神经病理性疼痛中背根神经节交感神经芽生的机制研究

张华胜

561000安顺市人民医院

神经病理性疼痛中背根神经节交感神经芽生的机制研究

张华胜

561000安顺市人民医院

目的：研究背根神经节交感神经芽生的机制。方法：选取成年雄性大鼠，随机分为大鼠脊神经结扎模型组、糖皮质激素大鼠脊神经结扎模型组、Normal+TA和Norml对照组4组。SNL+TA组和Normal+TA组的大鼠在建立大鼠脊神经结扎模型时需要在局部将20 μL TA悬液注射到背根神经节处，对大鼠术后1、3、5、7 d的身体状况进行观察、研究。结果：将糖皮质激素注射到脊神经损伤的地方能够有效地缓解痛觉过敏，同时有效降低背根神经节交感神经篮状结构的出现，对背根神经节的交感神经芽生的损伤也明显降低。结论：在早期运用脊神经结扎模型时，背根神经节交感神经芽生的主要来源就是脊神经背支。提前采用灰支手术比使用外科或者化学性切断术能够有效减少损伤，减轻机械性疼痛。

神经病理性疼痛；糖皮质激素；背根神经节；交感神经芽生

在20世纪70年代时，Wall和Gutnick经过研究发现出现坐骨神经损害后其神经瘤病的病理机制：部分传输到神经元的自发性活动逐渐增多。传输的活动不断对脊髓神经元产生刺激。此外受损部分的背根神经节对肾上腺素能激动剂具有极大的敏感性。研究表明，烧伤或刺痛这种持续的疼痛可能是由受损的外周神经自发的情感冲动引起的；肾上腺素能交感神经在神经痛中可能会以某种方式促使神经元之间建立联系。自此开始，研究人员开始密切关注神经病理性疼痛的机制。国际疼痛研究协会对于神经病理性疼痛只是简单地做出了界定，即神经系统损伤或疾病影响躯体神经系统的疼痛[1]。在神经病理性疼痛中主要的特点就是自发性疼痛、痛觉过敏和超敏3种，普遍认为该病的发病机制主要分为外周和中枢两部分。在外周机制中，神经病理性疼痛具有重要的作用。另外神经病理性疼痛出现的交感神经出芽增生和损伤感传入耦联，也是DRG的主要特点之一。本文对神经病理性疼痛中交感神经芽生的机制进行了研究，现报告如下。

材料与方法

动物：本文中使用的实验对象为清洁级的成年雄性大鼠，体重均在210～260 g。每2只养在1个笼子内，在笼子内底部铺设一层吸水软层，确保室温(22±0.5)℃，湿度保持在65%左右，采用24 h昼夜不间断照明，大鼠可以自由地进食和饮水。进行研究前，采取上述饲养环境进行1周的饲养。本研究所涉及的动物饲养、使用和试验皆符合国际标准。

麻醉方式：使用异氟醚吸入和戊巴比妥钠腹腔注射液方式对大鼠进行麻醉处理[2]。

方法：①实验动物及分组：根据痛阈值将所有大鼠划分为大鼠脊神经结扎模型组、糖皮质激素大鼠脊神经结扎模型组、Normal+TA和Normal对照组4组。②手术方法：将大鼠麻醉后，对其背部毛进行剃除，大鼠采用俯卧体的方式被放置在37℃的保温毯上，对大鼠的四肢进行固定。使用乙醇和聚维酮碘溶液对皮肤进行清洁消毒，在距离背部中线1.5层面的地方实行右侧纵向切口，切口应该经过大鼠髂嵴缘端水平位置，并在L5棘突的地方做定位处理。然后进行显微镜解剖，将关节突腹外侧进行充分的暴露，解剖空间为L6横突背侧的位置，将解剖区的血液用棉签吸收干净，将L6上的横突使用咬骨钳进行移除，在移除过程中尽量避免对L4脊神经造成损害，将L5处的神经剪断。然后进行止血和缝合处理。手术结束后，用保温毯将其包裹直至苏醒，在手术过程中均未使用抗生素。对接受手术的大鼠，在手术后的第1、3、5、7天时对背根神经节交感神经芽生采用免疫组织化学的方式进行检测[3]。首先将大鼠麻醉、固定，使用灌注的方式将管道内气泡和物质进行排出，在心脏位置剪开，使心脏完全暴露，插管从左心室进入主动脉，将插管固定好，使用右心耳为灌注液流出口。使用磷酸盐缓冲液进行快速的冲洗，直至肝脏和心脏等器官变成白色，然后使用含有多聚甲醛的磷酸盐溶液进行灌注，直到大鼠全身出现颤抖，再到肌颤消失。然后取出L5神经节，进行明胶包埋过夜处理。然后在室温为4℃的条件下，将样品组织片孵化于酪氨酸羟化酶抗体，时间48 h，然后与生物素发生二抗反应，最后进行试剂反应处理。使用光学显微镜对载玻片上的神经节样本进行观察，并进行拍摄记录。

