枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液的配伍稳定性考察

洪振贤，林淑瑜，陈志民，王佳坤，甘惠贞

枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液的配伍稳定性考察

洪振贤，林淑瑜，陈志民，王佳坤，甘惠贞*

目的 考察枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液在0.9%氯化钠注射液中的稳定性。方法 采用高效液相色谱法测定枸橼酸芬太尼注射液、咪达唑仑注射液与0.9%氯化钠注射液配伍后的含量变化，同时观察配伍溶液的外观、pH值变化。结果 枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液配伍溶液在室温条件下24 h内外观、pH值未见明显变化，芬太尼注射液和咪达唑仑含量均>98%。结论 枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液在0.9%氯化钠注射液中配伍后于室温放置24 h内性质基本稳定。

枸橼酸芬太尼；咪达唑仑；配伍稳定性；HPLC

0 引言

1 仪器和试药

Ultimate3000高效液相色谱仪(戴安中国有限公司)；JA2003电子分析天平(上海方瑞仪器有限公司)；PHS-3C型实验室pH计(上海诚宁环保科技有限公司)；注射器；移液枪；枸橼酸芬太尼标准品(中国药品生物制品检定所，批号：171268-201001，HPLC纯度≥98%)；咪达唑仑标准品(中国药品生物制品检定所，批号：171270-201402，HPLC纯度≥98%)；枸橼酸芬太尼注射液(湖北宜昌人福药业有限公司，规格：10 mL∶0.5 mg，批号分别为1141006、2130109、1140704)；咪达唑仑注射液(江苏恩华药业有限公司，规格：2 mL∶10 mg，批号分别为20150112、20150401、20150719)；0.9%氯化钠注射液(四川太平洋药业有限公司，规格：100 mL，批号：B1511024 2)；乙腈(美国进口Fisher，色谱醇)、磷酸二氢钾(美国进口MREDA，色谱醇)、磷酸(美国进口MREDA，色谱醇)、三乙胺(美国进口MREDA，色谱醇)；水为超纯化水(本院消毒供应室提供)。

2 方法与结果

2.1 溶液的配制 ①对照品溶液的制备：取4 mg枸橼酸芬太尼标准品，60 mg咪达唑仑标准品，分别置于10 mL容量瓶，加流动相稀释至刻度，避光、室温下保存。②配伍溶液的制备：模拟临床ICU机械通气患者镇静给药方案，取1支枸橼酸芬太尼注射液，5支咪达唑仑注射液，共同置于50 mL容量瓶，加0.9%氯化钠注射液稀释至刻度，避光、室温下保存。③稀释溶液的制备：取10 mL配伍溶液，置于50 mL容量瓶，加流动相稀释至刻度，避光、室温下保存。

2.2 色谱条件和系统适应性试验 色谱柱：Acclaim C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液(三乙胺调pH值至3.50)-乙腈(60∶40)；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：205 nm；进样量：10 μL。在此色谱条件下，芬太尼与咪达唑仑完全分离，色谱峰峰形良好，保留时间分别约为5.780、6.910 min，阴性对照品溶液对测定无干扰，见图1。

图1 芬太尼与咪达唑仑的高效液相色谱图

2.3 标准曲线的制备 精密量取上述枸橼酸芬太尼对照品溶液1 mL，置10 mL容量瓶，加流动相稀释至刻度。再分别精密吸取一定量，稀释制成浓度分别为40、30、20、10、5、2.5 μg/mL的溶液。在“2.2”项色谱条件下，分别进样10 μL。以浓度(C)为横坐标、峰面积(A)为纵坐标，进行线性回归，得标准曲线方程A=0.665 6 C-0.219 2，r=0.999 9。结果表明，芬太尼在2.5～40 μg/mL浓度范围内与其峰面积有良好的线性关系；精密量取咪达唑仑对照品溶液1 mL，置10 mL容量瓶，加流动相稀释至刻度。再分别精密吸取一定量，稀释制成浓度分别为600、400、200、100、50、20、10 μg/mL的溶液。在“2.2”项色谱条件下，分别进样10 μL。以浓度(C)为横坐标、峰面积(A)为纵坐标，进行线性回归，得标准曲线方程A= 0.839 3 C-6.394 6，r=0.999 6。结果表明，咪达唑仑在10～600 μg/mL浓度范围内与其峰面积有良好的线性关系。

2.4 重复性试验 取同一批样品，按“2.1”项配伍溶液配制方法平行制备6份，分别稀释成高、中、低3种不同浓度，进样，计算峰面积，得芬太尼的重复性RSD分别为0.30%、0.15%、0.34%；咪达唑仑的重复性RSD分别为0.20%、0.15%、0.26%，结果表明重复性良好。

2.5 精密度试验 分别制备高、中、低3种不同浓度的枸橼酸芬太尼对照品溶液(30、20、5 μg/mL)和咪达唑仑对照品溶液(300、200、20 μg/mL)各6份，同日测定并连续测定6 d，计算峰面积，得芬太尼的日内精密度RSD分别为0.05%、0.05%、0.15%，日间精密度RSD分别为0.16%、0.12%、0.16%；咪达唑仑的日内精密度RSD分别为0.09%、0.15%、0.28%，日间精密度RSD分别为0.19%、0.20%、0.45%。结果表明精密度良好。

2.6 加样回收率试验 精密量取已知含量的配伍溶液9份各1 mL，置于5 mL的容量瓶中，分别加入已知浓度的枸橼酸芬太尼对照品溶液和咪达唑仑对照品溶液0.8、1、1.2 mL，每个浓度平行3份，加流动相稀释至刻度，摇匀，取10 μL进样，计算回收率和RSD，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果(n=9)

