2011-2015年九江市职业暴露人群血清学和环境禽流感病原学监测结果分析

熊火梅，张红波，梁剑锋，余福平

(九江市疾病预防控制中心，江西九江333000)

2011-2015年九江市职业暴露人群血清学和环境禽流感病原学监测结果分析

熊火梅，张红波，梁剑锋，余福平

(九江市疾病预防控制中心，江西九江333000)

目的了解九江市2011年至2015年职业暴露人群H5N1禽流感病毒抗体水平和环境中禽流感病毒的感染状况，以期为九江市人感染高致病性禽流感的防控提供技术支持。方法马红细胞血凝抑制试验（HI）检测禽类养殖人群H5N1血凝素抗体；real-time PCR对环境标本进行A型检测，对A阳性进一步检测H5、H7和H9亚型；结果1340份职业人群血清H5N1血凝素抗体均为阴性；5个年度中1461份环境标本禽流感病毒核酸检测A型阳性率为30.94%，其中H5、H7、H9阳性率分别为10.47%（153/1461）、0.55%（8/1461）、21.77%（318/1461），A未分型阳性率为3.90%（57/1461）。结论九江市禽类中存在H5、H7、H9亚型感染，存在人感染高致病性禽流感的风险，应加强禽流感病毒感染监测。

禽流感病毒；外环境；职业暴露人群；病原学监测

禽流感是由A型流感病毒（avian influenza virus，AIV）引起的一种禽类（家禽和野禽）传染病，其发生和传播与自然条件、候鸟迁徙、家禽养殖和活禽交易等密切相关[1]。近年来，禽流感疫情频频发生，江西省也是禽流感病例报告发生比较频繁的地区，在过去几年间报告过人感染H10N8[2]、H7N9和H5N1等禽流感疫情。九江位于江西的北部，四省通行，部分县（区）环鄱阳湖，人口流动大，禽类养殖多，鸟类活动频繁，是著名的候鸟栖息地。根据《全国“职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案”（2011年版）》，我市自2011年开始设置2个国家级禽流感监测点，2015年根据《江西省活禽经营市场人感染禽流感监测方案（2015版）》，又新增加了两个省级禽流感监测点，此次新增监测点属于候鸟栖息地，在候鸟迁入至迁出期间选择采集候鸟栖息地环境标本，可为鄱阳湖地区内禽流感发生与传播提出预警。现就2011－2015年九江市职业暴露人群血清学和外环境禽流感病原学进行分析，为本地区禽流感防控措施和职业暴露人群风险评估工作提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源根据《全国职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案》的要求及九江市禽类养殖业分布情况确定监测点，以家禽规模养殖场（户）、家禽散养集中地区和城乡活禽市场的暴露人群作为监测对象，采集血液标本，离心后收集血清；每年2、3、6、7、10、11月份在各个监测点采集笼具表面、禽类粪便、清洗禽类污水、禽类饮水及宰杀禽类案板表面等环境标本。

1.2 试剂环境标本核酸检测采用RT-PCR，按照商品化试剂盒操作。血清学血凝素抗体检测由国家流感中心提供A/Hubei/1/2010、Anhui/1/2005、CM/HK/5052/2007(H5N1)、A/GZ/1/2013(H5N1)灭活抗原和马红血球。所有试剂和耗材均在有效期内使用。

1.3 实验方法

1.3.1 血清学测定H5N1抗体水平采集被调查者静脉血5ml，分离血清，送往江西省疾控中心和国家流感网络实验室采用红细胞血凝抑制试验检测，人血清对H5N1抗原的抑制效价≥1∶80判定为阳性。

1.3.2 核酸检测所有外环境中采集的拭子标本提取病毒RNA后，实时荧光定量PCR进行A型流感病毒核酸检测，对A型阳性标本再进行H5、H7和H9检测。其中2011年有25个A型阳性标本未进一步分型，其余A阳性均已检出型别。

1.4 数据分析将有关数据录入Excel2007软件进行整理，通过SPSS 19.0软件进行统计分析，率的比较采用χ2检验及Fisher精确概率法，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 职业暴露人群血清学监测1340人份职业暴露人群血清H5N1血凝素抗体检测均为阴性。

2.2 环境标本高致病禽流感病原学监测2011－2015年共检测1461份环境标本，检测阳性标本452份，其中H5阳性标本153份，H7阳性标本8份，H9阳性标本318份，A未分型标本57份。阳性率逐年升高，各年总体阳性率差异有统计学意义（χ2＝72.75，P<0.01），2015开始检出H7亚型，均为H7N9，详细见表1。

