陈丽新,黄卓忠,陈振妮,张焱君,韦仕岩,吴圣进,王灿琴
(1.广西农业科学院微生物研究所,广西 南宁530007;2.贺州学院,广西 贺州 542800)
适宜广西原料栽培的高温平菇优良菌株筛选试验
陈丽新1,黄卓忠1,陈振妮1,张焱君2,韦仕岩1,吴圣进1,王灿琴1
(1.广西农业科学院微生物研究所,广西 南宁530007;2.贺州学院,广西 贺州 542800)
为筛选适宜广西本地原料栽培的高温平菇优良菌株,对18个高温平菇菌株在母种、原种及木薯秆(屑)、桑枝屑、桉树皮培养基的菌丝生长情况、子实体生物学效率及农艺商品性状进行了比较试验。结果表明,较适宜广西地区利用木薯秆(屑)、桑枝屑、桉树皮为基质栽培的白菇菌株是P7、P8、P10、P12、P13、P16,黑菇菌株是P1、P3。
栽培原料;高温平菇;优良菌株;筛选
食用菌营养丰富、风味鲜美,具有食药兼用等特点。近几年,广西围绕自身的优势特色产业,把食用菌栽培原料本地化作为工作重点,从废弃物处理、适栽品种筛选、配方优化和栽培技术等方面开展系统研究与示范引导,基本实现了原料本地化,逐步摆脱了从北方调进棉籽壳作为栽培原料的依赖。
蚕桑、木薯、桉树是广西的优势特色产业,其栽培面积及产量均居全国第一,大量的桑枝、木薯秆(渣)、桉树皮(屑)是食用菌栽培的优质原料,利用这些优势产业剩余物栽培食用菌,既可为食用菌生产提供物美价廉的原料,又延长了资源综合利用的产业链。利用桑枝屑、木薯秆(渣)、桉树皮(屑)可种植平菇(秀珍菇、姬菇)、木耳(黑木耳、毛木耳)、金福菇、杏鲍菇、金针菇、茶树菇、香菇、真姬菇、大杯蕈等多个食用菌品种[1-8],但研究多以可行性和配方优化为主,以产业废弃物栽培的食用菌优良菌株的筛选研究较少。
高温平菇(Pleurotusostreatus)在分类学上属于真菌门、担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属[9],是夏季高温季节栽培量最大的食用菌品种。而目前现有的高温平菇菌株较多,菌株的表现性状受环境条件影响较大,同一菌株不同栽培条件或不同菌株在同一栽培条件下,菌株生长、子实体、产量等性状差异很大,正确选择适合当地栽培的菌株非常重要。本研究对18个来源不同的高温平菇菌株进行了不同原料栽培的品比试验,以期筛选出适合广西本土原料为栽培基质的高温平菇优良菌株,达到高产、优质、高效的目的。
表1 供试高温平菇菌株及其来源
1.1 供试菌株
广西农业科学院微生物研究所食用菌研究中心保存的以及从国内食用菌有关单位引进的菌株共18个,见表1。参试菌株经同时复壮后,扩大培养,采用相同的菌种等级进行品比试验。
1.2 供试培养基
1.2.1 母种(一级种)培养基 PDA培养基:马铃薯200 g,葡萄糖20 g,琼脂20 g,加水1000 mL,pH 7.0。
1.2.2 原种(二级种)和栽培种(三级种)培养基 棉籽壳80 %,麦麸16 %,石灰2 %,石膏1 %,过磷酸钙1 %,含水量65 %。
1.2.3 出菇培养基 木薯秆52 %、木薯酒精渣45 %,石灰2 %,石膏1 %,含水量65 %[10]。
桑枝粉 77 %、细米糠或麦麸20 %、过磷酸钙 1 %、白糖 1 %、石膏 1 %[11]。
桉树皮73 %,棉籽壳12 %,玉米粉12 %,石灰2 %,石膏1 %,含水量65 %[12]。
1.3 试验方法
1.3.1 菌种制作 分母种、原种、栽培种三级制种方法制种,培养基按常规方法配制、灭菌,接种后置于25~28 ℃温度下培养。
1.3.2 菌袋制作 根据配方比例及制袋量分别称取各种原料(每袋0.50 kg干料)。常规方法拌料(培养基含水量均控制在65 %左右,pH 7.5~8.0),装袋(使用规格为17 cm×33 cm的聚丙烯袋),高压灭菌(0.15 MPa保持2.5 h)。冷却后(28 ℃以下)按无菌操作规程接种。每个菌株接种50袋,重复3次。
1.3.3 菌丝体培养 接种后将各菌株菌种及菌袋置于培养室内按常规进行避光培养,室温控制在25~28℃,空气相对湿度为65 %~70 %。观察菌丝的生长情况,若有杂菌污染,及时将其捡出。观察纪录各菌株菌丝的生长情况,测量菌丝生长速度(采用直线生长测量法)及菌丝生长势(分别将不同菌株的菌丝生长情况相互比较,用“+”号表示菌丝密度和生长势强弱)。利用新复极差法对各菌株的生长速度进行差异显著性分析。
菌丝日均生长速率(mm·d-1)=菌丝生长量(mm)/培养天数(d)
1.3.4 产量统计 记录统计各菌株前三潮鲜菇的产量,计算生物学效率,利用新复极差法进行差异显著性分析。
生物学效率(%)=(子实体总产量/干料重)×100。
表2 不同菌株菌丝体在PDA培养基上生长状况
注:+ +表示菌丝长势强,粗壮、洁白、浓密、整齐;+表示菌丝长势较强,粗壮、色淡、较稀、整齐,下同。 Note:++ means mycelium of strains growth stronger,brawnier,more white and more tidy;+ means mycelium of strains growth strong,brawny,white and tidy. The same as below.
