震荡对血小板聚集功能检测的影响

王 凤，吴珊珊，万丽平

(1.大连医科大学附属第一医院 检验科，辽宁 大连 116011 2.大连医科大学 检验医学院，辽宁 大连 116044)



论 著

震荡对血小板聚集功能检测的影响

王 凤1，吴珊珊2，万丽平1

(1.大连医科大学附属第一医院 检验科，辽宁 大连 116011 2.大连医科大学 检验医学院，辽宁 大连 116044)

目的 研究震荡对血小板聚集功能检测的影响。方法 选取2016年8月到2016年11月就诊于大连医科大学附属第一医院临床确定诊断为冠状动脉粥样硬化性心脏病的患者40例，采用PL-12血小板功能分析仪检测震荡前后血小板聚集功能，诱导剂分别是花生四烯酸(arachidonic acid,AA)和二磷酸腺苷(adenosine disphosphate, ADP)，分析血小板最大聚集率(maximum aggregation rate,MAR)和平均聚集率(average aggregation rate,AAR )。结果 以AA为诱导剂组,震荡前全血标本的MAR为31.93±19.86，震荡后全血标本MAR 28.83±17.31,两者比较差异无统计学意义(t=1.128，P>0.05);震荡前全血标本的AAR为33.27±19.78，震荡后全血标本AAR 29.95±15.98,两者比较差异无统计学意义(t=1.320，P>0.05)。以ADP为诱导剂组,震荡前全血标本的MAR为54.48±15.31，震荡后全血标本MAR 45.61±17.20,两者比较差异有统计学意义(t=3.668，P<0.05);震荡前全血标本的AAR为55.34±18.1，震荡后全血标本AAR 49.24±17.45,两者比较差异有统计学意义(t=2.682,P<0.05)。结论 MAR和AAR是临床判断抗血小板聚集药物疗效的重要指标，震荡会对全血标本血小板聚集功能中MAR和AAR产生影响，故在日常检验工作中操作人员应避免不当的震荡，以免造成错误的检测结果，影响临床对患者血小板功能的评估。

血小板聚集；震荡 ；血小板分析仪；最大聚集率

血栓性疾病具有高发病率、高致残率和高致死率的特点，已成为威胁人类健康和生命的主要疾病。常见的血栓性疾病有心肌梗塞、缺血性脑卒中等。目前常用的治疗手段包括抗凝、抗血小板药物治疗、溶栓及介入手术治疗等。其中抗血小板聚集药物的使用对预后尤为重要，在用药过程中，针对不同个体，为了准确对抗血小板聚集药物的疗效进行有效评价和监控，指导临床医生进行必要的药物调整，确保对血栓性疾病预防和治疗达到预期效果并避免或减少副作用，血小板聚集功能实验已不可或缺。PL血小板分析仪具有良好的线性范围[11]，近年来开始投入临床使用。大连医科大学附属第一医院于2015年8月开展了血小板聚集功能检测。而此项检测过程中，为保证结果的准确性，要尽量避免可能影响血小板聚集的外部因素，其中标本运输过程中会有不同程度震荡，笔者就震荡因素对血小板聚集功能试验的主要结果的影响进行实验分析，分析标本在震荡前后的血小板最大聚集率(MAR)和血小板平均聚集率(AAR)的变化，探讨震荡是否对血小板聚集功能产生影响，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象

收集2016年8月到2016年11月在大连医科大学附属第一医院确诊冠状动脉粥样硬化性心脏病的患者40例血液标本，患者均遵医嘱服用阿司匹林肠溶片，联合氯吡格雷抗血小板聚集药物。

1.2 主要仪器与试剂

PL-12血小板功能分析仪(江苏英诺华医疗技术有限公司)，试剂主要包括诱导剂二磷酸腺苷(adenosine disphosphate, ADP)，花生四烯酸(arachidonic acid,AA)。

1.3 研究方法

采集静脉血于3.8%枸橼酸钠抗凝管，采用PL-12血小板功能分析仪，检测经AA和ADP两种诱导剂诱导的血小板最大聚集率(MAR)和平均聚集率(AAR)水平；然后将标本颠倒震荡5 min，检测震荡后由AA和ADP两种诱导剂诱导的血小板最大聚集率MAR及平均聚集率AAR水平。全部实验均在采血后2 h内完成。

1.4 统计学方法

使用SPSS17.0统计软件，分别对AA诱导和ADP诱导的血小板聚集震荡前后的MAR和AAR进行均值比较，采用配对t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 AA诱导的血小板聚集各参数的比较

以AA为诱导剂,震荡前全血标本的MAR为31.93±19.86，震荡后全血标本的MAR 28.83±17.31,两者比较差异无统计学意义(t=1.128，P>0.05)。震荡前全血标本的AAR为33.27±19.78，震荡后全血标本的AAR为29.95±15.98,两者比较差异无统计学意义(t=1.320,P>0.05)。

2.2 ADP诱导的血小板聚集各参数的比较

以ADP为诱导剂,震荡前全血标本的MAR为54.48±15.31，震荡后全血标本的MAR 为45.61±17.20,两者比较差异有统计学意义(t=3.668,P<0.05);震荡前全血标本的AAR为55.34±18.1，震荡后全血标本的AAR 为49.24±17.45,两者比较差异有统计学意义(t=2.682,P<0.05)。

