猪弓形虫自然感染病例病理组织学观察

马文才，郭抗抗，张为民

(西北农林科技大学动物医学院，陕西杨陵 712100)

猪弓形虫自然感染病例病理组织学观察

马文才，郭抗抗，张为民*

(西北农林科技大学动物医学院，陕西杨陵 712100)

为探究猪弓形虫感染对猪器官组织学结构的影响，对信阳某猪场自然发病猪进行病理学诊断。处死病猪后采取肝脏组织用福尔马林固定，姬姆萨染色法进行染色。采集肺、肝、肾、淋巴结和心等组织，石蜡包埋，HE染色，光学显微镜下观察。在用姬姆萨染色的肝脏切片上能够观察到弓形虫的速殖子，分别在肺、肝、肾、脾脏、淋巴结和心脏等组织器官切片中发现弓形虫滋养体或假囊，表明该场疾病是由猪弓形虫引起的，各组织器官出现出血、炎性细胞浸润、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞增多等病理变化。

猪；弓形虫；诊断；病理组织学

猪弓形虫病(Porcine toxoplasmosis)是许多动物都能够感染的一种人畜共患病，其中人和猪的感染率都很高，有报道显示人类在全球范围内弓形虫血清阳性率在0～90%之间[1]。在猪群中呈流行性暴发，临床症状以全身淋巴结病变为特征。怀孕母猪极易感染弓形虫，常常表现为流产或死胎，并且该病的病死率很高。杨晓伟等[2]对重庆地区6个规模化猪场不同饲养阶段的猪分别采样分析显示，6个猪场中有4个猪场的母猪均变现出较高的弓形虫血清阳性率。随着规模化养猪业的发展，全国性暴发性的猪弓形虫病已经不多见，但地方性暴发流行还时常发生[3]。我们对信阳某猪场自然感染病例进行临床检查和实验室诊断，确诊为猪弓形虫病。现就基本情况总结如下，以期为临床诊断该病提供资料。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病例 2014年8月中旬，信阳某猪场一栋猪舍共260头母猪开始发病，体温达到40.5℃～41.5℃，不采食，粪便呈粒状，外附黏液，尿呈橘黄色。数日后病猪在前肢外侧处出现出血斑。有的病猪在耳尖发生干性坏死，耳壳上形成痂皮。有的病猪在发病后期出现后肢麻痹等神经症状。死亡时呼吸极度困难和体温急剧下降。部分怀孕母猪发生流产和死胎。

1.1.2 病理组织学试剂与仪器设备 HE染色和姬姆萨染色相关试剂和切片制作相关仪器，由西北农林科技大学动物医学院临床兽医实验室提供。

1.2 方法

1.2.1 病理剖检和采样 对病猪进行病理剖检，观察并记录病变，同时采取肺、肝、肾、淋巴结和心等组织器官固定在100 mL/L福尔马林中，制作石蜡切片，HE染色和姬姆萨染色。

1.2.2 姬姆萨染色 按照姬姆萨染色液说明书进行染色，显微镜观察。

1.2.3 石蜡切片制作 常规方法制作石蜡切片[4]，HE染色，光学显微镜下观察。

2 结果

2.1 病理剖检变化

发现腹股沟淋巴结有出血点，肿大；肺心叶与膈叶前下缘出现肺炎灶，肺水肿、小叶间质增宽及小叶性肺炎；心脏有心包炎；脾脏肿大，切面脾髓易刮脱，粥状；肝脏肿大、边缘钝圆、表面有灰白色坏死灶；肾脏肿大、呈土黄色、表面有出血点和灰白色坏死灶；肠道可见到扁豆大小的坏死灶。

2.2 姬姆萨染色结果

用姬姆萨染液染色后的肝脏在显微镜能够观察到弓形虫的滋养体(图1)。

图1 肝细胞胞浆可见滋养体(姬姆萨染色，400×)

2.3 组织学观察

肺脏可见肺出血，肺泡腔增大、腔内尘细胞和嗜酸性粒细胞增多；肺泡壁肺泡Ⅱ型上皮细胞、淋巴细胞增生；部分肺泡壁上皮细胞变性、坏死和脱落，淋巴细胞浸润(图2)。肝细胞颗粒变性，肝细胞索和肝血窦消失，红细胞变形且红细胞内有虫体存在，在肝细胞浆内见弓形虫滋养体或假囊，肝脏部分细胞坏死，形成坏死灶，坏死灶内有枯否氏细胞和淋巴细胞浸润，在坏死灶周围有出血现象；肝小叶间质可见大量淋巴细胞浸润，且间质结缔组织增生；肝门管区淋巴细胞浸润和嗜酸性粒细胞增多，结缔组织增生(图3a和图3b)。肾脏肾小球出血，淋巴细胞浸润和嗜酸性粒细胞增多，肾小管上皮细胞肿胀，胞浆有大量微细颗粒，部分肾小管上皮细胞坏死，坏死的上皮细胞碎片脱落掉入管腔；有的肾小管结构不完整，在肾小球毛细血管网内皮细胞和肾小管上皮细胞浆中可见弓形虫滋养体(图4)。淋巴结出血，淋巴小结消失，淋巴细胞数量减少和淋巴窦内嗜酸性粒细胞增多，网状细胞水泡变性；淋巴结坏死，形成坏死灶，在巨噬细胞浆内可见弓形虫滋养体(图5)。脾脏淋巴细胞数量减少，巨噬细胞数量增多，出血；脾脏白髓生发中心和帽区消失；脾脏含铁血黄素增多，嗜酸粒细胞数量增多和可见弓形虫滋养体；红髓嗜酸粒细胞数量增多，网状细胞坏死，巨噬细胞胞浆内可见弓形虫滋养体，红细胞变形(图6)。心脏出血，心肌纤维肿胀，心肌纤维胞浆可见大量微细蛋白质颗粒，部分心肌纤维坏死，核溶解消失，心脏组织间隙嗜酸性粒细胞增多(图7)。

