规模化猪场实验室的建立和管理要求

郑姣妹，张冬初，罗冬生

（1.湖南省长沙市动物疫病预防控制中心，湖南 长沙 410300 ；2.湖南省浏阳市集里防疫检疫站，湖南 浏阳 410300；3.湖南省长沙市动物卫生监督所，湖南 长沙 410300）

规模化猪场实验室的建立和管理要求

郑姣妹1，张冬初2，罗冬生3

（1.湖南省长沙市动物疫病预防控制中心，湖南 长沙 410300 ；2.湖南省浏阳市集里防疫检疫站，湖南 浏阳 410300；3.湖南省长沙市动物卫生监督所，湖南 长沙 410300）

为了帮助大中型规模化猪场建立符合要求的兽医实验室，文章就规模猪场兽医实验室建立的目的、原则展开讨论，对实验室管理和运转中人员、制度、检测、采样、记录、报告等方面的要求进行探讨，以期为猪场兽医实验室建立和管理提供参考。

规模猪场；兽医实验室；建设标准；安全管理

随着养殖业的快速发展，国内外猪场间猪只流动频繁，各种疾病的传播或变异也变得更加快速，发病的临床症状不再单一，很多情况下都是几种病混合感染，根据临床经验很难对发病猪及时准确的诊断，必须借助兽医实验室的精确检测，才能对疫病进行确诊。同时，由于猪场向产业化、规模化迈进，越来越多的大中型规模猪场计划或已经准备建立兽医实验室，但是对兽医实验室建立目的和原则以及管理要求还没有清晰的认识[1]。本人常年从事兽医实验室的监测工作，熟悉实验室的建立和管理要求，和大家一起探讨规模化猪场兽医实验室的建立和管理。

1 建立目的

规模化猪场建立兽医实验室主要目的是节约诊断成本，增强猪场效益。传统猪场样品疫病检测和抗体检测都需要送到专业检测机构，但猪场一般都设立在远离城镇的偏远地区，与检测机构都有一定距离，采集后的样品不能及时检测而得到最快的反馈结果，样品保存和运输也产生相应成本，猪场必须配备足够样品保存设施设备，采取相应的生物安全措施，才能保证样品不发生影响检测结果的变化,不对外界造成污染。猪场建立兽医实验室，一是采样后可以直接对样品前处理，快速诊断发病情况，根据诊断结果，指导合理用药，提高预防与治疗效果。二是可以按时采样进行抗体检测，及时了解疫苗免疫效果，对其进行安全性评价，评估群体健康，制定科学的免疫程序。三是可以进行基础性检测和简单生物制品的制备，提高猪场疾病防控的能力。总而言之，建立兽医实验室，猪场的疫病防控可以由被动转为主动，最大限度的减少经济损失，促进养猪业健康长效的发展。

2 建立原则

规模化猪场兽医实验室的建立不是专业意义上实验室检测机构，但是其建立原则也必须符合相关规定，至少符合一级动物实验生物安全实验室即ABSL-1 标准，也称动物实验基础实验室的要求[3]。

2.1 场地的要求

应根据猪场生产规模、地势、水源，以及交通、电力、物质供应等条件等进行全面考虑。要尽量减少对周围环境的影响，远离居民生活和用水区域。规模猪场兽医实验室要建立在一个相对独立（建有屏障或缓冲区）或封闭的区域，选址应在离生产区1 000 米的下风方向，处于排污设施的下游[2]。处在较低的地势和下风方向，实验室的污水、废弃物中可能存在的病原微生物、寄生虫不会造成对猪场的二次污染。减少这些病原扩散和传播，就减少了猪场疾病发生的可能性。同时，实验室必须保证持续的电力和水的供应，以保证实验室仪器设施和设备正常启动和运转。地理位置和交通条件要足够便利，能及时运送和储备实验所需要的耗材和试剂以及设备。

