三种不同方法对孕妇人巨细胞病毒感染的检测

赵岩峰 张景艳 张永旭

三种不同方法对孕妇人巨细胞病毒感染的检测

赵岩峰 张景艳 张永旭

目的探讨孕妇人巨细胞病毒感染（HCMV）中酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金法、化学发光法的检测效果。方法368例孕妇均实施ELISA、胶体金法、化学发光法，检测HCMV的IgM、IgG抗体水平。结果ELISA、胶体金法、化学发光法检测IgG阳性率为90.2%、46.2%、92.9%；三种方法检测IgM阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）。结论化学发光法对孕妇人巨细胞病毒感染IgM、IgG抗体水平阳性检出率高。

人巨细胞病毒感染；酶联免疫吸附试验；胶体金法；化学发光法

作为临床上一种常见疱疹病毒β亚科，人巨细胞病毒（Humancytomegalovirus，HCMV）属于双链DNA病毒，患病率较高[1]。一旦孕妇出现HCMV感染，会改变其内分泌及代谢功能，对处于潜伏期的HCMV进行激活，致使出现活动性感染，是引发先天性感染及围生期感染的一个重要病原。这就需要加强孕妇HCMV感染检测，以便进行早期诊断和治疗。本研究为深入探讨酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）、胶体金法、化学发光法的检测效果，回顾性分析了368例孕妇的一般资料，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

所选研究对象为2016年1月—2017年1月到本院进行孕期检查的孕妇，共纳入病例数为368例。368例孕妇及家属均对本研究知情同意。本组孕妇中，年龄最小为20岁，年龄最大为42岁，平均年龄（26.8±3.5）岁。所有孕妇均无HCMV感染史或相关临床表现。

1.2 方法

抽取所有孕妇2 ml清晨空腹静脉血，置于一次性非抗凝真空管，静置1 h，用离心机做2 500 r/min离心处理，对血清进行分离，实施抗体检测。

ELISA检测采用欧蒙生物工程有限公司提供的试剂盒，反复检测3次，取平均值。以Rayto RT-6100酶标仪检测，吸光度值（OD）在450 nm和630 nm波长处读取，对临界值（CO）进行计算，计算方法为阴性对照平均值+0.25。阴性判断标准：样品OD值/CO值在1.0以下；可疑阳性判断标准：样品OD值/CO值为1.0～1.2；阳性判断标准：样品OD值/CO值在1.2以上[2]。

胶体金法检测采用杭州艾康生物技术有限公司提供的试剂盒，血清HCMV的IgM、IgG抗体水平采用胶体金法进行检测。阳性判断标准：有两条紫红色条带出现在试剂板上，一条位于测试区，另一条位于质控区。阴性判断标准：测试区无紫红色条带，一条紫红色条带位于质控区[3]。

化学发光法检测所用仪器为罗氏cobase602电化学发光分析仪及相关配套试剂盒，检测IgM、IgG抗体水平。阳性判断标准：IgM、IgG结果Index＞0.50[4]。

1.3 统计学方法

将收集到的数据通过SPSS19.0软件进行统计分析，计数资料用%表示，采用χ2检验。以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三种方法检测IgG结果

ELISA检测IgG阳性332例，阴性36例，阳性率为90.2%；胶体金法检测IgG阳性170例，阴性198例，阳性率为46.2%；化学发光法检测IgG阳性342例，阴性26例，阳性率为92.9%。化学发光法、ELISA阳性率均高于胶体金法，差异有统计学意义（χ2=189.85、164.43，P=0.000、0.000）。

2.2 三种方法检测IgM结果

ELISA检测IgM阳性256例，阴性112例，阳性率为69.6%；胶体金法检测IgM阳性180例，阴性188例，阳性率为48.9%；化学发光法检测IgM阳性340例，阴性28例，阳性率为92.4%。化学发光法阳性率均高于胶体金法、ELISA，差异有统计学意义（χ2=167.75、62.24，P=0.000、0.000）。

