黄芪多糖稀释液对猪瘟疫苗免疫效果的影响

万思敬

（山东省青岛市动物卫生监督所 山东青岛 266199）

猪瘟（Classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起的猪的一种高度接触性传染病，是目前威胁我国养猪业的主要疫病之一，我国采取以疫苗免疫接种为主的防控措施，因此提高疫苗的免疫效果对猪瘟的防控至关重要[1]。黄芪多糖是中药黄芪的主要活性成分，具有诱导机体产生干扰素、提高淋巴细胞数量和转化率及增强机体免疫功能等生物学活性[2]。本研究探讨了将黄芪多糖作为稀释液稀释猪瘟疫苗后对猪瘟疫苗免疫效果的影响，为黄芪多糖在猪瘟疫苗免疫中的推广应用提供理论支持。

1 材料与方法

1.1 黄芪多糖、仔猪

黄芪多糖购自山东方舟生物科技有限公司；21日龄断奶仔猪来自胶州思保养猪场。

1.2 疫苗、试剂盒

猪瘟活疫苗（细胞源）购自广东永顺生物制药有限公司；猪瘟病毒正向间接血凝（IHA）抗体检测试剂盒购自中国农业科学院兰州兽医研究所；

1.3 黄芪多糖稀释液的制备

将1g黄芪多糖溶解于1,000mL纯化水中，高压灭菌后4℃保存备用。

1.4 试验分组与疫苗免疫接种

将60头21日龄健康断奶仔猪随机分成2组（对照组和黄芪多糖组），每组30头仔猪。将猪瘟活疫苗（20头份/mL）分别用灭菌生理盐水和黄芪多糖稀释液稀释成2头份/mL，分别免疫接种对照组仔猪和黄芪多糖组仔猪，免疫接种方式均为耳根后方肌内注射，剂量均为1.0mL（2头份）/头，对照组和黄芪多糖组仔猪日常饲养管理均完全一致，试验期为28d。

1.5 血清样品的采集

分别在疫苗免疫前（0d）以及免疫后7、14、21和28d，用5.0mL注射器于每头猪的前腔静脉处采集血液1.0mL，将其全部打入1.5mL离心管中，将离心管依次置于37℃放置2h、4℃放置4h后，5,000rpm离心10min，将上清液移入另一个新的1.5mL离心管中，-20℃保存备用。

1.6 猪瘟抗体效价检测

严格按照猪瘟病毒正向间接血凝（IHA）抗体检测试剂盒使用说明分别测定猪瘟疫苗免疫前（0d）以及免疫后7、14、2和28d采集的血清样品中猪瘟抗体效价（log2）。

1.7 数据统计与分析

表1 黄芪多糖稀释液对猪瘟抗体效价的影响（log2）

采用SPSS13.0软件对不同时间的猪瘟抗体水平检测数据进行统计与分析，结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

如表1所示，在疫苗免疫前（0d），黄芪多糖组与对照组的猪瘟抗体效价（log2）差异均不显著（P＞0.05）；在疫苗免疫后 7、14、21、28d，黄芪多糖组的猪瘟抗体效价（log2）较对照组分别提高5.3%（P＞0.05）、9.8%（P＜0.05）、14.0%（P＜0.05）、14.2%（P＜0.05），表明利用黄芪多糖稀释液稀释猪瘟疫苗可显著提高猪瘟疫苗免疫后的抗体水平。

3 讨论

黄芪多糖作为绿色环保的新型饲料添加剂和疫苗佐剂在兽用临床中已经得到了广泛应用，但其作为疫苗稀释液的研究与应用还处于刚起步阶段。猪瘟疫苗的免疫效果直接关系到猪瘟防控工作的成败，而疫苗免疫后的抗体水平检测是直接反映疫苗免疫效果最简单、最基本的方法。故本研究选择检测血清中猪瘟抗体效价来评价黄芪多糖稀释液对猪瘟活疫苗的免疫增强作用，结果显示黄芪多糖稀释液可刺激机体迅速产生抗体，至疫苗免疫后14d，其产生的猪瘟抗体水平已比常规猪瘟疫苗提升9.8%，达到显著性差异水平，且高水平的抗体效

价维持时间较长，至疫苗免疫后28d，其产生的猪瘟抗体水平仍比常规猪瘟疫苗高14.2%。表明黄芪多糖稀释液稀释猪瘟疫苗可使抗体产生快、效价高及维持时间长，增强了猪瘟疫苗的免疫效果，这与朱辉等[3]报道的黄芪多糖注射液可提高家兔对猪瘟疫苗的免疫应答反应，表现出了极其相似的一致性。由此可见，将黄芪多糖作为疫苗稀释液配合猪瘟疫苗的使用，可提高猪瘟疫苗的免疫效果，可在猪瘟疫苗免疫时推广应用。■

[1] 李德如,李少文,赖华松.猪瘟的流行特点与综合防控[J].福建畜牧兽医,2016,38(5)：59-60.

[2] 柳序,田科雄,彭灿阳,等.黄芪多糖的免疫调节作用及其在动物生产中的应用[J].中国饲料,2016(22)：12-15.

[3] 朱辉,沈志强,王振勇,等.黄芪多糖注射液对猪瘟耐热保护剂活疫苗在兔体内免疫效果的影响 [J].中国畜牧兽医,2011,38(7)：66-70.