奶牛乳头药浴涂膜剂的研制及临床应用效果试验

2017-01-10 10:17周庆民冯万宇徐馨张艳黄健
黑龙江八一农垦大学学报 2016年6期
关键词:药浴体细胞涂膜

周庆民,冯万宇,徐馨,张艳,黄健

(黑龙江省兽医科学研究所,齐齐哈尔 161006)

奶牛乳头药浴涂膜剂的研制及临床应用效果试验

周庆民,冯万宇,徐馨,张艳,黄健

(黑龙江省兽医科学研究所,齐齐哈尔 161006)

研制奶牛乳头药浴涂膜剂,并对其进行临床应用效果试验。采用SCC法和CMT法对空白对照组、4%次氯酸钠组、0.5%洗必泰组、1%碘伏组和奶牛乳头药浴涂膜剂组5组进行牛乳中体细胞数测定,对施药后乳汁中主要成分(包括乳蛋白、乳脂、乳糖、乳汁比重)和泌乳量的变化差异进行对比。结果表明:奶牛乳头药浴涂膜剂降低体细胞数效果最为明显,且营养物质均高于其他治疗组;90 d时各组对奶牛隐性乳房炎的治愈率分别为25.00%、48.00%、65.52%、63.33%、86.67%;对奶牛乳房炎的预防效果显示:对照组、洗必泰药浴组和乳头药浴涂膜剂药浴组的奶牛乳房炎发病率分别为69.49%、32.20%和8.47%,乳头药浴涂膜剂药浴组预防率显著高于其他各组(P<0.01)。表明在奶牛生产中使用乳头药浴涂膜剂防治奶牛乳房炎,可显著降低其发病率,显著提高其治愈率。

乳头药浴涂膜剂;奶牛乳房炎;乳质;体细胞数;泌乳量;治疗;预防

奶牛乳房炎发病原因复杂,治疗困难且治愈率低,导致奶牛产奶量大幅降低,治疗费用和养殖成本却显著增加,还可能出现病原菌污染奶和抗生素治疗奶,引起食品安全问题[1-2]。因此,对奶牛乳房炎应以防治相结合的方式进行控制。目前最主要的预防方法是乳头药浴,这是预防乳房炎最直接、最简单、最有效和最经济的方法。生产中常用的药浴消毒剂均为水溶液型[3-5],其杀菌力维持时间短,有的对乳头皮肤有刺激作用或腐蚀作用,引起乳头皮肤皲裂,寒冷天气还容易结冰而冻伤乳头等不足。为此,黑龙江省兽医科学研究所牛病研究室研制了一种新型的奶牛乳头药浴消毒剂——奶牛乳头药浴涂膜剂[6]。

为了验证其临床应用效果,对奶牛乳头药浴涂膜剂与其他常用药物同步进行体细胞数测定、乳汁中主要成分和泌乳量含量测定,并对比其治疗和预防效果差异,为临床应用提供实验依据和理论基础,对其对奶品质、产奶量影响,及预防奶牛乳房炎的临床应用效果做出科学客观评价。

1 材料和方法

1.1 主要试剂和试剂盒

聚乙烯醇、聚维酮碘、甘油、次氯酸钠、洗必泰、碘伏均为分析纯;乳成分检测液、甘油三酯试剂盒、总蛋白测定试剂盒、葡萄糖测定试剂盒、奶牛体细胞检测试剂盒。

1.2 试验动物

患有隐性乳房炎的中国荷斯坦奶牛60头:选自齐齐哈尔市某规模化奶牛场泌乳牛群。3~6岁、产犊2~5个月的中国荷斯坦奶牛177头:选自齐齐哈尔市富裕县某大型奶牛场。

1.3 方法

1.3.1 奶牛乳头药浴涂膜剂的研制[7]

成膜基质制备:取125 g PVA加入1 000 mL纯化水中浸泡12 h使其充分溶胀,将其转入3 000 mL三角瓶中,再加入1 000 mL纯化水,加热4 h使其溶解成胶浆液。补足纯化水至2 000 mL,继续加热2 h,密封,阴凉处静置至室温。

