免疫抑制法测定深圳地区13岁以下健康儿童CK-MB水平及分析*

雷永革 曹巧林

免疫抑制法测定深圳地区13岁以下健康儿童CK-MB水平及分析*

雷永革 曹巧林

目的 了解免疫抑制法测定深圳地区5个月～13岁不同年龄健康儿童血清肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）的含量水平，并分析其与方法学提供的参考区间的差异性，为本地区建立健康儿童CK-MB参考区间提供依据。方法 收集2016年3～6月来医院保健科体检的健康儿童1 062例，依据年龄分为3组：5个月～3岁的学龄前组、4～6岁的幼儿组和7～13岁的小学组，并选择同期健康成人390例，采用免疫抑制法检测血清CK-MB含量，与方法学提供的参考区间比较，对含量超出范围的标本同时进行肌钙蛋白I（cTnI）、肌红蛋白（MYO）和心电图检测，并对结果进行统计分析。结果 1 062例健康儿童检出CK-MB含量异常率为66.20%（703/1 062），其中学龄前组、幼儿组和小学组CK-MB含量异常率分别为81.02%（239/295）、66.23%（251/379）和54.90%（213/388），各组CK-MB含量异常率的差异有统计学意义（χ2=3.71～15.95，P＜0.01～0.05），而390例健康成人血清CK-MB含量均＜24 U/L；703例CK-MB含量异常标本中cTnI含量均＜0.034 ng/ml，有3例标本MYO结果稍有增高＞61.5 ng/ml，但随后的心电图跟踪检查均未见异常；学龄前组、幼儿组及小学组儿童血清CK-MB含量（U/L）分别为41.52±19.38、35.09±14.37及28.15±7.86，不同年龄段儿童血清CK-MB含量的差异有统计学意义（t=2.60～4.13，P＜0.05）；健康儿童血清CK-MB含量为34.97±10.64 U/L，与健康成人血清CK-MB含量（16.05±7.13 U/L）的差异有统计学意义（t=13.93，P＜0.01）。结论 免疫抑制法检测深圳地区5个月～13岁健康儿童血清CK-MB含量异常率较高，临床上不能直接引用方法学提供的参考区间，应及时建立本地区健康儿童CK-MB免疫抑制法的正常参考区间，以便更好地为临床服务，降低误诊和不必要的确诊项目检查。

免疫抑制法 儿童 肌酸肌酶MB同工酶

血清肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）作为一种主要存在于心肌的特异性酶，对心肌梗死、心肌炎及心肌损伤的诊断、治疗及疗效判断具有重要的价值，曾被认为是诊断心肌梗死和心肌炎的金标准[1-3]。CK-MB活性检测常采用免疫抑制法，因其方法简单，适于自动化，是目前国内实验室应用最多的检测方法，但免疫抑制法试剂盒给出的CK-MB正常参考区间不区分儿童和成人，统一为0～24 U/L，而工作中发现大部分健康体检儿童常出现CK-MB结果高于正常的现象，对儿童急性心肌梗死、心肌炎及心肌损伤的诊断、治疗及疗效判断带来一定的误区，易造成误诊或不必要的确诊项目检查，导致儿童因确诊项目检查而带来身体创伤，同时增加家庭经济负担，浪费公共医疗资源。为此，本文就此对免疫抑制法检测深圳地区5个月～13岁健康儿童血清CK-MB含量进行调查，现将结果报道如下。

对象与方法

1 对象 选择2016年3～6月来医院保健科体检的健康儿童1 062例，其中男性493例，女性569例，年龄5个月～13岁，平均（6.32±4.72）岁。按年龄段分为：5个月～3岁学龄前组（295例）、4～6岁幼儿组（379例）和7～13岁小学组（388例）；选择同期来院体检的健康成人390例，其中男性178例，女性212例，年龄20～53岁，平均（33.62±9.23）岁。经体检科严格体格检查，发育正常，无急慢性疾病、无肝肾疾病及心脏病家族史，可排除心肌、脑部、骨骼肌及皮肤炎等疾病，亦无剧烈活动、药物及非疾病因素的影响，ECG、B超均正常。