一般行为学观察：对接受手术后的大鼠身体情况进行观察。

结 果

将糖皮质激素注射到脊神经损伤的地方能够有效缓解机械性痛觉过敏，同时有效减少背根神经节交感神经篮状结构的出现，背根神经节的交感神经芽生的损伤也明显减少。

讨 论

背根神经节交感神经芽生发生的机制现在还无明确结论。但是，通过研究发现背根神经节芽生可能存在的机制包括神经元自发异常放电增加、炎性因子增加和营养因子形成等。

正常情况下的DRG神经纤维很少出现自发放电现象。在神经损伤、DRG压缩或局部出现炎症的情况下，神经电生理学家对C纤维和β纤维自发放电显著增加进行了记录。交感神经芽生会围绕自发表达有害标记物的神经元。自发放电也代表了神经元中各种离子通道的数量或功能的变化。董成海等人指出，交感神经芽生主要原因是来自于神经损伤后自发异位电活动。

在慢性疼痛的产生因素中，炎性反应也起着关键的作用。出现外周神经损害时常会伴有致神经病理性疼痛的炎症出现。周围神经损伤后，感觉神经元出现华勒氏变性，各种细胞因子的释放，减少神经元轴突和髓鞘变性，刺激新的轴突和扩展的产生。另一方面，炎性反应围绕着促进感觉神经元与神经胶质细胞的激活。由于多种细胞因子参与其中，导致神经元的异常自发放电。肖芳梅等使用DRG炎症模型研究引起的疼痛[4]，发现许多细胞因子表达量在不同的时间窗有显著的变化；炎症组的大鼠出现过敏和疼痛，在手术后3～7 d为最高值，持续时间4个星期。

卫星胶质细胞的神经营养因子的形成也对交感神经芽生的发育具有重要作用。叶海涛研究发现[5]，DRG神经元在神经损伤时卫星胶质细胞免疫染色阳性NT3和相应的mRNA NGF含量增加，本身并不是合成NGF和DRG神经元；抗体治疗的应用神经生长因子NGF和NT-3可以显著减少交感芽生的数量。其他研究表明，BDNF和LIF也有助于DRG交感神经芽生。

神经病变在模型建立后，交感神经出芽并且包绕的神经元增生现象是客观普遍存在的情况，其与神经性疼痛的关系也得到了证实。临床应用有效剂量的皮质类固醇，局部麻醉药通过神经阻滞治疗，可能是治疗神经性疼痛的一种良好的早期治疗方法。

[1]曲玉娟.TRPV4-MAPK通路在大鼠背根神经节持续受压致神经病理性疼痛中的作用机制研究[D].山东大学,2016.

[2]张春玲,任幼红.弥可保对糖尿病神经病理性疼痛大鼠背根神经节Nav1.7表达的影响[J].中国实用神经疾病杂志,2016,19(11)：36-38.

[3]黄云,张广钦.神经病理性疼痛小鼠背根神经节河豚毒素敏感型钠电流的变化特征[J].安徽医药,2016,20(2)：232-235.

[4]肖芳梅,田承浩.浅议神经病理性疼痛的发病机制[J].饮食保健,2017,4(4)：13-15.

[5]叶海涛.交感神经、炎性细胞因子与神经病理性疼痛的关系[J].中国微侵袭神经外科杂志,2017,22(2)：91-93.

Study on the mechanism of sympathetic sprouting in dorsal root ganglion in neuropathic pain

Zhang Huasheng
The People's Hospital of Anshun City 561000

Objective：To study the mechanism of sympathetic sprouting in dorsal root ganglion in neuropathic pain.Methods：Adult male rats were selected.The rats were divided into 4 groups：the spinal nerve ligation model group,the glucocorticoid rats spinal nerve ligation model group,the Normal+TA group and the norml control group.Rats in the group SNL+TA and the Normal+TA group were required to inject 20 mu LTA suspension into the dorsal root ganglion at the time of establishment of the spinal nerve ligation model in rats.The body condition of rats at 1,3,5 and 7 days after operation was observed and studied.Results：Injection of corticosteroids into spinal nerve injuries can effectively relieve mechanical pain and allergy,and effectively reduce the occurrence of sympathetic basket structures in dorsal root ganglia.The sympathetic sprouting of the dorsal root ganglion was also significantly reduced.Conclusion：When the spinal nerve ligation model was used in the early stage,the dorsal root ganglion was the main source of sympathetic sprouting,the dorsal ramus of the spinal nerve,surgical or chemical amputation is more effective in reducing injury and reducing mechanical pain when compared with anterior gray surgery.

Neuropathic pain;Glucocorticoids;Dorsal root ganglia;Sympathetic sprouting

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.24.1