献：

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[2].中国药品生物制品检定所编.中国药品检验标准操作规范2000年版.中国医药科技出版社，405～411

[3]. 潘友文 钱维清 熊家娟，现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术.[M]，北京：中国协和医科大学出版社