Fonsecaeamonophora致着色芽生菌病1例

向耘 纪青 蔡宏为 马玲玲

(珠海市第二人民医院皮肤性病科，珠海 519000)



·病例报告·

Fonsecaeamonophora致着色芽生菌病1例

向耘 纪青 蔡宏为 马玲玲

(珠海市第二人民医院皮肤性病科，珠海 519000)

报道1例由Fonsecaeamonophora所致的着色芽生菌病。患者男，72岁，因右肩部斑块20余年就诊，取皮损痂皮进行真菌镜检及培养，皮损组织做病理学检查，并对分离的菌株进行形态学和分子生物学鉴定。真菌直接镜检及组织病理HE染色均可见厚壁、棕色的硬壳小体。真菌培养可见黑褐色，绒毛状菌落生长。小培养可见枝孢型和喙枝孢型产孢，分生孢子单细胞性。ITS 区序列分析鉴定为Fonsecaeamonophora。给予特比萘芬250 mg/d口服治疗，7个月后皮损痊愈。

Fonsecaeamonophora；着色芽生菌病；菌种鉴定

[Chin J Mycol，2016，11(2):119-121]

着色芽生菌病是由一组暗色孢科真菌引起的皮肤及皮下组织感染的慢性肉芽肿性疾病。现报告1例由Fonsecaeamonophora引起的着色芽生菌病。

1 临床资料

患者男，72岁，广东珠海人，曾在农场务工，因“右肩部斑块20余年”于2014年7月来我科就诊。20余年前患者右肩部皮肤被金属防盗网刮伤，局部碘伏消毒，未做其他特殊处理，后遗留约1 cm×3 cm线状红色瘢痕状斑块，其后皮损生长缓慢。2a前肩部皮疹迅速扩大，伴瘙痒，在外院多次按皮炎、湿疹口服抗组胺药，外用“卤米松、糠酸莫米松”等激素软膏治疗，瘙痒可缓解，但皮疹仍扩大，后按瘢痕疙瘩予局部注射“复方倍他米松”、冷冻等治疗，皮疹仍无缓解。5个月前在原皮疹周围陆续出现散在红斑，无瘙痒、疼痛。既往史：12 a前脑梗后右侧肢体偏瘫，现右下肢活动迟缓；高血压病史10 a，现规律服药，血压控制可。

体格检查：右侧肢体活动较迟缓，肌力正常，余系统体查无明显异常。专科查体：右侧肩部有一约12 cm×6 cm大红色斑块，皮肤萎缩变薄，表面附有少量鳞屑、痂皮，周围毛细血管扩张明显，其上散在零星浅表溃疡，分泌物较少。周围有5个 (0.3～0.5) cm×(1～2) cm红斑，境界清，见图1。右肩部、上肢感觉无明显异常，周围未触及肿大神经。

1.1 直接镜检

取斑块边缘及表面痂皮直接镜检：细胞内可见棕色，厚壁，圆形的硬壳小体，中央有清晰的分隔，散在或聚集成群，部分周围还可见棕色透明菌丝，见图2。

1.2 真菌培养

取皮损区痂皮及组织，接种于不含放线菌酮的沙氏培养基 (SDA)，27℃,10 d后可见直径约0.5 cm黑褐色菌落生成，2周后最大菌落增至3 cm，绒毛状，表面有灰色短而密集的气生菌丝，背面呈黑色，见图3。

1.3 皮肤组织病理

表皮不规则增生，表皮及真皮浅层可见中性粒细胞微脓肿，真皮浅层可见大量泡沫状组织细胞、淋巴细胞、浆细胞及多核巨细胞，多核巨细胞内可见褐色的硬壳小体，神经周围未见明显炎细胞浸润，见图4。

1.4 真菌小培养

显微镜下可见棕色，分隔菌丝，枝孢型、喙枝孢型产孢，分生孢子成椭圆形的单细胞，喙枝孢型产孢更为丰富，见图5。

1.5 分子生物学鉴定

选用真菌通用引物ITS1 (5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3')/ITS4 (5'-TCCTCCGCTTATTGATATG-3')扩增分离菌株的ITS1-5.8S-ITS2区基因。反应条件：94℃预变性2 min，94℃ 30 s，47℃ 15 s，72℃ 1 min，共35个循环，最后72℃延伸10 min；PCR扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳后Gold View染色验证，约600 bp。

1.6 对比结果

将PCR扩增产物送上海英骏生物技术有限公司纯化及测序,结果登录GenBank进行Blast比对，与编号SUMS0012的Fonsecaeamonophora株的18 s rDNA部分序列碱基一致性99%，ITS全序列、28 s rDNA部分序列碱基一致性99%。

1.7 诊断及治疗

根据患者临床表现、真菌形态学及分子生物学鉴定，诊断为F.monophora所致的着色芽生菌病。予伊曲康唑胶囊0.2/次，2次/d口服1周后，因患者经济原因改为特比萘芬片0.25，1次/d口服治疗。2个月后真菌镜检及培养阴性，7个月后皮疹基本消退，遗有轻度萎缩性瘢痕，见图6。遂停服特比萘芬，期间监测肝、肾功无明显异常，随访至今无复发。

图1 右肩部红色斑块，周围有卫星灶 图2 直接镜检可见棕色、厚壁硬壳细胞和菌丝 (×400) 图3 SDA 27℃培养2周，可见绒毛状黑褐色菌落 图4 a.组织病理可见慢性肉芽肿性改变 (HE×100)，b.多核巨细胞内可见硬壳小体 (HE×1 000) 图5 光镜下可见枝孢型和喙枝孢型产孢 (a.×100，b.×400) 图6 治疗后皮损消退，遗留轻度萎缩瘢痕