2.1 不同高温平菇菌株菌丝体在PDA培养基上(一级种)生长状况比较
如表2所示,从菌丝生长速度比较,参试菌株菌丝平均生长速度以菌株P10最快,为13.23 mm·d-1,除与P17差异不显著外(P>0.05,下同),与其他菌株均存在极显著差异(P<0.01,下同);平均生长速度最慢的是菌株P6,为10.18 mm·d-1,但与P3、P4和 P15间差异不显著(表2)。从菌丝长势情况看, 白菇和黑菇差异明显,白菇菌株菌丝普遍表现较浓密、洁白、粗壮有力、生长整齐,而黑菇则较白菇稀,颜色淡,其中P5、P6尤为明显。
2.2 不同高温平菇菌株菌丝体在原种(二级种)培养基上生长状况比较
如表3所示,从菌丝平均生长速度比较来看, 参试菌株菌丝平均生长速度以菌株P18最快,为12.28 mm·d-1,除与P11差异不显著外,极显著高于其他菌株;平均生长速度最慢的是菌株P16,为8.95mm·d-1,极显著慢于其他菌株。从菌丝长势来看,在菌丝长势方面,除菌株P2、P3和P6颜色较淡、长势稍差外,其余菌株菌丝长势均浓密、洁白、粗壮、有力。
2.3 不同菌株菌丝体在木薯秆(渣)、桑枝屑、桉树皮培养基上的生长状况比较
如表4所示,从菌丝平均生长速度比较分析,在木薯秆(渣)培养基上,参试菌株菌丝平均生长速度以菌株P10最快,为9.34 mm·d-1,除与P16、 P17差异不显著外,与其他菌株均存在极显著差异;平均生长速度最慢的是菌株P3,为6.64 mm·d-1,与菌株P1、P2、P4、P6间差异不显著。在桑枝屑培养基上,菌丝平均生长速度最快的菌株是P8,为11.35 mm·d-1,极显著快于其他菌株;菌丝平均生长速度最慢的菌株是P3和P9,为7.47 mm·d-1,除与P2差异不显著外,极显著慢于其他菌株。在桉树皮培养基上,菌丝平均生长速度最快的菌株是P17,为11.50 mm·d-1,极显著快于其他菌株;菌丝平均生长速度最慢的菌株是P5,为7.79 mm·d-1,显著慢于其他菌株。
菌丝生长势来看, 各参试菌株在木薯秆(渣)、桑枝屑、桉树皮培养基上均表现出较好的菌丝长势,除极个别的菌株如P4、P6在木薯秆(渣)培养基上,P5在桑枝屑培养基上,P4、P5在桉树皮培养基上菌丝颜色较淡、长势稍差外,其余菌株菌丝均浓密、洁白、粗壮、有力。
表3 不同菌株菌丝体在原种培养基上生长状况
表4 不同菌株菌丝体在木薯秆(渣)、桑枝屑、桉树皮培养基上生长状况
表5 参试菌株子实体农艺性状
2.4 参试菌株子实体农艺性状比较
如表5 所示,参试菌株多为丛生,根据菌盖颜色及生产上惯例高温平菇分白菇和黑菇2种,其中菌株P1、P2、P3、P4、P5、P6、P9等子实体色泽为灰黑色、灰褐色或深褐色,韧性好,幼菇期形态、颜色及品尝的口感与秀珍菇极其相似;其他菌株子实体颜色呈白色或灰白色,市场上统称为白菇,其中P10菇型好,菌柄短,朵数多而大,其他白菇菌株则或大朵而朵数少,或朵数多而小朵。
2.5 不同菌株在木薯废弃物培养基上的生物学效率比较
如表6所示,在木薯秆(渣)、桑枝屑、桉树皮培养基上,所有供试菌株均能正常出菇。在鲜菇产量上,不同菌株在不同培养基上有一定差异。
