Galectin-3、Midkine和VEGF表达在甲状腺癌诊断中的价值

王超宇 朱 昕 陈 源

(贵州省人民医院血管甲状腺外科，贵州 贵阳 550002)

Galectin-3、Midkine和VEGF表达在甲状腺癌诊断中的价值

王超宇 朱 昕 陈 源

(贵州省人民医院血管甲状腺外科，贵州 贵阳 550002)

目的探讨半乳糖凝集素(Galectin)-3(Gal-3)、中期因子(MK)和血管内皮生长因子(VEGF)在甲状腺乳头状癌(PTC)及良性甲状腺病变中表达的差异及其在鉴别诊断甲状腺良恶性肿瘤中的应用价值。方法采用免疫组织化学EnVision法检测100例PTC和100例良性甲状腺组织(80例结节性甲状腺肿和20例甲状腺腺瘤)中Gal-3、MK、VEGF的表达情况。结果Gal-3、MK和VEGF在PTC中的阳性率与良性病变中的阳性表达差异均有统计学意义(P<0.05)。在淋巴结转移组中VEGF、MK的表达高于未转移组(P<0.05)；在PTC中Gal-3的表达在有、无淋巴结转移组之间无统计学意义(P>0.05)。结论Gal-3、MK和VEGF对于PTC及良性病变的诊断及鉴别有很好的临床意义，在PCT组织中MK、VEGF的表达对预警淋巴结转移与否均具有较好的提示作用。

甲状腺乳头状癌；半乳糖凝集素-3；中期因子；血管内皮生长因子

甲状腺癌为头部常见恶性肿瘤，占全身肿瘤的0.2～1.0%〔1〕。目前甲状腺乳头状癌(PTC)在甲状腺癌中十分常见，是其中的亚型表现形式，大约占75%以上〔2〕。淋巴管转移是PTC最常见的转移渠道，PTC具有特殊性的乳头状结构和明显的细胞核形态〔3〕。然而，对PTC诊断及鉴别目前所面临的困扰是某些良性病变比如结节性甲状腺肿及甲状腺腺瘤并有乳头状增生且出现淋巴结转移。本研究旨在探究半乳糖凝集素(Galectin)-3(Cal-3)、中期因子(MK)及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平对PTC的诊断价值及与淋巴结转移的关联。

1 材料与方法

1.1临床资料 选择贵州省人民医院病理科2014年1月至2016年12月100例PTC(其中合并淋巴结转移16例)和100例良性甲状腺病变(80例结节性甲状腺肿和20例腺瘤患者)行手术切除的样本。病理学诊断均按照世界卫生组织(WHO)甲状腺组织学分类原则。PTC组男47例，女53例，年龄42～75岁；良性病变组男39例，女61例，年龄44～76岁。

1.2方法 用10%甲醛稳定甲状腺组织样本并作一般处理，然后用石蜡包埋进行连续切片，行苏木素-伊红(HE)染色。免疫组化利用EnVision法，步骤以说明书为准。磷酸盐缓冲液(PBS)替换一抗作阴性对照，已知阳性的组织作阳性对照，工作液及免疫组化试剂盒均购自福州迈新生物技术开发有限公司。

1.3结果判断 根据Beeskey分级方法〔3〕：无阳性细胞或阳性数<10%为阴性(-)；阳性数≥10%且<25%是弱阳性(+)，阳性数≥25%且<50%是中度阳性()，阳性细胞数≥50%为强阳性()；VEGF为无阳性细胞或阳性细胞数<5%为-；阳性细胞数≥5%且<15%为+，阳性细胞数≥15%且<30%为，阳性细胞数≥30%为。