3 讨论

当前，临床上检查人巨细胞病毒感染主要依赖血清学方法。其中，酶联免疫吸附试验是常用血清学检测方法，具有操作简单、方便快捷等特点，在临床上的应用较为广泛[5]。但是，酶联免疫吸附试验也具有一定弊端，如所用抗原成分复杂、易受RF因子干扰、特异性较差、与疱疹病毒科存在抗原交叉等，还会因加样时间、标本溶血等人为因素，导致出现假阴性及假阳性，临床应用受到限制[6]。本研究中，酶联免疫吸附试验检测IgG阳性率为90.2%，检测IgM阳性率为69.6%。

胶体金法是另一种常用检测方法，本研究显示，胶体金法检测IgG阳性率为46.2%，检测IgM阳性率为48.9%，均处于较低水平。这可能是因为所用标记物不纯，极易造成误诊、漏诊。而且，胶体金法大多通过肉眼检查，对结果的阴性及弱阳性进行判断，一旦血清标本中抗体水平处于较低状态，会致使检测条带不明显，导致出现假阴性，故检测结果易受检测者主观判断的影响[7]。虽然酶联免疫吸附试验与胶体金法均为定性诊断方法，但酶联免疫吸附试验诊断IgM、IgG阳性率均高于胶体金法。

化学发光法能定量分析IgM、IgG抗体水平，且主要由机器完成整个检测过程中，能有效避免检测结果受检测者主观因素的影响，可提升检出率[8]。本研究中，化学发光法检测IgG阳性率92.9%，高于酶联免疫吸附试验的90.2%及胶体金法的46.2%。而在IgM抗体检测中，化学发光法检测IgM阳性率92.4%，高于酶联免疫吸附试验的69.6%及胶体金法的48.9%，差异有统计学意义（P＜0.05）。提示化学发光法可作为有效检测孕妇人巨细胞病毒感染IgM、IgG抗体水平的方法应用于临床。

综上所述，化学发光法对孕妇人巨细胞病毒感染IgM、IgG抗体水平阳性检出率高。

[1] 李欣，李万顺，王海宁. 酶联免疫吸附试验、胶体金法和化学发光法检测孕妇人巨细胞病毒感染的对比研究[J]. 陕西医学杂志，2016，45（10）：1390-1391.

[2] 徐莉莉，牟文凤，杨丽，等. 婴儿血液、尿液及母乳中病毒DNA检测在诊断人巨细胞病毒感染中的应用[J]. 中国当代儿科杂志，2013，15（9）：748-750.

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[5] 郑琦， 王大利， 李悦. 儿童人巨细胞病毒感染的检测与治疗[J].中国妇幼健康研究，2015，26（6）：1323-1325.

[6] 吉耀华，羿永东，李书琴，等. 尿标本池检测法筛选新生儿先天性人巨细胞病毒感染[J]. 中国医科大学学报，2013，42（6）：535-538.

[7] 刘毅. 孕前优生健康检查TORCH检测结果分析[J]. 中国继续医学教育，2016，8（26）：42-43.

[8] 麦光兴，邱诗贤. 先天性人巨细胞病毒感染产前诊断的价值[J].中外医疗，2013，32（20）：99.

Detection of Human Cytomegalovirus Infection in Pregnant Women by Three Di ff erentMethods

ZHAO Yanfeng ZHANG Jingyan ZHANG Yongxu Department of Clinical Laboratory, The Center People's Hospital of Siping City, Siping Jilin 136000, China

ObjectiveTo investigate the effect of enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), colloidal gold assay and chemiluminescence detection on human cytomegalovirus (HCMV) infection in pregnant women.Methods368 pregnant women were treated with ELISA, colloidal gold method and chemiluminescence method to detect the levels of IgM and IgG antibody in HCMV.ResultsThe positive rate of IgG in ELISA, colloidal gold assay and chemiluminescence detection were 90.2%, 46.2%, 92.9% respectively, the positive rate of IgM signi fi cantly di ff erent among three methods (P<0.05).ConclusionThe positive rate of IgM and IgG antibody in human cytomegalovirus infection in pregnant women is high.

human cytomegalovirus infection; enzyme linked immunosorbent assay; colloidal gold method; chemiluminescence method

R446.1

A

1674-9308（2017）10-00664-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.10.032

吉林省四平市中心人民医院检验科，吉林 四平 136000