3 讨 论

血小板聚集是血小板的一个重要生理特性，在维持止血和血栓形成过程中发挥着重要的作用[1-3]，抗血小板药物是血栓疾病预防和治疗的基石。近年来大量的血栓疾病治疗实践和临床研究证实抗血小板药物存在抵抗或者反应多样性的情况[4-5]，在服用抗血小板药物后，血小板功能水平仍然高的患者，发生或再发生血栓的几率更高，相反血小板功能水平过低，患者出血的风险比较大。血小板聚集形成血栓是临床急性冠脉综合征和经皮冠状动脉介入治疗术后发生不良心血管事件的基本原因[6]。抗血小板药物治疗是防止冠状动脉粥样硬化的基石。为评估抗血小板治疗效果安全性和有效性，提高血小板功能检测显得至关重要[7]。

目前临床上检测血小板聚集功能的常用方法有比浊法、电阻抗法等。PL血小板分析仪是国家863科技部项目成果，已获得多项专利，近年来开始投入临床使用。PL-12血小板功能分析仪基于血小板连续计数法，排除红细胞、白细胞等其他血液成分的影响，通过观察诱聚剂加入前后引起的血小板聚集数量的变化来评估血小板的功能，且不受溶血、脂血等标本浊度的影响，在检测结果的线性范围、精密度、和变异性上表现出极大的优势。研究发现[9-10]，PL分析仪与传统的检验血小板聚集功能的LT法、Verify Now分析仪法对比具有良好的相关性[8]。本实验结果显示，由ADP诱导的血小板聚集标本经过震荡后，MAR及AAR较震荡前有显著性差异。由AA诱导的血小板聚集标本经过震荡后MMR及AAR较震荡前无显著性差异。原因可能与其不同的作用机制有关。由AA诱导的血小板聚集与血小板环氧化酶及血栓素A2生成有关；而由ADP诱导的血小板聚集则与血小板细胞内的高密度颗粒有关及血小板膜上的ADP受体相关。

实验结果提示，标本在运输过程中出现的震荡可能会激活血小板表面的受体比如ADP受体、胶原受体和血栓素A2受体等，这些受体在接触到相应的诱导剂之后激活血小板，促使血小板表形成Ⅱb、Ⅲa复合物即纤维蛋白原受体，与血液中的纤维蛋白原相结合，最终使得血小板活化聚集，形成血小板血栓。血小板在被激活的同时，还会释放一些物质，这些物质会激活人体的凝血系统，将血液中的纤维蛋白原活化成纤维蛋白，进而以血小板血栓为核心将红细胞、白细胞等网在一起形成一个更大的血栓，从而导致缺血性事件的发生。由于实验采用的是全血标本，保存了全部血小板，震荡容易造成血小板体外激活。因此，在临床标本转运过程中，应尽量避免气泵运输或血液标本在运输途中试管反复颠倒引起震荡，标本采集完成后，应尽快送检，为临床提供真实准确全面的分析结果。

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本刊被国际重要数据库收录情况

截止2011年，本刊已被7种国际重要数据库收录。包括：(1)美国《化学文摘》(CA, Chemical Abstracts)；(2)荷兰《医学文摘》(EM，Excepta Media)，(3)美国《剑桥科学文摘(自然科学版)》(CSA Natural Science)；(4)美国《乌利希期刊指南》(Ulrich PD，Ulrich's Periodicals Directory)；(5)荷兰《文摘与引文数据库》(Scopus)；(6)英国《农业与生物科学研究文摘》(CAB Abstracts，Centre for Agriculture and Bioscience Abstracts)；(7)英国《公共健康》(Global Health，Centre for Agriculture and Bioscience Abstracts)。

Effect of shaking on platelet aggregation function test

WANG Feng1, WU Shanshan2, WAN Liping1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116011,China; 2.DepartmentofLaboratoryMedicine,DalianMedicalUniversity,Dalian116044,China)

Objective To study the effect of shaking on platelet aggregation function test. Methods Totally, 40 patients with coronary atherosclerotic heart disease diagnosed in the First Affiliated Hospital of Dalian Medical University from August 2016 to November 2016 were selected as subjects in the study. PL-12 platelet function analyzer was used to detect platelet aggregation function. MAR and AAR were detected before and after shaking. Inducers used in this study were AA and ADP. Results In AA inducer group, MAR of blood samples were 31.93±19.86 before shaking and 28.83±17.31 after shaking, respectively; there was no significant difference between the two groups (t=1.128，P>0.05). AAR of blood samples were 33.27±19.78 before shaking and 29.95±15.98 after shaking, respectively; there was no significant difference between the two groups (t=1.320，P>0.05). In ADP inducer group, MAR of blood samples were 54.48±15.31 before shaking and 45.61±17.20 after shaking, respectively; the difference was statistically significant (t=3.668，P<0.05). AAR of blood samples were 55.34±18.1 before shaking and 49.24±17.45 after shaking, respectively; the difference was statistically significant (t=2.682，P<0.05). Conclusion MAR and AAR are important indicators to evaluate platelet function and drug efficacy for clinical physicians. Shaking will affect the results of MAR and AAR. For laboratory technologists, inappropriate shaking may lead to false results and should be avoided.

platelet aggregation; concussion; platelet analyzer; maximum aggregation rate

10.11724/jdmu.2017.02.15

王 凤(1981-)，女，主管技师。E-mail：wangfeng5006@163.com

万丽平，副主任技师。E-mail：wlplab@163.com

R446.1

A

1671-7295(2017)02-0173-03

王凤，吴珊珊，万丽平.震荡对血小板聚集功能检测的影响[J].大连医科大学学报，2017,39(2)：173-175.

2017-01-13；

2017-03-19)