陈冬亮 刘素梅
(江苏省如皋市高新技术产业开发区畜牧兽医站,江苏如皋 226557)
ELISA技术在畜产品安全检测中的应用
陈冬亮 刘素梅
(江苏省如皋市高新技术产业开发区畜牧兽医站,江苏如皋 226557)
ELISA技术及酶联免疫吸附试验技术,主要是使用固相载体吸附抗原,利用免疫酶在载体上进行染色,最后利用分光光度计或者肉眼来判定底物显色的结果,从而完成检测。随着社会经济的发展,人们的生活水平有了翻天覆地的变化,对食品质量的要求也越来越高,因此更加先进准确地对食品中的有害物质进行检测也显得尤为重要。目前,对畜产品安全检测的方法大多费时、费力,且费用昂贵,ELISA因其简单便捷、准确低廉的优点越来越受到有关机构的青睐,具有推广价值。
ELISA技术 畜产品 安全检测
ELISA技术是通过将抗体分子共价结合或者酶分子与抗体结合从而实现安全检测,通过这种结合防护抗体原有的免疫学特性不会受到影响,酶的生物学活性也不会受到干扰,因此,ELISA技术的特异性和敏感性较高,对可溶性抗原抗体系统的检测几乎不会出现疏漏。同时,ELISA技术的安全性高,不会产生过多的污染,在进行检测时可以减少有机溶剂的剂量,从而对工作人员和环境不会造成威胁。本文简单地介绍了ELISA技术在畜产品安全检测中的应用,希望借此促进ELISA技术的推广。
畜产品的药物残留是目前畜产品安全的一个重点问题,主要是因为在进行养殖时,为了防止牲畜生病,从而投放了部分药品,以致牲畜体内残留着未能代谢出体外的药物。如果残留的药物超过了规定的安全标准或者对牲畜使用了违禁药品,那么将会给消费者的生命安全带来严重的威胁。目前畜产品的药物残留主要包括激素类、抗生素、呋喃类、磺胺类、转基因类、喹诺酮类药品。随着科学技术的不断发展,ELISA技术不断得到改进和纠正,可以更加准确地对畜产品中的药物残留进行检测,因其灵敏度高、操作便捷、价格低廉等优点,是目前运用的最广泛的检验法方之一。ELISA技术在进行样品检测时,前期的准备工作相当简便,并且可以同时进行多个样品的检测,分析时间也较短,因此在进行大批量的检测工作时,具有高效安全的特性,而且其他检测中所要使用到的甲醇、乙腈等有机溶剂在ELISA检测中的用量大大降低,因此可以有效地减少对环境造成的污染。例如使用ELISA技术对猪肉、乳产品等进行检测时,检出限可以达到2.0μg/kg。
激素类药物对人体的损害非常大,对儿童、孕妇等特殊人群的损害更加严重,其中己烯雌酚是曾经被大量使用的激素药物,如今国际社会已经对此激素进行了严格的限制,目前我国水产行业标准已经将己烯雌酚的限量值规定在1μg/kg以内。采用ELISA技术进行己烯雌酚的检测时,检出限可以达到187.5ng/kg,符合国内外对己烯雌酚残留的检出规定,相比其他检测技术而言,灵敏度更高。
生物毒素主要是由于牲畜通过食物链等原因从而使其残留在体内的生物活性物质,不光会对生物本身造成一定的损害,同样会对人体造成损害。目前较为常见的生物毒素包括藻类毒素和真菌毒素。目前ELISA技术在生物毒素的检测中得到了迅速地发展,对于不同的毒素都有专门的ELISA试剂盒。
例如,黄曲霉素是生物毒素中较为严重的一种,且在牲畜体内出现的频率较高,如果长期食用会对人体造成严重的损害,甚至会又致癌作用。在1998年,我国便使用ELISA技术对饲料中的黄曲霉素B1进行检测,并将检出限定位0.01μg/kg,整个检测时间耗时2h左右,因此检测便捷高效,而且由于黄曲霉素B1的成功检测,对于黄曲霉素族中的其他毒素也有了相应的检测方法,成功地降低了生物毒素残留的可能性。