Fig.1 Red plaque on the right shoulder with somg satellite lesions before treatment Fig.2 Direct microscopic examination showed brown thick-walled sclerotic bodies and hypha (×400) Fig.3 Black brown,villiform colonies on SDA medium at 27℃ for 2 weeks Fig.4 a.Histopathologic examination showed chronic granuloma (HE×100),b.Sclerotic bodies in multinuclear giant cells (HE×1 000) Fig.5 Microscope examination showed:cladosporium type and rhinocladiella type (a.×100，b.×400) Fig.6 The lesions relieved evidently and atrophic scarring was left after treatment

2 讨 论

着色芽生菌病 (chromoblastomycosis)是由一组暗色真菌引起的皮肤及皮下组织的慢性感染性疾病。以往认为卡氏枝孢霉主要见于北方，而裴氏着色霉则是南方引起着色芽生菌病的优势菌种[1]，但自2004年，De Hoog等[2]根据rDNA内转录间隔区ITS序列分析将F.monophora作为一个新的种从裴氏着色霉中分离出来，越来越多的研究证实F.monophora可能才是我国南方着色芽生菌病的主要致病菌[3-4]。此次分离的菌株生长缓慢，镜下可见枝孢型、喙枝孢型产孢，形态学上难以与裴氏着色霉区别，最终经分子生物学鉴定为F.monophora，与目前流行病学趋势相符。该菌株喙枝孢型产孢更为丰富，枝孢型少，且分生孢子链较短，与多数报道相似[5-7]，这是否为F.monophora的镜下特征还需大量的病例证实。F.monophora被认为毒力较裴氏着色霉强，还可引起暗色丝孢霉病，甚至引起中枢神经系统病变[7-8]，该患者在20余年的病程中病变局限，仅后2 a发展迅速，可能与真菌侵入的方式、数量、毒力、患者免疫状态变化及不合理治疗等有关。

着色芽生菌病病程慢性，皮损多样，常分为结节型、疣状型、斑块型、瘢痕型、肿瘤型等，以疣状结节最为常见。该患者斑块表面较光滑，无明显的疣状增生，只有零星浅表小溃疡，无脓性分泌物，周围毛细血管扩张明显，与经典的着色芽生菌病有所差别，在诊治过程中多次按皮炎、湿疹、瘢痕等误诊误治，但若考虑患者有外伤史，病程长，皮疹痛痒不明显，周围有卫星灶，抗过敏、抗增生等常规治疗无效，应该考虑真菌感染，结合真菌镜检及病理检查，能找到特征性的硬壳小体即可以做出诊断，进而予抗真菌治疗。相对于菌种鉴定，笔者认为详细的病史，特征性的临床表现及真菌形态学检查，对广大基层医院的医生更有意义，可以提高认识，降低误诊率，不致使患者只有在拥有较好条件真菌实验室的医院才能得到正确的诊治，而菌种鉴定可以交由有条件的实验室做进一步分子生物学鉴定。

着色芽生菌的病原菌因在体内生成厚壁的硬壳小体，药物难以渗透，临床治疗困难，需要较长时间，目前以口服伊曲康唑、特比萘芬为主，也有联合手术、光动力治疗的报道。有学者认为伊曲康唑、特比萘芬联合治疗可阻断真菌麦角固醇合成的不同阶段，因而治疗更有效[9]。但该患者单服特比萘芬，7个月后基本痊愈，口服药物过程中未出现明显的不良反应，证实特比萘芬治疗F.monophora引起的着色芽生菌病安全、有效，但这是否与患者皮损纤维化、瘢痕增生不明显有关。对于以疣状增生为主的病例联合用药是否更加必要，还有待更多的临床研究证实。

致谢 感谢四川大学华西医院皮肤科冉玉平教授、代亚玲老师及庄凯文对菌种鉴定提供的帮助。

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[本文编辑] 王 飞

A case of cutaneous chromoblastomycosis caused byFonsecaeamonophora

XIANG Yun,JI Qing,CAI Hong-wei,MA Ling-ling

(DepartmentofDermatovenereology,the2ndPeople'sHospitalofZhuhai,Zhuhai519000)

To report a case of chromoblastomycosis caused byFonsecaeamonophora.A 72-year-old man was admitted to the hospital with a more than 20-year history of plaque on the right shoulder.Direct microscopic examination and fungal culture,Histopathologic examination,PCR and ribosomal internal transcribed spacer (ITS) sequence analysis were performed for diagnosis.The thick-walled,brown sclerotic bodies were observed by direct microscopic examination and histopathologic examination.Fungal culture yielded black brown villiform colonies.Rhinocladiella type and cladosporium type conidia were observed in the slide culture.The isolate was identified asF.monophoraaccording to the gene sequence of internal transcribed spacer (ITS).The patient was cured after treatment with terbinafine (250 mg,qd) alone for 7 months.The case of cutaneous chromoblastomycosis caused byF.monophorawas diagnosed by histopathology，mycology and molecular biology methods and terbinafine was effective to it.

Fonsecaeamonophora;chromoblastomycosis;fungus identification

向耘，女 (汉族)，硕士，主治医师.E-mail:xiangyun_1982@126.com

R 756.6

A

1673-3827(2016)11-0119-03

2015-11-10