2.3 不同类型环境标本禽流感病毒核酸检测结果1461份标本中，各类型环境标本均有阳性检出，其他类型、笼具表面擦拭、禽类粪便、禽类饮用水等环境标本阳性率较高。不同标本类型检测阳性率总体差异有统计学意义（Fisher精确概率法，P< 0.05）见表2。

3 讨论

近年来，禽流感病毒跨越种间屏障，由H5、H7、H9亚型感染引起人禽流感病例均有报道[3-5]，尤其是2013年发生了新型H7N9禽流感的流行，对公众健康造成了严重的损害和巨大的经济损失[6]。九江市连续5年对1340名职业暴露人群血清学监测结果显示，A（H5N1）抗体检测均为阴性，与广州、浙江、赣州等地[7-9]监测结果一致。环境标本禽流感病原学监测显示，九江市禽类相关外环境样本中有禽流感病毒的存在，标本阳性检出率为30.94%，流行强度呈逐渐上升的趋势。从监测年份来看，2011年－2012年、2012年－2013年阳性率有明显的增加，两两比较除2014年与2013年和2015年没有统计学差异外，其余各年阳性率差异均有统计学意义。在亚型检测中，2011年-2014年检测到的主要型别为H5、H9和A未分型禽流感病毒，未检出H7亚型禽流感病毒，以H9亚型阳性率最高，占总阳性率70.35%（318/452），显示低致病性的H9禽流感病毒是本地区的主要流行型别，同Shi W及朱碧柳等调查的结果一致[10，11]。高致病性H5亚型检出率明显高于H7亚型，且易于和H9混合感染，在活禽交易市场禽类饮水标本中检出1例H5/H7/H9混合感染，不同亚型病毒如果在同一禽类个体中混合感染，将增加其相互重配进而产生新亚型的可能，应加强关注。

表1 2011年－2015年九江市禽流感环境标本核酸检测情况

表2 2011年-2015年九江市不同种类标本禽流感病毒核酸检测情况

标本类型病原学分析显示，粪便标本、禽类饮水、笼具表面擦拭物的阳性率较高，提示人群喂养与接触活禽市场的笼具时感染禽流感的危险较高。2015年在城乡活禽市场采集的其他型别（禽类羽毛等）标本阳性率最高，且3月份在城乡活禽市场的笼具表面擦拭标本中首次检出H7N9禽流感病毒。同年4月我市在流感常规监测中检出首例人感染H7N9禽流感[12]，在患者生活附近活禽交易市场外环境应急监测也检出H7N9阳性标本，为人感染禽流感病例提供了流行病学证据。可见H7N9禽流感病毒当时在多个市场传播，使活禽市场成为人感染禽流感病毒的主要来源地[13-15]，应是今后监测工作的重点。

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Analysis of poultry breeding population serologic features and environmental avian influenza virus surveillance results in Jiujiang city from 2011 to 2015

XIONG Huomei，ZHANG Hongbo，LIANG Jianfeng，YU Fuping.
Jiujiang Center for Diesease Control and Prevention，Jiujiang Jiangxi 333000，China.

ObjectiveTo understand the antibody levels of H5N1 avian influenza virus among poultry breeding population and the virus distribution in Jiujiang city，and provide evidence for the prevention and control of human infection with avian influenza virus.MethodsHemagglutination inhibition(HI)test was used to detect H5N1 hemagglutinin antibody in poultry breeding population.The samples of environment were detected the nucleic acid of avian influenza A with real-time PCR，and the positive samples were further tested for H5，H7 and H9 nucleic acid.ResultsA total of 1340 serum samples from poultry breeding population were negative for H5N1 hemagglutinin antibody.While in 621 environment samples，the positive rate of avian influenza A virus was 30. 94%，including H5 positive rate 10.47%(153/1461），H7 positive rate 0.55%（8/1461），H9 positive rate21.77%(318/1461），untyped A positive rate 3.90%(57/1461）.ConclusionThere were H5，H7 and H9 avian influenza viruses in monitoring areas of Jiujiang city，presenting highpathogenic avian influenza risk to human.So avian influenza virus infection monitoring should be strengthened on poultry breeding population.

Avian influenza virus；Environmental samples；Occupational exposure population；Pathogen monitoring

R446.62，R373.1+3

A

1674-1129(2016)06-0715-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.06.006

2016-09-05；

2016-11-23)

熊火梅，女，1975年12月出生，硕士，主管技师，临床检验诊断学，研究方向病毒病原学检测，E-mail：xionghuomei@126. com.