由于水源污染,同样会给畜产品安全造成威胁。由于农药对虫害病的有效性,因此农药被不断地开发,尤其是有机磷农药被大量运用,从而使土壤、食物和水源中混入了大量的农药残留,不光对环境造成污染,而且对人类的生命安全造成了严重威胁。我国目前在对污染物进行监测时依然优先对敌百虫、硫磷等农药进行监测。ELISA技术在对农药残留进行检测时同样具有方便快捷的特点,对杀虫剂、除草剂、除菌剂等农药的检测具有较高的灵敏度。
在农业种植中,除草剂和杀虫剂是使用率较高的农药,为我国农产品的丰收带来了帮助,但是如果使用不当,同样会造成大量的农药残留,给消费者带来一定的隐患。ELISA技术目前在对农药残留的检测范围也在不断扩大,例如目前我国通过对杀虫脒特异性抗体的研究和制备,从而建立起相应的ELISA检测法,从而有效地对杀虫脒残留情况进行检测。
目前食品安全的一个主要影响因素就是微生物,所以畜产品同样面临着微生物污染的可能性。对畜产品进行微生物检测主要是对产品中带有的致病菌和一般污染进行监测。常规的检测方法需要较长的时间进行微生物的分离培养和试验,而ELISA技术则大大缩短了检测时间。
例如在鱼虾贝类的养殖业中,由于环境的污染,沙门氏菌污染的情况比较严重。而利用ELISA技术,对沙门氏菌进行监测,可以在不与其他肠道杆菌发生交叉反应的情况下,检出99个菌株。对各种畜产品进行监测时,ELISA技术的检测结果也不会受到产品本身成分的影响,并且2-3天就可以得到检测结果。
另外还有一些病菌,例如大肠埃希菌在一定条件下会呈现出无法培养的状态,但是通过环境的改变仍有可能复苏,造成对人体的损害,因此需要寻找更加准确合适的方法进行监测。而根据相关研究表明,免疫学技术对于这类病菌的检测具有优势,ELISA技术的发展正是为该种病菌的检测提供了条件,具有很好的发展潜力。
转基因产品近些年的发展非常迅速,但是转基因产品本身是将真菌、病毒、细菌等物质植入到动植物体内,从而使植物发生基因重组。目前对于转基因的安全性并无定论,因此许多国家都对转基因产品有严格的规定,我国也不例外。目前我国对于转基因产品的检测同样可以利用ELISA技术,能够快速进行检测和筛选工作。例如对于转基因鱼的检测时,利用地高辛标记的PCRELISA技术,可以快速检测转基因鱼所带有的另外两种外源基因。该项技术将ELISA量化检测技术、核酸杂交鉴定和PCR技术进行了有机结合,从而保持了PCR检测的优点,同时增加了ELISA的灵敏性,使检测的时间大大缩短,从而有效地对转基因产品进行高效的检测。
ELISA技术虽然起步较晚,但是发展十分迅速,被广泛运用于各个领域的检测,从而使越来越多的ELISA商业试剂盒被生产出来。目前我国在畜产品的ELISA检测中,仍然没有形成统一的规定,检测方法没有形成完整的体系,从而使ELISA技术的优点没有很好地显露出来。ELISA技术简单快捷、准确高效,因此在畜产品的安全检测中拥有很大的发展空间,对于某一种畜产品的检测,要继续推进样品的纯化率,并且对稳定性和重现性进一步提高,有效地降低检测的成本,从而更好突破ELISA技术自身的局限性。
ELISA技术相比传统的检测技术在畜产品安全检测中具有快捷简便、高效准确、价格低廉等优点,具有很好的发展前景,因此值得进一步大力推广,提升检测效率和质量。
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