注：F.芬太尼;M.咪达唑仑

2.7 稳定性试验 精密量取一定量的高、中、低3种不同浓度的枸橼酸芬太尼对照品溶液(30、20、5 μg/mL)和咪达唑仑对照品溶液(300、200、20 μg/mL)，分别在0、4、8、12、16、24 h进样分析，以0 h的含量为100.00%，换算百分含量，得枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液的百分含量均在99.82%～100.18%范围内。结果表明，对照品溶液室温条件下放置24 h稳定性良好。

2.8 配伍稳定性试验

2.8.1 外观与pH值变化 精密量取一定量的“2.1”项配伍溶液，分别在0、4、8、12、16、24 h采用0.9%氯化钠注射液作对照，观察是否有颜色变化、气体、沉淀、浑浊产生，并采用pH计测定配伍溶液pH值变化，结果见表2。

表2 枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液配伍液稳定性结果(n=6)

注：“—”表示无色澄清、无气体沉淀产生、无明显变化

2.8.2 相对百分含量变化 精密量取一定量的“2.1”项配伍溶液，分别在0、4、8、12、16、24 h进样分析，以0 h的含量为100.00%，换算百分含量，得各个时间点相对百分含量，结果见表2。

3 讨论

3.1 咪达唑仑与芬太尼同时测定的方法学探索

3.1.1 检测波长的选择 参考有关文献[8-9]，分别选择195、200、205、210、220 nm作为检测波长，对芬太尼和咪达唑仑进行HPLC图谱的直观比较。结果表明，195、210 nm检测波长下，所得图谱特征峰分离度差，含量低，磷酸盐缓冲溶液在210 nm附近也有较强吸收，形成一定的干扰峰，使得本底值提高，灵敏度降低，影响测定；芬太尼的最大吸收波长为200、205 nm，咪达唑仑的最大吸收波长为220 nm，由于临床配伍用药中芬太尼的用量(10 μg/mL)明显低于咪达唑仑的用量(1 mg/mL)，同时在200、205 nm检测波长下，咪达唑仑也可获得较大吸收，但在200 nm检测波长下基线不易平稳，故选择205 nm作为检测波长，能兼顾两种物质的检测灵敏度，达到良好分离检测的目的。

3.1.2 流动相的选择 2015年版《中国药典》(二部)枸橼酸芬太尼注射液的含量测定采用高效液相色谱法[10]，该法所选用的流动相为含0.1%无水硫酸钠与0.2%醋酸铵的溶液-甲醇-乙腈(4∶3∶1)(用冰醋酸调节pH值至6.3±0.1)；咪达唑仑注射液的含量测定项下流动相为磷酸盐缓冲溶液(取同体积0.1 mol/L磷酸溶液与0.03 mol/L三乙胺溶液混合，用0.1 mol/L氢氧化钠溶液调节混合液的pH值至3.5)-甲醇(35∶65)，配制均较为复杂。结合参考有关文献[10-13]，本实验采用0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈为流动相，通过调整比例为(60∶40)，得到分离度良好、出峰时间适宜的色谱图。

3.2 配伍稳定性试验结果分析 参考临床ICU机械通气患者镇静给药方案[16-17]，“2.1”项配伍溶液体积为50 mL；两药品说明书标注的通用溶媒为0.9%氯化钠注射液。2015年版《中国药典》(二部)附录规定[10]，对标示装量100 mL或100 mL以上的静脉用注射液进行微粒控制，而对标示装量100 mL以下的静脉用注射液、静脉注射用无菌粉末、注射用浓溶液及供注射用无菌原料药未做要求。结合参考文献[18]，本实验不探讨不溶性微粒变化。

配伍稳定性试验结果显示，枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液在0.9%氯化钠注射液中配伍后，于室温放置24 h内，配伍溶液外观澄清，溶液颜色无明显变化，无气体、沉淀、浑浊产生，pH值无明显变化，说明两药配伍后，未发生明显物理化学变化。同时经高效液相色谱法测定，色谱图未见其他吸收峰，最大吸收峰位均未移动，枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液的含量均>98%，均符合2015年版《中国药典》(二部)相关规定。

综上所述，枸橼酸芬太尼注射液和咪达唑仑注射液在0.9%氯化钠注射液中配伍后于室温放置24 h内性质基本稳定，表明临床上可将两药配伍使用。

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Compatible stability of fentanyl citrate injection with midazolam injection in 0.9% sodium chloride injection

HONG Zhen-xian,LIN Shu-yu,CHEN Zhi-min,WANG Jia-kun,GAN Hui-zhen*

(Department of Pharmacy,180th Hospital of PLA,Quanzhou 362000,China)

Objective To study the compatible stability of fentanyl citrate injection with midazolam injection in 0.9% sodium chloride injection.Methods The changes in the contents of fentanyl citrate injection and midazolam injection were determined simultaneously by HPLC,and the changes in appearance and pH value were observed at the same time.Results No significant difference was found in terms of the appearance and pH value of the mixture solution within 24 h,the content of fentanyl and midazolam were both more than 98%.Conclusion The mixture of fentanyl citrate injection with midazolam injection in 0.9% sodium chloride injection is stable within 24 h after mixing.

Fentanyl citrate;Midazolam;Compatible stability;HPLC

2016-05-31

解放军第180医院药学科，福建 泉州 362000

解放军第180医院科研项目(2014D3011)

10.14053/j.cnki.ppcr.201612022

*通信作者