2 标本采集 所有研究对象均于凌晨空腹按标本留取统一标准方法抽取静脉血2 ml于一次性无抗凝剂干燥管内，及时送检。

3 仪器与试剂 强生VITROS 5600全自动生化免疫分析仪、试剂、校准品及室内质控品均由美国强生公司提供；日立7600全自动生化分析仪、校准品及室内质控品均由日本日立公司提供，试剂盒由宁波美康生物科技股份有限公司提供。

4 方法 收到标本于室温静置30 min，分离血清用免疫抑制法测定CK-MB含量，所有标本均于2 h内检测完毕，对CK-MB结果异常标本进行cTnI和MYO检测，并对血清CK-MB含量异常的儿童进行心电图检查。标本检测前要对相关仪器进行维护和保养、定校和室内质控物检测，待室内质控结果在控后再行标本检测，所有操作均严格按仪器和实验室的SOP文件进行。

5 异常判断标准 依据检测CK-MB免疫抑制法试剂盒说明书提供的正常参考区间，CK-MB＞24 U/ L为异常；cTnI＞0.034 ng/ml和MYO＞61.5 ng/ml为异常。

6 统计学处理 应用SPSS 19.0软件进行数据处理，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用方差分析和两两比较的LSD法；计数资料采用百分数（%）表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 CK-MB含量异常情况 采用免疫抑制法检测发现1 062例5个月～13岁健康儿童血清CK-MB含量异常者703例，异常率66.20%，其中学龄前组、幼儿组和小学组健康儿童CK-MB含量异常率分别为81.02%（239/295）、66.23%（251/379）和54.90%（213/388），不同年龄组儿童血清CK-MB含量异常率的差异有统计学意义（r=3.71～15.95，P＜0.01～0.05），而390例健康成人血清CK-MB含量均＜24 U/L。

2 CK-MB异常标本中cTnI和MYO异常情况 703例CK-MB含量异常标本中cTnI含量均＜0.034 ng/ ml，有3例标本MYO结果稍有增高＞61.5 ng/ml，但随后的心电图跟踪检查均未见异常。

3 不同年龄段健康儿童血清CK-MB含量情况 学龄前组、幼儿组及小学组健康儿童血清CK-MB含量（U/L）分别为41.52±19.38、35.09±14.37及28.15±7.86，不同年龄段健康儿童血清CK-MB含量的差异有统计学意义（t=2.60～4.13，P＜0.05）。

4 健康儿童血清CK-MB含量与健康成人比较1062例健康儿童血清中CK-MB含量（U/L）为34.97±10.64，而390例健康成人血清中CK-MB含量为16.05±7.13，两者结果的差异有统计学意义（t=13.93，P＜0.01）。

讨 论

CK-MB是心肌细胞中的一种特异性酶，当心肌受损时，心肌细胞破坏增加，CK-MB释放入血，血液CK-MB酶活性增高，是心肌梗死、心肌炎及心肌损伤的一个敏感性血清酶指标。目前CK-MB活性检测仍是诊断急性心肌损伤的首选指标之一，其活性升高可作为心肌炎诊断的特异性指标之一，颇受临床医生重视[4-6]。

CK-MB活性检测方法很多，传统测定方法为电泳及离子交换层析法，但由于其敏感性差和操作繁琐等原因，给检验和临床工作带来不便。20世纪90年代国外曾采用酶质量测定法测CK-MB的酶蛋白质浓度，效果很好，但由于试剂价格昂贵，很难普及。而免疫抑制法因其方法简单，便于自动化，是目前国内实验室应用最多的检测方法；其采用抗-M亚基的抗血清，标本中的全部CK-MM活性和50%的CK-MB活性被抑制，而CK-MB和CK-BB中B亚基的活性则不受影响。成人血清中因CK-BB含量甚微可忽略不计，故将CK-B活性测定值乘以2即可大致代表CK-MB的活性[7-10]。本研究结果显示，390例健康成人血清CK-MB含量均＜24 U/L，浓度为17.65±8.03 U/ L，均未见异常，这可能与成人血脑发育已完善、血清CK-BB含量甚微、对免疫抑制法检测影响微小有关。