图2 肺出血(HE染色，400×)

3 讨论

弓形虫是一种人畜共患病，几乎能感染所有的温血动物，其中猪的感染率是最高的[5]。近几年来，关于猪弓形虫病暴发的报道越来越多，在河南、新疆、青海和重庆等地猪弓形虫病的血清阳性率都很高[6-9]，对我国养猪业造成巨大的经济损失。弓形虫有5种不同形态的生活史，其中速殖子和卵囊是其感染形态，速殖子可以经过胎盘从母体传播到胎儿身上，使胎儿获得先天性感染，同时速殖子也可以在猫体内配子生殖形成卵囊，卵囊随粪便排出，经消化道或皮肤创口进行感染[10-11]。

在肝脏的姬姆萨染色切片和病理切片中都观察到了弓形虫的速殖子或滋养体，红细胞由于虫体的存在而变形，再根据该猪场的发病情况和病理剖检可以确诊为猪弓形虫感染。因此，发病猪临床表现为发热、前肢外侧有出血斑、耳尖坏死、有的呈犬坐姿势和母猪流产或死胎。

图3 肝细胞变性、坏死，炎性细胞浸润，肝细胞胞浆可见滋养体( HE染色，400×)

图4 肾小管上皮细胞变性、坏死(HE染色，400×)

图5 淋巴结出血、嗜酸性粒细胞浸润(HE染色，400×)

图6 脾脏组织间隙巨噬细胞、嗜酸性粒细胞数量增多(HE染色，400×)

图7 心肌纤维变性、嗜酸性粒细胞浸润(HE染色，400×)

在肝脏、肾脏和脾脏等病理切片中观察到中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞增多，可能是由于在弓形虫感染过程中趋化因子信号通道被激活[12]，增加机体的抗病能力。弓形虫进入宿主的各脏器或组织细胞内寄生、发育、增殖和破坏细胞，虫体从形成的假囊逸出后又可以侵犯邻近的细胞，如此反复破坏，因而导致局部组织炎症、水肿和弥漫性坏死，扩散到周围组织引起病变，进而引起全身性感染，出现典型的间质性和小叶性肺炎、坏死性肝炎和出血性淋巴结炎等。因此，在病理剖检中见到肝脏、肾脏和脾脏等组织器官表面有出血、坏死灶、水肿和间质增生等病理变化。病死猪出现间质性肺炎、小叶性肺炎和心包炎，死亡时呼吸困难，说明是死于心力衰竭和窒息，这和王金玲等观察的结果是一致的[13]。

我们在信阳某猪场自然发病猪进行病理学诊断时发现在姬姆萨染色的肝脏切片上能够观察到弓形虫的速殖子，分别在肺、肝、肾、脾脏、淋巴结和心脏等组织器官HE染色的切片中发现弓形虫滋养体或假囊，表明该场疾病是由猪弓形虫引起的，引起各组织器官出现出血、炎性细胞浸润、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞增多等病理变化。

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[13] 王金玲,丁玉林,王凤龙,等.一起猪弓形虫病自然病例的病理学观察[J].内蒙古农业大学学报,2012,33(1):1-5.

Histopathologic Observation in Pigs Natually Infected withToxoplasma

MA Wen-cai,GUO Kang-kang,ZHANG Wei-min

(CollegeofVeterinaryMedicine,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi,712100,China)

In order to explore the effect of porcine toxoplasmosis on histological structures of organs,the histopathologic diagnosis was made in naturally infected pigs in a pig farm of Xinyang.The liver tissue was collected,and fixed with formalin,and dyed by Giemsa staining.Paraffin imbedding and HE staining were used to these collected tissues, like lungs,liver,kidney,lymph nodes and heart,and then were observed under optical microscope.It can be diagnosed that the disease was caused byToxoplasma, and the tachyzoites were observed in liver section dyed with Giemsa staining, and the tachyzoites or pseudocysts were found in organ tissue slices of lungs,liver,kidney,spleen,lymph nodes.The pathologic lesions like hemorrhage,inflammatory cell infiltration and the increase of eosinophilic granulocytes and neutrophilic granulocytes in tissues and organs were also observed.

pig；Toxoplasmagondii；diagnosis;histopathology

2016-06-13

陕西省重点农业科技示范推广项目(ZDKJ-2014-33)

马文才(1991-)，男，河南淮阳人，硕士研究生，主要从事兽医临床工作。*通讯作者

S852.723;S852.31

B

1007-5038(2017)01-0128-04