药物有效成分预处理:用200 mL纯化水溶解PVP-I 25 g。

药物有效成分溶合:将200 mL PVP-I溶液缓慢匀速倒入PVA溶液中,用150 mL纯化水分三次溶洗盛放PVP-I溶液的烧杯,每次溶洗后都将溶液缓慢匀速倒入PVA溶液中100 r·min-1的速度搅拌2 h,以确保两者充分混合。

增塑剂添加:取125 mL甘油缓慢匀速加入磁力搅拌器上的PVA溶液中,再以150 mL纯化水分三次溶洗盛放甘油的烧杯,每次溶洗后都将溶液缓慢匀速倒入PVA溶液中,使三者充分搅匀即得。

1.3.2 对奶品质及产奶量影响效果试验

试验动物分组与给药:将60头检测为隐性乳房炎阳性的中国荷斯坦奶牛,依据年龄、胎次、泌乳量和泌乳期相近的原则随机分为5组,每组12头。试验I组为空白对照组,挤奶前用温水擦洗乳区,不使用消毒剂;Ⅱ组在挤奶前用温水擦洗乳区,挤奶后用4%次氯酸钠浸泡乳头;ⅡI组在挤奶前用温水擦洗乳区,挤奶后使用0.5%洗必泰浸泡乳头;IV组在挤奶前用温水擦洗乳区,挤奶后用1%碘伏浸泡乳头;Ⅴ组在挤奶前用温水擦洗乳房,挤奶后用奶牛乳头药浴涂膜剂浸泡乳头,试验期90 d。在0、30、60、90 d采用SCC法和CMT法检测牛乳中体细胞数,乳汁主要成分(包括乳蛋白、乳脂、乳糖、乳汁比重和乳汁酸度)的变化,同时记录各组奶牛的日泌乳量。

数据处理:试验数据采用SPSS软件进行单因素方差分析,结果以“平均数±标准差”表示。

1.3.3 对奶牛隐性乳房炎的治疗效果试验

试验方法同1.3.2,并在试验第0、30、60、90 d各进行隐性乳房炎检测。根据乳汁体细胞计数结合CMT检测结果对药物的药效做出判定,分为治愈、有效和无效,试验期隐性乳房炎病例具有明显的临床症状则判定转为临床性乳房炎。记录发病乳区数、治愈乳区数、有效乳区数和无效乳区数,并计算有效率(%)和治愈率(%)。

1.3.4 对奶牛乳房炎的预防效果试验

在奶牛所处饲养环境、人员管理、挤奶等条件一致下,将试验奶牛进行分组,随机平均分成三组,每组奶牛59头。A为对照组,挤奶前后不使用任何消毒杀菌药物,只在挤奶前后用温水擦洗乳房及奶头即可;B组在挤奶前使用温水擦洗乳房及奶头,并在挤奶前后用0.3%~0.5%洗必泰溶液对乳头进行药浴处理;C组也用温水擦拭乳房及乳头,并在挤奶后用奶牛乳头药涂膜剂浸泡奶头。试验周期为50 d,每天都要对试验奶牛乳房进行观察,每隔3 d对试验组的牛乳进行凝乳检测,进而查看试验组奶牛乳房炎的发病情况,并对奶牛乳头药浴涂膜剂预防奶牛乳房炎的效果进行分析评定。

