影响冷沉淀质量的因素分析

杨 梅

（辽宁省血液中心，辽宁 沈阳 110044）

影响冷沉淀质量的因素分析

杨 梅

（辽宁省血液中心，辽宁 沈阳 110044）

随着医疗技术的不断发展，成分输血的有效性和安全性也逐步提高，临床医师根据患者病情，缺什么，补什么，有针对性地输入相应的血液成分以达到治疗的目的，冷沉淀即为其中一项。冷沉淀cryoprecipitate是新鲜冰冻血浆FFP在低温约0～5 ℃解冻后沉淀的白色絮状物，冷沉淀因其制作工艺简单、价格低廉临床应用广泛。冷沉淀是指血浆冷沉淀中含有凝血Ⅷ因子及纤维蛋白原，可治疗缺乏凝血Ⅷ因子及纤维蛋白原而出血不止的患者及甲型血友病患者。因此，保证冷沉淀的质量，提高冷沉淀活性，已成为患者的救命稻草，也是我们成分科工作的重点。

冷沉淀；凝血Ⅷ因子；采血时间；制备时间

冷沉淀即采用特定的方法，将保存期限内的新鲜冰冻血浆在1～6℃融化后，分离出大部分的血浆，并将剩余的冷不溶解物在1 h内速冻呈固态的成分血[1]。采集的全血在6～8 h，最迟不超过18 h，进行分离制备出来滤白新鲜冰冻血浆，再分离出冷沉淀。

1 制备方法

1.1 全血经过滤白去除99%的白细胞，配平放入离心机进行离心，离心力为4200 g，温度为4 ℃，10 min后，取出全血分离出上层血浆为滤白新鲜血浆。

1.2 将新鲜血浆放入-50 ℃以下的速冻机中速冻1 h，成为滤白新鲜冰冻血浆（FFP），然后放入-20 ℃以下冰箱中保存，有效期为1年。

1.3 从-20 ℃以下冰箱中轻轻取出滤白新鲜冰冻血浆分层平铺在（4± 2） ℃常温冰箱中隔夜融化，时间为12～15 h。

1.4 再次离心，离心力为2800 g，温度为4 ℃，时间为20 min，取出，使用血细胞分离机分离制备冷沉淀，留取20～30 mL血浆与冷沉淀混合物，留取10 mL样管。

1.5 冷沉淀速冻后存放入-20 ℃以下冰箱保存，有效期为1年。

2 待制备血浆方法

取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆（FFP）置室温中约5 min，待双联袋导管（连接管）变软后，将新鲜冰冻血浆袋置于2～6 ℃水浴箱中，另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋，两袋形成一定的高度落差。新鲜冰冻血浆融化时，上清血浆随时被虹吸入空袋中，冷沉淀遗留在新鲜冰冻血浆袋中[2]。在融化过程中控制水浴温度在2～6 ℃。待新鲜冰冻血浆融化至40～50 mL时，即为冷沉淀凝血因子。

以上两种方法制备好的冷沉淀需迅速放入速冻机中冷冻，于-20 ℃以下冰箱中保存，保存期不超过一年输注前于37 ℃水浴融化，并于4 h内输注。

3 冷沉淀

是临床常用的血液成分，其中，Ⅷ是一种非常不稳定的凝血因子，Ⅷ因子的含量受血液采集，制备，及速冻环节的影响。8 h之内制备的FFP比18 h制备的Ⅷ因子高一半。可见，制备时间严重影响冷沉淀的质量。400 mL全血制备的新鲜冰冻血浆所制备的冷沉淀中凝血因子活性应该≥80 IU，Fbg含量应≥150 mg，血细胞分离机制备的冷沉淀容量为20～30 mL，为血浆与冷沉淀不溶解物的混合物[3]。

4 冷沉淀

是指血浆冷沉淀中含有Ⅷ因子及纤维蛋白原，可治疗缺乏Ⅷ因子及纤维蛋白原而出血不止的患者及甲型血友病患者。融化后4 h输完，输速度不低于200 mL/h，以患者所能接受的最大速度进行输注。

5 注意事项

5.1 不需要交叉配血，只需按ABO血型相容原则输入。

5.2 输注前在37 ℃水浴箱中10 min内融化，以无冰晶为主，超过37 ℃可能血浆纤维蛋白原析出，血浆中将出现条索状不容物，影响血液质量，因此 ，融化过程中轻轻摇动，避免局部温度过高。

