鸡新城疫耐热保护剂活疫苗（La Sota株）保存期试验

孙德君，刘鑫莹，杨朋欣，秦立鑫，胡瑞红

（哈药集团生物疫苗有限公司 哈尔滨 150069）

新城疫是一种急性、高度接触性传染病，其病原为鸡新城疫病毒（Newcastle Disease Virus，NDV），该病的侵害主要对象是鸡和火鸡，严重威胁了各个国家禽类的养殖。新城疫感染症状有下痢、神经机能紊乱、败血症和胃肠道出血等，浆黏膜点状出血和腺胃黏膜出血是具有诊断意义的病理变化。鸡新城疫病毒第一次爆发是在1926年印尼的巴塔维亚和英国的新城（Newcastle），根据发现地的名字被命名为“新城疫”（Newcastle disease，ND），Doyle 在1927年首次分离到了新城疫病毒（NDV）。之后此病在世界各国快速的传播，并在不同的地区多次爆发流行，引发了极高的死亡率，给世界各国的禽类养殖造成了极大的损失，随着新城疫疫苗的发明并正确应用，ND的流行才得以得到有效地控制。

我国目前使用的新城疫疫苗主要是弱毒活疫苗，以冻干的形式储存。国内主要使用的新城疫冻干保护剂为蔗糖、牛奶等，但是存在组方简单，保护实际功能差的缺点。冻干疫苗多需要在-15℃条件下存储，如果在2～8℃条件下，只能保存4～6月，这给疫苗的储存和运输带来了不便。我国研制兽用生物制品耐热保护剂相对滞后，在发达国家，疫苗主要都是采用耐热冻干保护剂。我国虽然在这方面起步晚，但是速度快，已经取得了一定的成果。本实验对我公司研制生产的鸡新城疫耐热冻干保护剂活疫苗进行了保存期试验。

1 材料与方法

1.1 疫苗

鸡新城疫（La Sota株）耐热保护剂活疫苗，批号：01、02、03。

1.2 SPF鸡胚

购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司。

1.3 方法

将3个批次的NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗分别放入37℃、常温、2～8℃进行NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗保存期试验。疫苗在37℃保存7d、10d、15d，将疫苗分别取出，进行病毒含量测定、性状检验。疫苗在常温保存10d、20d、30d，将疫苗分别取出，进行病毒含量测定、性状检验。疫苗在分别在 4℃保存 9、12、15、18、24、27 个月，按规定日期取出疫苗，进行疫苗的效力检验及外观性状检验。

2 结果与分析

2.1 NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗37℃保存期试验结果

NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗，在37℃保存 7d、10d、15d，按规定日期分别将冻干疫苗取出，对冻干疫苗进行物理性状检验、病毒含量EID50测定。结果表明：3批疫苗37℃放置7d病毒滴度平均下降0.35～0.40个滴度左右。37℃放置10d病毒滴度下0.54～0.58个滴度左右。37℃放置15d病毒滴度下降0.95～0.98个滴度左右。物理性状均符合规定。（见表1）

2.2 NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗常温保存期试验结果

NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗在常温保存 10d、20d、30d，分别取出，进行疫苗的性状检验、病毒含量EID50测定。结果表明：常温放置10d病毒滴度下降0.26～0.30个滴度左右。常温放置20d病毒滴度下降0.39～0.44个滴度左右。常温放置30d病毒滴度下降0.89～0.91个滴度左右。物理性状均符合规定。（见表2）

2.3 NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗2～8℃保存期试验结果

NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗在2～8℃保存，6个月、12个月、15个月、18个月、24个月、27个月，分别取出，进行NDVLa Sota株耐热保护剂活疫苗的性状检验、病毒含量。结果表明：NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗在2～8℃可以保存24个月。（见表3）

表1 耐热疫苗在37℃保存7、10、15dEID50测定结果

表2 耐热疫苗在常温保存10、20、30d测定结果

表3 耐热疫苗在4℃保存9、12、15、18、24、27个月EID50测定结果

3 小结与讨论

1）NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗在2～8℃保存保存24个月后病毒含量下降了0.40～0.52个滴度，但每羽份的病毒含量为106.10～106.12，仍然符合质量检验标准。

2）目前，大多数疫苗生产公司生产的冻干活疫苗所使用的保护剂为蔗糖、脱脂乳，在运输或存储过程中会受到温度的影响造成病毒含量的损失。而NDV La Sota株耐热保护剂活疫苗可在2～8℃保存，使病毒的滴度不受损失，从而避免了疫苗在运输过程中易造成的冻干疫苗病毒含量下降，造成免疫接种失败的问题。■