2 结果与分析

2.1 对奶品质及产奶量影响效果试验结果

2.1.1 对乳汁中体细胞数的影响试验

由表1可见,试验Ⅰ组与试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组相比,乳汁中体细胞数较多,随着时间延长,体细胞数整体呈现上升趋势,但经药物处理的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组体细胞数均显著低于I组。经药物处理的各试验组,在试验30、60、90 d,随着时间的增加,体细胞数逐渐降低,特别是试验Ⅳ、Ⅴ组差异较显著。上述结果表明,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组乳汁体细胞数均发生降低,但以试验Ⅲ、Ⅴ组最为明显,尤以Ⅴ组降低体细胞数最多。说明五组中奶牛乳头药浴涂膜剂降低体细胞数效果最为明显,最能降低患乳受感染程度,最能抵制日产奶量下降,降低了奶损失量,且延长了乳制品的货架期。同时,奶牛乳头药浴涂膜剂也最能抵抗酪蛋白质含量的下降,保证奶质[7-8]。

2.1.2 对乳成分的影响试验乳蛋白含量变化试验结果见表2,乳脂含量变化试验结果见表3,乳糖含量变化试验结果见表4,乳汁比重变化试验结果见表5。

表1 各组奶牛乳汁体细胞数变化Table 1 Changes of dairy cattle milk somatic cell numbers in each group

表2 乳蛋白含量变化试验结果Table 2 Test results of lactoprotein content change

表3 乳脂含量变化试验结果Table 3 Test results of butterfat content change

表4 乳糖含量变化试验结果Table 4 Test results of lactose content change

表5 乳汁比重变化试验结果Table 5 Test results of milk proportion change

由表2、3、4、5可见,试验30 d时,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组与试验Ⅰ组相比,乳蛋白、乳脂、乳糖、乳比重差异均不显著(P<0.05),而至试验60 d、90 d时,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组与试验Ⅰ组相比,乳蛋白、乳脂、乳糖、乳比重均有一定上升,差异显著(P<0.05),其中试验Ⅴ组与试验Ⅰ组相比差异极显著(P<0.01)试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各组之间,差异不显著。在整个试验期内,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组同试验Ⅰ组相比,奶牛乳汁中乳脂、乳蛋白、乳糖及比重均有一定的提高,差异显著或极显著,并以试验Ⅴ组提高最为显著。乳蛋白、乳脂、乳糖是牛乳中主要的营养物质,奶牛乳头药浴涂膜剂组此三种主要营养物质高于其他治疗组,说明奶牛乳头药浴涂膜剂最能够保持营养物质含量,保证了有效期内乳制品的风味口感[9]。

2.1.3 对泌乳量的影响试验对泌乳量的影响试验结果见表6。

表6 泌乳量影响试验结果Table 6 Test result of lactation quantity affect

由表6可知,试验30 d时,各试验组奶牛的日泌乳量与试验0 d比无明显变化,但略高于试验前;试验90 d时,试验Ⅰ组产奶量提高11.11%、试验Ⅱ组产奶量提高7.95%、试验Ⅲ组产奶量提高10.13%、试验Ⅳ组产奶量提高11.57%、试验Ⅴ组产奶量提高14.84%,乳头药浴涂膜剂组比对对照组提高3.73%,表明奶牛乳头药浴涂膜剂可显著地提高隐性乳房炎奶牛的泌乳量。

2.2 对奶牛隐性乳房炎的治疗效果试验

对奶牛隐性乳房炎的治疗效果试验结果见表7。

表7 治疗效果试验结果Table 7 Test results of treatment effect

由表7可见,各用药组在用药后有很好的疗效,试验Ⅴ组在用药后有效率和治愈率分别为96.67%和86.67%,其效果明显优于其他各试验组。结果表明:奶牛乳头药浴涂膜剂对奶牛隐性乳房炎具有良好的预防效果。

2.3 对奶牛乳房炎的预防效果试验对奶牛乳房炎的预防效果试验结果见表8。

表8 预防效果试验结果Table 8 Test results of prevention effect

由表8可知,对照组奶牛乳房炎发病率为69.49%,洗必泰药浴组奶牛乳房炎发病率为32.20%,乳头药浴涂膜剂药浴组奶牛乳房炎发病率为8.47%,乳头药浴涂膜剂药浴组奶牛乳房炎发病率比对照组降低61.01%,比洗必泰药浴组降低23.73%,奶牛乳头药浴涂膜剂应用效果理想。