1.4统计学方法 应用SPSS21.0软件进行χ2检验，条件不足者用Fisher确切概率法。

2 结 果

2.1Gal-3的表达情况 Gal-3往往在细胞质可见，然而某些病例可有细胞核着色。在结节性甲状腺肿和腺瘤中的表达以阴性为主(78例和17例)，仅见2例结节性甲状腺肿和3例甲状腺腺瘤呈局灶弱阳性表达；在PTC中则以中度及强度阳性表达为主，阳性率为97%(+2例，45例，50例)，仅3例阴性表达。PTC与甲状腺良性病变之间Gal-3阳性表达率差异具有统计学意义(P<0.05)。PTC中有淋巴结转移者Gal-3均呈阳性表达，阳性率为100%(+1例，2例，13例)；PTC中无淋巴结转移者其阳性表达率为96.4%(-3例，+1例，43例，37例)，两者差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2MK的表达情况 MK定位于细胞质染色。在结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤中的表达以阴性为主(78例和17例)，仅见2例结节性甲状腺肿和3例甲状腺腺瘤呈局灶弱阳性表达；而在绝大多数PTC中大部分细胞的胞质呈中度及强度阳性显色，阳性率为81%(-19例，+3例，38例，40例)。PTC与良性病变间的MK阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)。PTC中有淋巴结转移者MK均呈阳性表达，阳性率为100%(+2例，6例，8例)；PTC中无淋巴结转移者其阳性表达率为77.4%(-19例，+1例，32例，32例)，两者差异具有统计学意义(P<0.05)。

2.3VEGF的表达情况 VEGF阳性定位于细胞质。在结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤中的表达以阴性为主，无1例强阳性表达，阳性表达率为26%(其中-58 vs 16例，+15 vs 2例，7 vs2例)；而在PTC中则以中度及强度阳性表达为主，阳性率为70%(-30例，+8例，47例，15例)。PTC与甲状腺良性病变之间VEGF阳性表达率差异具有统计学意义(P<0.05)。PTC中有淋巴结转移者，VEGF以阳性表达为主，阳性率为93.8%(-1例，+2例，9例，4例)；PTC中无淋巴结转移者，其阳性表达率为65.5%(-29例，+6例，38例，11例)，两者差异具有统计学意义(P<0.05)。

3 讨 论

目前诊断PTC患者常依靠其特征性的乳头状结构和典型的细胞核改变。然而某些良性病变会作为不典型病例，比如结节性甲状腺肿及腺瘤等形成的假乳头或伴随乳头状增生而形成十分像PTC中的“真乳头”结构，并经常性地出现于甲状腺病变的病理学诊断中，这极大程度上困扰了对PTC与良性病变的判断。病理检验中甲状腺腺瘤上的某些生物分子标志物在疾病诊断中具有较高的特异性。本研究表明，Gal-3、MK、VEGF在PTC中的表达对该病的诊断与鉴别均具有非常重要的临床价值。Gal是一类多功能蛋白质，在大部分组织中参与着细胞过程，在机体组织细胞内外均扮演着重要角色〔4〕。其中Gal-3是植物凝集素蛋白家族成员的β半乳糖结合蛋白，具有重要的生理作用，如免疫系统的发育和激活〔5〕。此外，有研究证实Gal-3在肺癌、卵巢癌、胃癌等恶性肿瘤中出现高表达水平，认为其可能作为主要蛋白直接参与了肿瘤进展〔6〕。研究显示，Gal-3在PTC中阳性率明显高于良性病变〔7〕。其可能原因是Gal-3能够增殖机体组织中的正常细胞，若其在某些因素作用下发生过度表达将会引起细胞的恶性转化和转移癌细胞〔8〕。本研究结果认为，在鉴别诊断PTC与良性病变时，Gal-3有很好的参考价值。目前国内外关于甲状腺癌转移灶中有关Gal-3表达的相关文献尚不多，本研究结果提示Gal-3对预测PTC淋巴结转移意义不大。MK属于一类新的结合肝素的生长因子家族，具有多种生物学功能，并在胚胎发育期与细胞生长及分化有关。MK是一种有丝分裂原，肿瘤的生成与其有着重要的关联；MK还可通过抑制细胞凋亡而保护细胞，从而达到增殖细胞的功能，其可能原因是作为一类拮抗细胞凋亡的因子。研究发现多种肿瘤中MK表达量有增加的现象，在肿瘤病人血清中的水平表现为明显升高，因此其与肿瘤的发生、进展及预后存在密切相关〔9〕。杨鹏飞等〔10〕研究表明，甲状腺恶性结节患者血清中MK浓度明显高于良性结节患者和正常人群。本研究说明MK作为一种新的分子生物标志物，对PTC的诊断及鉴别诊断具有较好的提示意义。PTC患者中MK的表达水平可能与肿瘤恶性程度有关，需进一步研究证明其相关性。VEGF最初是在肝癌组织中发现，其高表达对肝癌新生血管形成及肿瘤生长和转移起重要作用。癌细胞的生长、转移依赖新生血管的形成，VEGF是最有效的促血管生长因子。VEGF可通过肿瘤相关巨噬细胞及肿瘤细胞产生的调控因子使其表达增强〔11〕。相关研究认为VEGF的表达水平有助于腺瘤组织学类型的鉴别，其表达量越高，恶性程度也越高，检测VEGF有助于评估甲状腺良恶性病变的诊断和鉴别诊断〔12〕。本研究结果认为，造成PTC发生转移的可能原因是癌细胞易侵入淋巴管道，从而促进癌细胞的淋巴结转移。因此，VEGF可作为生物学指标诊断及鉴别PTC与良性病变和淋巴结是否转移。将Gal-3、MK及VEGF三种生物分子标志物作为一个组合进行联合检测可提高结果的准确性。

