薄层色谱法鉴别金菊五花茶颗粒中的射干苷

崔志海，张 辉

（廊坊市药品检验所，河北 廊坊 065000）

金菊五花茶颗粒是由金银花、木棉花、葛花、野菊花、槐花、甘草等6种药味经提取制成的颗粒剂，具有清热利湿、凉血解毒、清肝明目的功效，用于大肠湿热所致的泄泻、痢疾、便血、痔血以及肝热目赤，风热咽痛，口舌溃烂等症[1]。金菊五花茶颗粒现行标准为《卫生部药品标准》中药成方制剂第十册，标准中仅规定了一项理化鉴别和芦丁的薄层色谱法鉴别，缺少对葛花的专属性鉴别。本研究针对葛花主要含射干苷等异黄酮成分[2][3]的特性，参考有关文献资料，采用薄层色谱法对金菊五花茶颗粒中的射干苷进行鉴别，并进行了相关方法学验证，为提高金菊五花茶颗粒的质量标准提供了方法参考，有利于保证该药品的质量。

1 资料与方法

1.1 仪器

CAMAG TLC Visualizer薄层色谱存档系统；WD-9403C紫外分析仪；科导SK7210超声仪；赛多利斯CPA224S电子天平（感量0.1 mg）。

1.2 材料

射干苷（批号：111632-200602），购自中国食品药品检定研究院。薄层板为硅胶GF254手铺板及预制板；硅胶GF254产地：青岛海洋化工厂；预制板产地：（1）烟台市化工研究所（批号：20150320），（2）德国默克公司（批号：HX54736129）。试剂试药均为分析纯，水为超纯水。

1.3 样品

金菊五花茶颗粒样品3批：⑴广州莱泰制药有限公司（批号：160617）；⑵广东嘉应制药股份有限公司（批号：20150501）；⑶广西方略集团龙州制药有限公司（批号：1505001）。葛花样品11批，购自北京同仁堂（亳州）饮片有限责任公司、河北汉草堂药业有限公司等药企及安国、亳州中药材市场，来源覆盖了葛花主要产区。样品经河北省药品检验研究院段吉平主任药师鉴定为正品。

2 结 果

2.1 试验方法

取金菊五花茶颗粒10 g，研细，加甲醇30 mL，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5 mL，作为供试品溶液。取射干苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2015年版通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5 µL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。

2.2 专属性考察

按金菊五花茶颗粒的处方比例，取葛花以外的其余5种药味，粉碎后照“2.1”项下供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。取3批金菊五花茶颗粒样品，分别按“2.1”项下方法制成供试品溶液。吸取供试品溶液、对照品溶液与阴性对照溶液各5µl，按“2.1”项下方法进行试验。结果供试品色谱中，在与对照品色谱相对应的位置上，均显相同颜色的斑点；在供试品和对照品色谱所显斑点相对应的位置上，阴性对照溶液无斑点。结果表明阴性对照溶液无干扰。（见图1）

图1 金菊五花茶颗粒薄层鉴别色谱图硅胶GF254预制板（德国默克公司）

2.3 耐用性考察

吸取供试品溶液、对照品溶液各5 µL，按照“2.1”项下方法，分别使用不同来源的薄层板，在不同温度、相对湿度下进行试验。结果表明，在不同温度湿度下，色谱的分离效果均较好，说明温湿度对本法的影响较小（见图2）；使用进口预制板、国产预制板、手铺板，供试品色谱与对照品色谱的斑点均较清晰，说明不同来源的薄层板对本法无明显影响。（见图3）

图2 不同温湿度条件下的金菊五花茶颗粒薄层鉴别色谱图

图3 不同来源薄层板的金菊五花茶颗粒薄层鉴别色谱图

3 讨 论

3.1 供试品的提取

考察了加热回流与超声提取两种方法。取同一供试品，分别采用加热回流30分钟和超声30分钟进行提取，按同法试验，结果表明超声法提取的供试品色谱所显斑点更佳。因此采用超声提取方式。

3.2 有的文献中将葛花所含的射干苷描述为鸢尾苷，两者应为同一物质

射干苷对照品标签的英文名称为“Belamcandin（Tectoridin）”。

3.3 将11批葛花样品粉碎后

分别取0.5 g，照“2.1”项下供试品溶液制备方法提取后同法进行薄层色谱分析。结果11批葛花样品色谱均显与射干苷对照品相对应的的斑点。

3.4 如以葛花作为对照

因所显斑点较多，阴性对照溶液在与葛花药材色谱中1～2处相应的位置处也显有斑点，存在干扰；同时葛花对照药材目前没有商品供应，因此选择以射干苷作为对照进行鉴别。

[1]卫生部药典委员会.卫生部药品标准[S].中药成方制剂.第十册,1992:90.

[2]国家中医药管理局.中华本草[M].第十一卷.上海：上海科学技术出版社,1999:619-620.

[3]张国峰,吴 瑕,等.HPLC法同时测定野葛花中4种异黄酮成分的含量[J].沈阳药科大学学报,2009,26(01):40-44.