3 讨论

试验应用乳头药浴涂膜剂防治奶牛隐性乳房炎,对降低乳汁中体细胞数效果明显。由试验可看出,试验90 d后,奶牛乳头药浴涂膜剂将隐性乳房炎奶牛乳区体细胞数从1.40±0.09×106个·mL-1下降至0.55±0.06×106个·mL-1,效果明显优于其他试验各组。乳头药浴涂膜剂防治隐性乳房炎的作用优于其他药物,是因为奶牛乳头浸蘸药物后在其表面既形成了一种维持时间长,作用持久的膜性物理防御屏障,同时其主要成分聚维酮碘也是一种优良的皮肤消毒药物,对病原微生物消杀效果好且极少产生毒副作用,同时对环境也几乎没有污染。五组中奶牛乳头药浴涂膜剂降低体细胞数效果最为明显,最能降低患乳受感染程度,最能抵制日产奶量下降,降低了奶损失量,且延长了乳制品的货架期。同时,奶牛乳头药浴涂膜剂也最能抵抗酪蛋白质含量的下降,保证奶质。

同其他各组相比,乳头药浴涂膜剂治疗隐性乳房炎效果确实,而且提高了隐性乳房炎阳性奶牛泌乳量。患隐性乳房炎乳区泌乳量可降低10%以上,乳汁中体细胞数与泌乳量呈负相关。有文献报道奶牛日均泌乳量与隐性乳房炎发病程度呈极显著负相关。试验证明乳头药浴涂膜剂可以提高患隐性乳房炎奶牛泌乳量,试验0 d的泌乳量为17.79±2.38 kg·d-1,而至试验90 d时已达到20.43±2.26 kg·d-1,产奶量提高14.84%,对照组产奶量提高11.11%、乳头药浴涂膜剂组比对对照组提高3.73%,表明奶牛乳头药浴涂膜剂可显著地提高隐性乳房炎奶牛的泌乳量。

乳蛋白、乳脂、乳糖是牛乳中主要的营养物质,患隐性乳房炎奶牛乳汁的乳糖、乳脂含量会有所降低,乳糖及乳脂降低与乳汁体细胞数呈负相关。隐性乳房炎虽然可使乳汁总蛋白(主要是酪蛋白)数升高,但却使乳汁中人体必需氮基酸等含量降低,试验结果证实乳头药浴涂膜剂除对奶牛隐性乳房炎有显著疗效,同时改善乳汁质量,提高乳脂、乳糖量,使乳蛋白质恢复正常。五组中奶牛乳头药浴涂膜剂最能够保持营养物质含量,保证了有效期内乳制品的风味口感。

整个试验期内,次氯酸钠、洗必泰、碘伏和奶牛乳头药浴涂膜剂均显著降低了隐性乳房炎病牛体细胞数,但以乳头药浴涂膜剂效果最为明显。在进行奶牛隐性乳房炎临床治疗试验时,奶牛乳头药浴涂膜剂对隐性乳房炎的治愈率和有效率分别为77.78%、88.89%,远高于其他各组。而用于预防奶牛隐性乳房炎时,奶牛乳头药浴涂膜剂药浴组乳房炎发病率比对照组降低61.01%,比洗必泰药浴组降低23.73%,差异极显著(P<0.05),奶牛乳头药浴涂膜剂对隐性乳房炎的预防效果最为显著。

4 结论

对奶品质及产奶量影响效果试验结果表明:奶牛乳头药浴涂膜剂降低体细胞数效果最为明显,最能降低患乳受感染程度,最能抵制日产奶量下降,也最能抵抗酪蛋白质含量的下降,保证奶质;且奶牛乳头药浴涂膜剂组三种主要营养物质均高于其他治疗组,说明奶牛乳头药浴涂膜剂最能够保持营养物质含量,保证了有效期内乳制品的风味口感;且奶牛乳头药浴涂膜剂可显著地提高隐性乳房炎奶牛的泌乳量。