2.2 实验室的布局

兽医实验室基本的建筑设施必须包括准备室、病畜解剖室、病原检测室、血清检测室、样品保存室、无菌室、档案室等，有条件的可以增加分子生物学室、仪器室等。染病猪首先在病畜解剖室解剖，采集组织病料、血样及微生物样品后，到病原检测室、血清学实验室进行病原诊断或者血清学检测；暂未检测或已经检测完成的样品，可以标识后分区存放于样品室；需要进行无害化高温消毒处理的样品或者器械，在准备室操作；采样工具或实验器械消毒和洗涤也在准备室完成；无菌室主要进行微生物或病毒的检测及培养。各功能室要求地面平整、防滑、易清洁、不渗水，墙面光滑，实验台面耐化学和消毒品的腐蚀和防水，门窗密闭性良好。各室入口及功能区要求有明显标识，如有危险区域（高温高压或病菌）则在明显位置设立警告标识。

2.3 工作人员的要求

2.3.1 具备生物安全意识，实验室的进出具备严格的消毒制度，进出时消毒、更衣，防止病原随意传播。

2.3.2 能将实验室的工作与养猪生产紧密结合起来，能根据实验结果对生产实际给出合理化的建议，能有意识的保存有用的生物样品，为今后的生产提供方便或降低成本。

2.3.3 工作要求一丝不苟、耐心细致，结果记录详实，生物样品妥善保存等均需要工作人员严谨，科学的态度。

2.3.4 具备分析实验结果的能力，能准确判断实验结果的成立，综合分析实验结果说明的问题,不是机械地向生产人员给出得到的结果，将实验结果与生产很好的结合起来，给技术人员提供免疫和治疗方案。

3 实验室管理要求

3.1 服务宗旨：专业，高效，及时，准确

实验室工作人员必须具有专业理论基础知识，能熟练操作检测仪器设备，根据检测项目的国家标准检测方法，按照实验室的生物安全管理规定对样品进行准确检测。实验人员接到样品后，在最快的时间内对样品进行及时检测，把实验数据第一时间反馈到猪场技术员，使其能抓住有效治疗时机，减少损失，这就要求实验室工作高效、及时、准确。

3.2 工作原则：客观，独立，公正，严谨

实验室的检测结果直接影响猪场的免疫程序的制定，治疗措施以及管理方案，检测工作与猪场经济效益息息相关，检测服务于猪场，检测工作必须以事实说话，结果必须真实、客观、符合实际，不受任何个人和其他外界因素的影响，独立、公正是检测工作的基本要求。实验操作的一个细微处理措施都有可能影响检测结果，尤其是微生物的检测，处理过程中的任何马虎细节都可能造成污染，实验操作和数据判断要求有严谨的工作态度，才能得出准确的结论。客观、独立、公正、严谨的原则必须在检测工作中贯穿始终。

3.3 管理手册的建立

建立与工作相适宜的管理文件，作为指导兽医实验室管理的纲领和行为准则，能使检测工作更加规范、有序。管理文件可以根据实际要求，规定检测方法、仪器管理，报告出具、样品处理流程、人员管理、培训与考核等方面的要求；还包括制定实验室管理制度；编写仪器操作规程；设计记录表格等。

为使实验室人员明确各自岗位职责及工作要求，实验室应该把部分制度内容在醒目位置张贴上墙。包括实验室岗位责任制、实验室仪器设备操作使用管理制度、卫生安全制度、病料采集保存制度，生物安全管理制度、实验记录制度、档案资料管理制度等等。

3.4 人员技能考核

实验室的管理不仅对工作人员资质、专业基础、工作岗位责任有要求，还需要定期开展技能考核，通过开展实验室不同人员、不同仪器、不同方法的实验室比对，盲样检测或者留样复测等方式进行技能考核，以保证实验结果的准确，也可以通过人员互相监督，实际现场查看，查阅记录，与同类型实验室或第三方实验室开展比对实验等多种方式，考核检测人员的操作能力和技术水平，考核时可以根据检测结果的准确性、过程的规范性、操作时限性、记录的完整性等进行比较，对技术人员的考核，可以尽量减少由于人的因素造成的试验结果的误差，保证结果的真实可靠。