CK-BB主要存在于脑组织、胃肠道及子宫平滑肌中，脑组织中几乎全为CK-BB。若血清中有CK-BB升高的因素，即可造成CK-MB假性升高。由于儿童，尤其是婴幼儿、学龄前儿童的血脑屏障发育不完善，外周血中会出现很多CK-BB，血清CK-BB含量可高于成人[11]。吴凤丽等[12]在CK同工酶电泳时也发现，儿童患者在电泳中出现CKBB，因此，采用免疫抑制法测得的CK-MB活性会出现假阳性反应。本研究结果显示，5个月～13岁健康儿童血清CK-MB含量异常率高达66.20%，尤其是5个月～3岁儿童异常率高达81.02%，随着儿童年龄的增长，CK-MB含量异常率也逐渐下降，这与儿童血脑屏障不断发育完善有关；但CK-MB含量异常的儿童血清中cTnI含量均未见异常，MYO只有3例儿童出现轻度增高，但心电图均未见异常，这可能与MYO在骨骼肌含量丰富有关。

本研究结果显示，免疫抑制法检测健康儿童血清中CK-MB含量明显高于健康成人，差异有统计学意义（P＜0.01），且不同年龄儿童血清CK-MB含量的差异也有统计学意义（P＜0.05），而免疫抑制法检测试剂盒所提供的正常参考区间未区分不同年龄段，统一为0～24 U/L。因此，检测儿童血清CK-MB含量不能直接引用试剂盒所提供的参考区间。

综上所述，健康儿童血清CK-MB含量与健康成人之间存在差异，且不同年龄儿童组间也存在差异。因此，检测儿童血清CK-MB含量时不能直接引用试剂盒说明书上提供的正常参考区间，应及时建立本区健康儿童不同年龄段CK-MB含量正常参考区间，为本区临床诊断儿童急性心肌梗死、心肌炎及心肌损伤提供可靠、客观及科学的参考依据。

1 周艳丽，章静，王淑春，等.床旁快速联合测定肌钙蛋白I、肌酸激酶同工酶和肌红蛋白诊断急性心肌梗死的临床价值[J].检验医学与临床，2015，12（21）：3224-3226.

2 张伶辉.传统心肌酶谱检测在急性心肌梗死诊断中的临床意义[J].当代医学，2013，l9（9）：108-109.

3 武国东，张舒石，及志勇，等.肌钙蛋白T与心肌酶谱在早期诊断急性非ST段抬高心肌梗死相关性的比较研究[J].长春中医药大学学报，2012，28（1）：149-151.

4 赵德逵，仕红萍.血清肌钙蛋白T与心肌酶谱指标联合检测用于急性心肌梗死诊断作用[J]. 心血管病防治知识，2016，（2）：35-37.

5 陈士轩，牛红霞，褚晓雯，等.心肌酶和cTnI对急性一氧化碳中毒后心肌损伤的诊断价值[J].川北医学院学报，2015，30（6）：745-747.

6 陈小君，孟淑娟，杨凯．cTnT、CK-MB、FIB和DD联合检测在急性心肌梗死中的诊断价值[J].国际检验医学杂志，2012，33（12）：1440-1441.

7 张玲，密宇仙，马淑红，等.健康儿童血清肌酸激酶MB型同工酶活性参考值探讨[J]. 中国实验诊断学，2009，13（5）：683.