1杨 帆，王永丽，文 智.甲状腺癌CT与超声影像特征的对照分析〔J〕.实用放射学杂志，2013；29(12)：1919-22.

2Aschebrook-Kilfoy B，Ward MH，Sabra MM，etal.Thyroid cancer incidence patterns in the united states by histologic type，1992-2006〔J〕.Thyroid，2011；21(2)：125-34.

3Beesley MF，McLaren KM.Cytokeratin 19 and galectin-3 immunohistochemistry in the differential diagnosis of solitary thyroid nodules〔J〕.Histopathology，2002；41(3)：236-43.

4Gray CA，Dunlap KA，Burghardt RC，etal.Galectin-15 in ovine uteroplacental tissues〔J〕.Reproduction，2005；130(2)：231-40.

5Liu FT，Rabinovich GA.Galectins as modulators of tumour progression〔J〕.Nat Rev Cancer，2005；5(1)：29-41.

6Giordano M，Croci DO，Rabinovich GA.Galectins in hematological malignancies〔J〕.Curr Opin Hematol，2013；20(4)：327-35.

7许文琼，梅金红，汤佳珍，等.Galectin-3、HBME-1和VEGF在甲状腺乳头状癌的表达及诊断意义〔J〕.中国现代医学杂志，2015；25(18)：26-30.

8陈 帅，任建强，潘 炯.GAL-3、CK19、HBME-1在甲状腺乳头状癌诊断中的应用价值〔J〕.实用医学杂志，2012；28(22)：3692-4.

9孙常铭，王丽萍，刘 敏.沉默人肺癌A 5 4 9细胞中期因子基因表达对细胞凋亡的影响〔J〕.重庆医学，2015；44(5)：608-12.

10杨鹏飞，李 娟，张建中，等.甲状腺结节患者血清Midkine检测及其临床意义〔J〕.湖北科技学院学报(医学版)，2016；30(1)：7-10.

11Laskin DL，Sunil VR，Gardner CR，etal.Macrophages and tissue injury：agents of defense or destruction〔J〕?Annu Rev Pharmacol Toxicol，2011；51：267-88.

12Zhou ZH，Cui XN，Xing HG，etal.Changes and prognostic value of serum vascular endothelial growth factor in patients with differentiated thyroid cancer〔J〕.Med Princ Pract，2013；22(1)：24-8.

王超宇(1983-)，男，主治医师，主要从事甲状腺及血管疾病诊治研究。

R73

A

1005-9202(2017)20-5082-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.20.057

〔2017-04-25修回〕

(编辑 袁左鸣/滕欣航)