5.3 融化后的冷沉淀应在4 h内尽快输注，一经融化，冷沉淀不可再重新冻存。

6 影响因素

冷沉淀经历了全血，滤白全血，滤白新鲜血浆，滤白新鲜冰冻血浆，冷沉淀等诸多阶段，任何一个环节的误差，都会影响冷沉淀的质量。

6.1 6～8 h之内采的血及时进行分离制备，凝血Ⅷ因子的含量很高，超过8 h，制备时间拖得越长，Ⅷ因子含量就越低，临床止血效果就越差。甲型血友病患者俗称“玻璃人”，正常生活运动，稍有磕碰，就会血流不止，严重的将危及生命，原因是他们体内什么都不缺，唯独只缺凝血Ⅷ因子。输入了含有高活性Ⅷ因子的冷沉淀，血友病患者就可以和正常人一样工作，学习。但如果输入了低活性Ⅷ因子的冷沉淀，对他们来说就是致命的，不但经济压力大，止血效果还不明显[4]。凝血Ⅷ因子是血友病患者生命的曙光，是患者家属心中唯一的希望，是血站工作人员内心的职业操守，因此，采集、制备过程中有效地保证Ⅷ因子活性，是制备合格冷沉淀的精髓所在。

6.2 现对比一下8 h以内采集的全血与8 h以后采集全血制备的冷沉淀所含Ⅷ因子的量。2015年共对比126袋全血分离的冷沉淀，结果为：制备时间为6 h的时候凝血Ⅷ因子的含量为126 IU，制备8 h时凝血Ⅷ因子的含量为118 IU，制备10 h时凝血Ⅷ因子的含量为82 IU，制备14 h时凝血Ⅷ因子的含量为70 IU，制备16 h时凝血Ⅷ因子的含量为60IU，制备18 h时凝血Ⅷ因子的含量为55 IU。

6.3 采血时间要求：200 mL全血采集时间不超过3 min，400 mL全血采集时间不得超过6 min，如采血不畅，出现凝块及溶血等现象，均会影响全血中冷沉淀的凝血Ⅷ因子的含量。2015年2～10月份共对比66袋400 mL全血，采血时间＞6 min，每延长1 min，Ⅷ因子损失7%左右，最多损失接近30%。如采血6 min Ⅷ因子损失率为2%，采血7 min Ⅷ因子损失率为8%，采血8 min Ⅷ因子损失率为14%，采血9 min Ⅷ因子损失率为22%，采血10 min Ⅷ因子损失率为30%。

采血为所有血液制品的第一步骤，如果初始原料不合格，就很难保证冷沉淀的质量，因此，成分科用于制备冷沉淀的每一袋全血都是6 min以内采集的，绝对保证冷沉淀中Ⅷ因子含量。

7 结 论

近年来，由于成分输血的大力推广及凝血因子制品的缺乏，冷沉淀制品临床应用范围和用量近年来呈明显上升趋势，可见，影响冷沉淀Ⅷ因子活性的关键控制点为采血时间和制备时间。血站应制定标准操作规程对冷沉淀制备的各个环节进行控制，制备优质的冷沉淀制品[5]，满足临床用血需求，医院应根据患者需要掌握冷沉淀融化的最佳时间，融化后最短时间输注[6]，保证临床疗效。只有我们严格按照标准的操作规程工作，才能保证血液质量，更有效的为临床提供安全、高效的冷沉淀，使得患者得到最有效的治疗，不辜负无偿献血人士的爱心，这是我们共同的愿望，也是我们的责任。

[1] 《全血成分血质量要求》GB18469-2012[S].2012.

[2] 李静.成分输血的发展和优势[J].医药前沿,2015,5(32):63-64.

[3] 高峰.临床输血与检验[M].北京:人民卫生出版社,2015:139-140.

[4] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.全血及成分血质量要求[S].中华人民共和国国家标准GB18469-2001.

[5] 聂咏梅,廖剑锋,付涌水,等.不同保存温度对血浆部分凝血因子活性影响[J].实用医学杂志,2014,21(9):882.

[6] 安万新.输血技术学[M].北京:科学技术文献出版社,2013:181.

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1671-8194（2017）08-0296-02