对奶牛隐性乳房炎的治疗效果试验结果表明:90 d时各组对奶牛隐性乳房炎的治愈率分别为25.00%、48.00%、65.52%、63.33%、86.67%,有效率分别为42.86%、72.00%、82.76%、73.33%、96.67%。其中奶牛乳头药浴涂膜剂的治疗效果明显优于其他各试验组。

对奶牛乳房炎的预防效果试验结果表明:对照组、洗必泰药浴组和乳头药浴涂膜剂药浴组的奶牛乳房炎发病率分别为69.49%、32.20%和8.47%,乳头药浴涂膜剂药浴组奶牛乳房炎发病率比对照组降低61.01%,比洗必泰药浴组降低23.73%,将健康奶牛隐性乳房炎发病率控制在8.47%,显著低于其他各组(P<0.01)。结论:在奶牛生产中使用乳头药浴涂膜剂防治奶牛乳房炎,可显著降低其发病率,显著提高其治愈率。

奶牛乳头药浴涂膜剂是将消毒杀菌、成膜和护肤技术相结合,研制的一种新型奶牛乳头药浴消毒剂,具有三大功能,既可杀灭乳头皮肤上的细菌,又可成膜封住乳头防止病原菌的侵入,同时润肤,代替了传统的乳头药浴药物,改变了传统、单一药浴作用,使乳头药浴功能扩大化。同时对乳头皮肤起到保健护理和防止皲裂作用,从而对乳房进行全面的保护,有效地预防奶牛乳房炎的发生,提升了奶牛乳房炎防治水平。与其他传统技术相比,此项技术更简单、确实,作用时间更长,效果更好。

我省奶牛数量较多,乳头药浴已经纳入奶牛挤奶技术操作规程,是奶牛生产过程中的一个主要环节,奶牛挤奶后必须进行乳头药浴,乳头药浴药物使用范围和市场需求量相当大。奶牛乳头药浴涂膜剂的作用是多方面的,其使用效果大大高于目前市场上常用的药浴药物,显示出绝对优势,在奶牛生产中广泛使用乳头药浴涂膜剂防治奶牛乳房炎,可显著降低其发病率,显著提高其治愈率。

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Development and Clinical Application Experiment of Medicated Plastics Film-former for Dairy Cattle Nipples

Zhou Qingmin,Feng Wanyu,Xu Xin,Zhang Yan,Huang Jian
(Heilongjiang Institute of Veterinary Science,Qiqihar 161006)

The medicated plastics for cattle nipples and its clinical application experiment was studied.The somatic numbers in milk were determined for groups of control,4%chlorinated soda,0.5%chlorhexidine,1%Iodophors,and medicated plastics for cattle nipples by SCC and CMT methods.The changes of lactating amount and main components including lactoprotein,butterfat,lactose,and specific density of milk were compared after drug delivery.The results showed that the decrease of lactating amount was remarkable using medicated plastics for cow nipples and the main nutrient substances were higher than the other treatment group.The cure rate of recessive character garget under different groups were 25.00%,48.00%,65.52%,63.33%,and 86.67%respectively in 90 days.The disease incidence of garget in control group,chlorhexidine,medicated plastics for cow nipples was 69.49%,32.20%and 8.47%respectively.The prevention rate of the group of medicated plastics for cow nipples was significantly higher than other group(P<0.01).The results indicated that the medicated plastics for cow nipples could cut down the disease incidence significantly at accouchement,and could increase cure rate predominately.

medicated plastics for cow nipples;garget;galact quality;somatic number;lactating amount;cure;prevention

S854.5

A

1002-2090(2016)06-0059-06

10.3969/j.issn.1002-2090.2016.06.012

2015-07-16

黑龙江省科技厅课题(GC12B302)。

周庆民(1964-),男,研究员,东北农业大学毕业,现主要从事临床诊疗与新兽药开发方面的研究工作。

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