8 包国祥，杨国灿.0～14岁健康儿童免疫抑制法测定CK-MB的参考范围调查[J].浙江医学，2013，35（18）：1697-1705.

9 成守金，罗云杰，倪风琴.儿童血清CK-MB活性升高原因及参考值测定[J].医学研究杂志，2007，36（6）：111.

10 郑荣，董振南，董矜，等.不同年龄段健康儿童血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）临床评估[J].军医进修学院学报，2010，31（4）：337-347.

11 张秀明，李健斋，魏明镜.现代临床生化检验学[M].北京：人民军医出版社，2001：142-152.

12 吴凤丽，马晓光，孙玉珍，等.血清CK-MB活性假性增高原因分析及临床意义[J].中国实验诊断学，2007，11（8）：1041-1043.

Detect the CK-MB Level with Immune Suppression Method in 5 Months～13 Healthy Children in Shenzhen Area and Explore the Reasons

LEI Yong-ge，Cao Qiao-lin.
Clinical laboratory of Shenzhen Dapeng New District Maternity and Child care Division，Guangdong Province 518120

Objective To understand the immune suppression method test the levels of serum creatine kinase MB isoenzyme （CK - MB） in shenzhen area in 5 months ～ 13 years aged healthy children，and provide the Results 1062 cases of healthy children CK - MB storage anomaly detection rate was 66.20% （703/1062），including reference range of analysis with the methodology，the difference of the CK-MB for the region to establish healthy children provides some references for the reference range. Methods Collected March to June 2016 medical care of hospital，1 062 cases of healthy children，according to the age is divided into five months to 3 years old preschool group，4～6 years old children and 7～13 years，primary competitions and other three groups，and selected the same healthy adults 390 cases，the immune suppression method is adopted to detect the contents of serum CK-MB，compared with methodology provides the reference range，content is beyond the scope of the specimen at the same time for troponin I （cTnI），myoglobin （MYO） and electrocardiogram examination，and the results were analyzed. Results Preschool group，preschool and primary sections CK-MB content abnormal rate was 81.02% （239/295），66.23% （251/379） and 54.90% （213/388），differences between groups of CK-MB content abnormal rate was statistically significant （χ2= 3.71～15.95，P＜0.01～0.05），and 390 cases of healthy adults in serum CK - MB content ＜ 24 U/L; Specimens of 703 cases of abnormal CK - MB content of cTnI levels are ＜ 0.034 ng/ml，3 cases of specimens MYO results increased slightly＞61.5 ng/ml，but then on the electrocardiogram trace examination，abnormality was not found; Preschool group，infants and children primarycompetitions in serum CK-MB content were 41.52±19.38 U/L，35.09±14.37 U/L and 28.15±7.86 U/L，between different age children in the serum CK-MB content difference was statistically significant （t=2.596～2.596，P＜0.05）; Healthy children in serum CK - MB content was 34.97±10.64 U/L，healthy adults in serum CK - MB content was 16.05±7.13 U/L，between the two results was statistically significant difference （t=13.927，P＜0.01）. Conclusion Detection of immune suppression in shenzhen area in 5 months ～ 13 years healthy children serum CK-MB in the abnormal rate is very high，no direct reference methodology to provide clinical reference range，therefore，regional health children CK-MB in time the normal reference range of immune suppression method should be established，in order to better serve the clinical，lest cause misdiagnosis and unnecessary confirmed project inspection.

Immune suppression method Children Creatine muscle enzymes MB isoenzyme

R446.11

A

1671-2587（2017）02-0151-04

2016-12-16）

（本文编辑：王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.017

*本课题受广东省深圳市宝安区科技局项目（No.2016cx273）资助

518100 广东省深圳市大鹏新区妇幼保健院检验科（雷永革）；深圳市宝安区松岗人民医院内科（曹巧林）

雷永革（1975–），男，湖南人，主管技师，学士，主要从事临床检验工作，（E-mail）leiyongge1975@163.com。