3.5 人员技能培训

随着现代科学技术的飞速发展，检测仪器设备不断推陈出新，虽然越来越朝简化易行发展，但是了解新仪器设备检测原理，熟悉其操作技术，掌握样品处理方法，是实验室人员必备技能。检测方法一直都在不断的更新进步，国家每年都有新的检测标准方法更新替换旧的标准，从简单的感官判断、生化反应，到分子生物学检测、精密仪器测定，检测工作随着日益高精尖研究发展的科技向更加具有科技性和精准性的方向进步，因此也要求工作人员必须随时加强学习培训，适应方法和高端设备的进步。定期开展培训，是实验室人员的不断学习，及时掌握最新检测方法的有效途径。

3.6 采样及保存

检测结果准确不仅要求检测过程的精确无误，还要求采集的样品符合检测要求，采样过程不规范会直接影响检测诊断结论。采样和保存主要有以下一些要求：

3.6.1 采样的记录填写

采样单要详细记录包括猪场免疫时间、种类、发病猪的日龄、体重、发病时间、临床症状、发病率、死亡率等信息，实验室的工作人员才能全面了解样品相关的具体情况，根据检测结果与采样单信息，再联系实际情况，分析结果反馈到技术人员或管理人员。某一项或某一方面的信息不完整，都可能造成检测结果分析的误读，例如抗体的检测，就需要联系免疫时间、程序、疫苗的种类等相关信息进行分析，错误的记录填写不仅不能分析出正确的结论，还可能导致完全相反的结论，另外，采样记录单上必须填写采样时间，联系人，样品类型等，这些信息记录全面清楚有利于分析反馈猪场发病或免疫情况。

3.6.2 样品的完整性

采集的样品要求具有完整性，一是要求有足够能反应出病原存在的病料组织，如淋巴，扁桃体，脑、肺脏，肝脏，脾脏、全血或血清等，不同检测目的采集不同病原组织，一般尽量采集目的病原存在较多的部位，例如猪瘟采集的是脾脏，淋巴、扁桃体；蓝耳病料采集的是肺脏、淋巴、血等。而不是采集与发病无关的其他组织，如猪瘦肉、肥油等。二是采集足够份量作为检测用量，一般组织样品不少于15～20g，血清样品不少于 500μL ，样品一般根据实际检测需要量稍多外，还需要多采集一份作为备份，但不需要把完整肺脏或肝脏全部做为样品保存。

3.6.3 样品的包装和标记

样品采集后，按照样品性状及时用对应的包装或容器分类包装好。并在样品的包装外表上做好标记，上面的信息应与采样单记录的内容一一对应，这样不同批次样品不会混淆，样品之间也不会交叉污染。微生物检测用样品的采集更需要特别注意包装的密封性，做到既不污染外界，也不被外界所污染。

3.6.4 样品的保存

猪场实验室样品采集后即可送实验室处理检测，但也有因为样品量大，人手少，不能及时检测的情况，需要正确保存样品，如果距检测时间短，组织病料和血清样品可以 0～8℃保存，如时间长则必须在 -20℃保存。血液样品如果用全血检测，就必须采样后立即进行，或者根据需要加抗凝剂处理。如进行抗体检测，采样后离心取血清样品，冷冻可以长期保存。不同类型样品一定分类保存，每个实验室根据自己的需要，可以按照收样时间顺序、样品类型、不同实验项目、不同疾病或者最后的实验结果等分类方式保存样品。

每份样品在检测完成后都应按照生物安全管理要求处理好样品，不能造成污染。

3.7 样品的检测流程

规范样品检测流程是做好实验室管理的关键要素，一般常规检测流程是：接收样品—实验员进行检测、复核—出具报告—对检测完毕样品进行无害化处理—报告签字后交生产部门。对检测报告有异议的，根据具体情况安排不同实验员，在有人监督的情况下，提取备份样品重新按流程检测。检测过程的每一步都需要签字确认，包括样品接收、流转、检测、复核、仪器使用、报告签字确认等，必要时有双人或三人签字。

