孝感地区HPVE6E7mRNA检测的调查研究

聂林+黄素丽

摘要：目的 利用我院就诊患者获取宫颈脱落细胞，比较不同年龄段HPV E6、E7mRNA检测的阳性率及特异性、灵敏度，探讨其对宫颈癌及癌前病变的早期筛查价值。方法 运用分年龄层方法获取我院就诊595例作为本次研究对象，同时进行TCT和HPV E6、E7mRNA检测，对细胞学ASCUS及以上结果进行组织病理检查，比较不同年龄段HPV E6、E7mRNA检测和TCT的阳性率，及其与组织病理检测的符合性，将数据录入Excel表格，采用SPSS19.0软件进行统计分析。结果 有效调查人数为559份，有效率100%。其中根据年龄分组，HPV E6E7 mRNA阳性率分别为：30岁以下35.76%，30以上41.62 %。此外，對HPV E6E7 mRNA及TCT均为阳性患者进行病理学检测，其中病变为CIN2以上患者灵敏度及特异性均高于TCT。结论 比较不同年龄两组人群，30岁以下年龄组中E6、E7 mRNA检测灵敏度、特异性更高，可见在宫颈高级别病变的筛查中，尤其是年轻女性的筛查中，其在反映宫颈疾病的进展方面具有极其重要意义。

关键词：HPV E6、E7mRNA；宫颈癌；阳性率；特异性

大量研究表明HPV感染率随着宫颈病变的恶性级别升高而逐渐上升，HR-HPV 是宫颈癌感染的主要诱因[1]，并且HPV DNA 检测较之宫颈细胞学检查更加敏感[2]，但是由于宿主免疫系统的清除作用，大量HPV感染只是短暂的。因此，基于 DNA 的 HPV 检测在高级别宫颈病变的诊断中特异性及阳性预测值均较低[3]，有报道表示 HPV-DNA 在凋亡细胞及细胞碎屑中也可表达[4]，也说明 HPV-DNA 检测的低特异性。另有研究表明高危型HPV是通过E6E7蛋白发挥致癌性的[5]，E6蛋白通过E6-AP能特异性结合P53蛋白形成复合物。促使P53蛋白快速降解，导致细胞周期失控，其效应等同于P53突变。E7蛋白和PRb有高亲和性，使E2F和PRb复合物解离，使细胞周期失控而发生永生化。有文献报道，E6、E7mRNA水平与病变的严重程度相关[6]，Molden及Sterdal[7] 等对宫颈病变患者进行几年随访发现，HPV mRNA较HPV DNA具更高特异性及阳性预测值。为了解孝感地区HPV E6E7mRNA不同年龄段阳性率及特异性，特对孝感市妇幼保健院就诊成年女性进行调查研究，现将调查结果汇报如下。

1资料与方法

1.1一般资料 采用分年龄层整群抽样方法我院门诊就诊年龄≥20岁的559例成年女性做为调查对象。

1.2研究方法 细胞取材：将采集器的中央刷毛部分轻轻插入宫颈管，柔和的向前抵住采样器，并按同一个时针方向转动采样器5周整，将采样器按入保存液小瓶底，迫使刷毛全部散开，共10次，在溶液中快速摆动采样器以漂洗样本。同时进行E6、E7 mRNA及TCT检测。

1.3 HPV E6E7mRNA的意义 HPV基因组由早期基因区（E）、晚期基因区（L）以及长度控制区（LCR）构成；其中 E6、E7是主要的致癌基因，具有促进和维持整合状态的功能，可与p53和Rb等细胞周期调控因子结合，影响其功能，导致细胞分化异常，形成恶性增殖[12]；E6、E7基因编码的蛋白是导致宫颈上皮癌变的重要因子。

1.4统计学处理 应用SPSS V19.0软件进行统计分析。采用χ2检验及二元Logistic回归分析方法分析HPV E6E7mRNA的阳性率及灵敏度、特异性。

2结果

2.1一般情况 595例调查的成年女性中HPV E6E7 mRNA阳性率分别为：30岁以下35.76%，30以上41.62 %。调查对象的年龄为18～70岁，平均年龄为36.07岁。

2.2分组比较细胞学与HPV E6E7 mRNA分析结果 针对TCT与HPV E6E7 mRNA进行年龄分组对比分析，结果显示E6/E7 mRNA检测，阳性预测值高，特异性强，见表1，表2。

2.3结合病理学不同病变结果HPV E6E7 mRNA与TCT分析结果 将上述单因素分析结果中有统计学意义的指标引入二元Logistic回归分析，结果显示其中30岁以下CIN I及以下阳性为24例（14.55%），CINII及以上阳性35例（21.21%）；30岁以上CIN I及以下阳性为77例（19.54%），CINII及以上阳性87例（22.08%），见表3，表4。

2.4 HPV E6/E7 mRNA与TCT对病变的灵敏度、特异性比较 不同年龄组CINII及以上（尤其年轻组<30岁）比对分析HPV E6/E7 mRNA的灵敏度、特异性明显高于对照组（TCT），两组比较有统计学意义（P<0.05），见表5。

3讨论

本研究首次在本地区进行TCT和HPV E6、E7mRNA检测对比。HPV E6、E7mRNA具有更高的特异性和阳性预测值，适用于妇女宫颈癌筛查，特别适合于TCT异常（≥ASCUS）患者，HPV E6E7mRNA是HR-HPV致癌活动最佳提示指标，可作为CINⅠ+期患者手术和术后疗效评估首选项目。

综上所述，通过流行病学调查，了解到E6、E7 mRNA与TCT联合检测是一种目前最佳的宫颈癌风险评估检测组合，降低宫颈癌早期可疑病变的手术率，降低医疗耗损，从而提高社会效益和经济效益，维护妇女身心健康，可实现早期筛查、分流管理及治疗后随访。

参考文献：

[1]刘桐宇，谢榕，郑雄伟，等.TCT 标本检测高危 HPV E6/E-7mRNA 及在宫颈病变中的应用研究[J].中华妇幼临床医学杂志（电子版），2011，7（3）：202-205.

[2]梁东霞，张彦娜.宫颈癌与 HPV 关系的研究进[J].实用癌症杂志，2010，25（2）：202-205.

[3]Franco EL，Ferenczy A.Cervical cancer screening following the implementation of prophylactic human papillomavirus vaccination[J].Future Oncol，2007，3（3）：319-327.

[4]Brink AA，Snijders PJ，Meijer CJ，et al.HPV testing in cervical screening[J].Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol，2006，20（2）：253-266.

[5]Chua KL，Hjerpe A.Human papillomavirus analysis as a prognostic marker following conization of the cervix uteri[J].Gynecol Oncol，1997，66（1）：108-113.

[6]谢幸，苟文丽.妇产科学[M].第8版.北京：人民卫生出版社，2013，6.

[7]Molden T，Nygard JF，Kraus I，et al，Predicting CIN2+when detecting HPV mRNA and DNA by PreTect HPV-proofer and consensus PCR：A 2-year follow-up of women with ASCUS or LSIL Pap smear[J].Int J Cancer.2005.114（6）：973-976.

编辑/丁一