miRNA-29在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

孙宇鹏，安 伟

（贵州省遵义医学院第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科，贵州 遵义 563000）

鼻咽癌起病隐匿，具有早期的转移倾向。肿瘤标记物可以早期的、特异的提示肿瘤的发生，因此，查到鼻咽癌的肿瘤标记物，以便早期发现鼻咽癌的发生，对鼻咽癌诊治具有重要的临床意义。

有研究表明，miRNA-29是高表达于正常组织，而低表达于实体瘤组织[1]，miRNA-29可能与肿瘤的发生、发展、侵袭等有关[2]。但是miRNA-29在鼻咽癌组织中表达水平的情况及其与鼻咽癌生长、发展及预后的关系目前尚未见报道。本研究拟通过检测鼻咽癌组织以及鼻咽部非癌组织中miRNA-29的表达情况，探讨其对鼻咽癌早期诊断的意义和其与鼻咽癌转归、预后的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年5月～2017年2月期间本院耳鼻咽喉科收治诊断为鼻咽部肿物的病例和本院肿瘤科收治的诊断为鼻咽癌的病例，每一病例留取2份组织，一份送病理检查明确诊断；另一份标本储藏于液氮罐中备用，一一对应患者姓名等信息，如病理结果示为鼻咽癌，则纳入鼻咽癌组，如病理结果示为慢性炎症，则纳入非癌组织组。共得到符合要求的标本49例，其中鼻咽癌31例，鼻咽部炎性病变（非癌组织）18例。以门诊复查和电话回访的方式进行随访，随访截止时间为2017年2月。

1.2 方法

取10 mg鼻咽部活检组织加Trizol试剂1 mL后，研磨粉碎，按照Trizol试剂说明书提取总RNA，再将总RNA溶于DEPC水中，用紫外分光光度计测定RNA浓度和纯度。用U 6管家基因做为内参，每个标本设3个复孔。取总RNA 100ng为模板，按照RT逆转录试剂盒说明配20μl反应体系;然后按照实时荧光定量PCR试剂盒，取合成的cDNA 4μl为模板，配50μl反应体系，预变性95℃ 30s，反应40个循环，条件为95℃ 5s， 60℃34s。

1.3 统计实验结果

miRNA-29 △Ct=目的基因Ct-内参照基因Ct值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0统计学软件对所有数据进行分析，计量资料以“x±s”表示，采用t检验，计数资料以百分数（%），例（n）表示，采用x2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果（见表1与表2）

表1 鼻咽癌与慢性炎症miRNA-29表达水平比较分析（±s）

表1 鼻咽癌与慢性炎症miRNA-29表达水平比较分析（±s）

注：二组间P=0.00＜0.05

组别 n miRNA-29表达水平鼻咽癌 31 0.355±0.076慢性炎症（非癌组织） 18 1.677±0.08

表2 鼻咽癌放化疗前与鼻咽癌放化疗后miRNA-29表达水平比较分析（±s）

表2 鼻咽癌放化疗前与鼻咽癌放化疗后miRNA-29表达水平比较分析（±s）

注：二组间P=0.00＜0.05，两例放疗后miRNA-29表达水平未升高，7月内复发

组别 n miRNA-29表达水平鼻咽癌放化疗前 31 0.355±0.076鼻咽癌放化疗后 3 1.106±0.323

3 讨 论

本研究通过检测鼻咽癌组织以及鼻咽部非癌组织中miRNA-29的表达，根据miRNA-29表达水平的变化，可以看出miRNA-29在鼻咽癌的治疗过程中，确实参与了某些环节，而且在miRNA-29表达水平升高后，肿瘤也随之减小或消失，可以提示miRNA-29参与鼻咽癌的转归，高表达有可能抑制鼻咽癌的发展，从而改善鼻咽癌患者的预后，miRNA-29可能为一种抑癌基因，后期进一步研究通过靶向治疗进而进一步治疗鼻咽癌；有意思的是，有两例患者经放化疗后鼻咽部组织中miRNA-29表达水平较化疗前变化不大，在跟踪观察期间，治疗效果相对较差，并且通过随访，两位患者均在7月内鼻咽部癌组织再次增大，因其miRNA-29在鼻咽部组织中的表达未升高，而很快复发，这种情况是否可以认为miRNA-29的表达水平可能对鼻咽癌的预后有提示作用。

综上所述，该研究表明miRNA-29确实参与了鼻咽癌的发生、发展、转归等过程，miRNA-29高表达于正常组织，低表达于鼻咽癌组织，很有可能是一种抑癌基因，随诊后期研究的进一步深入，miRNA-29可能成为一个新的分子标志物，为鼻咽癌的诊断、预后判断和治疗提供重要价值。

[1] 陈 陵,李学成,等.miR-29在胃癌中的表达及其临床意义[J].临床肿瘤学杂志,2010,16(4): 315-317.