3.8 记录与报告

3.8.1 实验室要求使用统一规范的记录表格和检测报告，对采样，收样，流转，检测，仪器使用，出具报告等事实客观准确记录全过程，记录不仅要求能够清晰复现检测过程的关键步骤及数据，还要有详实的具体信息，包括检测样品的名称、编号、检测方法、步骤、时间、地点、检测人、使用的仪器。要求数据真实，信息与实际情况相符，且有具体实施人的签字确认。

3.8.2 除检测工作记录要即时准确的填写外，其他与检测工作相关的记录，如仪器的维修维护、计量检定、样品无害化处理情况、质量控制、服务的购买与供应，试剂和耗材的评价都需要客观真实、及时、清晰记录，不允许事后补记，如需修改都按照统一规定的要求进行修改，一般每页记录纸上修改次数不得超过三处。

3.8.3 检测报告是检测工作的最终体现，报告的信息不仅体现的是具体数据和结果，还是所有工作能力和水平的表现，猪场要根据检测报告对样品的结果进行判断和分析。因此，报告一是具有时限性，从采样检测到报告的出具都应该在最短的时间内尽快完成。二是具有权威性，检测工作全部按照国家标准要求操作，任何签字确认都是具有资质的人员才能授权操作。三是报告具有科学性和真实性，报告所包含的信息和数据不可随意篡改和否定。

3.8.4 各项实验活动及管理工作的原始记录和报告都需要按照档案管理的要求，整理成册，统一归档。

3.9 实验室生物安全

3.9.1 生物安全管理：实验室的生物安全管理是实验室建立和运行最重要的关键因素。实验室不能发生例如菌毒种外泄，试剂药品污染、爆炸，火灾等任何生物安全事件，除建筑结构需要按照生物安全管理规定设置功能分区、内外部装修符合要求外，还需要配备应急照明设施、防火设施、贵重精密仪器标识、有毒有害警示标识等。

3.9.2 实验安全：包括实验操作安全；慎用危险实验用品；实验前做好准备工作，实验之后操作台应清理消毒，气溶胶类实验在通风柜里进行等。

3.9.3 个人安全：做好个人安全防护措施；明确实验室准入制度；仪器设备的安全使用。

3.9.4 环境安全：废水污水经过无害化处理；微生物培养灭菌后统一处理；实验耗材和废品应做无害化处理。

4 小结

总之，规模化猪场建立起良好的兽医实验室，不仅要求环境、仪器、材料、设备这些硬件条件达标，人员、技术、方法、管理措施这些都是重要的影响因素，实验室的正常运转可以为猪场的养殖保驾护航，否则带来的是不可估量的负面影响，期待规模场兽医实验室能真正为养殖业健康、有序的发展起到积极的作用。

[1]张凤鸣.规模猪场小型兽医实验室建设[J].畜禽业，2014,305（9）28-29.

[2]李润成.大型规模猪场兽医实验室应该如何建立和运转[J].猪业科学，2008,9（10）78-80.

[3]中华人民共和国国家标准.实验室生物安全通用要求:GB 19489-2008[S].北京：国家质量监督检验检疫总局，2008.

[4] 农业部.关于印发《兽医系统实验室考核管理办法》的通知：农医发[2009]15 号[A/OL].(2009-08-27)[2017-04-10].http://www.moa.gov. cn/zwllm/zcfg/nybgz/200908/t20090827_1340193.htm.

[5]农业部. 关于印发《兽医系统实验室考核工作实施方案》的通知:农办医[2010]13 号[A/OL].(2010-03-15)[2017-04-10].http://www.moa. gov.cn/zwllm/zcfg/nybgz/201003/t20100315_1446708.htm.

S851.6

B

1006-4907（2017）03-0022-04

10.3969/j.issn.1006-4907.2017.03.010

2017-04-20