在木薯秆(渣)培养基上,白菇菌株生物学效率普遍较黑菇高,在供试的11个白菇菌株中,除菌株P14、P18外,其他所有白菇菌株的生物学效率均比黑菇高,存在极显著差异,其中菌株P10产量最高,生物学效率达107.96 %,除与P13、P12差异不显著外,与其他菌株均存在极显著差异;白菇菌株产量最低的是P18,生物学效率仅为69.61 %,是所有18个参试菌株中产量最低的。在供试的7个黑菇菌株中,产量最高的是菌株P1,生物学效率为81.54 %,除与菌株P3差异不显著外,与其他黑菇菌株均存在显著差异;黑菇菌株产量最低的是P6,生物学效率为69.79 % ,与黑菇菌株P2、 P4、 P6、P9差异不显著,亦即黑菇菌株除P1、 P3产量较高外,其他菌株间基本不存在差异。
在桑枝屑培养基上,供试的11个白菇菌株产量最高的是P16,生物学效率为105.23 %,除与P10、P12差异不显著外,与其他菌株均存在显著差异;白菇菌株产量最低的是P18,生物学效率为70.59 %,与其他白菇菌株均存在显著差异。参试的7个黑菇菌株产量最高的是菌株P3,生物学效率为79.74 %,除与菌株P1差异不显著外,与其他黑菇菌株存在显著差异;黑菇菌株产量最低的是P5,生物学效率为68.63 %,与黑菇菌株P2、 P4、P9差异不显著。
在桉树皮培养基上,所有白菇菌株生物学效率都比黑菇菌株高,差异显著。供试的11个白菇菌株产量最高的是P12,生物学效率为115.08 %,除与P10差异不显著外,与其他菌株均存在极显著差异;菌株 P7、 P8、 P11、P13、P16产量也较高,菌株间差异不显著,但显著低于菌株P10和P12;白菇菌株产量最低的是P14,生物学效率为85.04 %,但与菌株P15、 P17、P18间差异不显著。参试的7个黑菇菌株产量最高的是菌株P1,生物学效率为76.65 %,与其他黑菇菌株存在显著差异;其次是菌株P2、P3、P4、P9, 4个菌株间差异不显著,但显著低于菌株P1;黑菇菌株产量最低的是P6,生物学效率为59.87 %,与菌株P5差异不显著,极显著低于其他菌株。
表6 参试菌株生物学效率比较
3.1 参试菌株菌丝生长情况
在PDA培养基上,白菇与黑菇菌株生长速度差异不明显,其中白菇菌株P10、P17、P13、P8、P7及黑菇菌株P1、P2生长速度快;白菇和黑菇菌丝生长势差异明显,白菇菌株菌丝普遍表现较浓密、洁白、粗壮有力、生长整齐,而黑菇则较白菇稀,颜色淡。在原种培养基上,生长速度较快的菌株是P18、P11、P9、P7、P4、P1,菌丝长势除菌株P2、P3和P6颜色较淡、长势稍差外,其余菌株菌丝长势均浓密、洁白、粗壮、有力。
参试菌株菌体在木薯秆(渣)、桑枝屑、桉树皮培养基上生长情况为:在木薯秆(渣)培养基上,生长速度较快的菌株是P10、P17、P13、P16、P7,黑菇菌株均比白菇菌株生长慢;在桑枝屑培养基上,菌株P8、P12、P17、P16、P10生长速度较快,黑菇菌株生长普遍较慢;在桉树皮培养基上,黑菇菌株与白菇菌株生长差异不明显,生长速度较快的菌株是P17、P10、P13、P6、P14。在菌丝生长势方面,各参试菌株在木薯秆(渣)、桑枝屑、桉树皮培养基上均表现出较好的菌丝长势,除极个别的菌株如P4、P6在木薯秆(渣)培养基上、P5在桑枝屑培养基上、P4、P5桉树皮培养基上菌丝颜色较淡、长势稍差外,其余菌株菌丝均浓密、洁白、粗壮、有力。
综上所述,在参试的18个菌株中,没有一个菌株在母种、原种、木薯秆(渣)、桑枝屑、桉树皮培养基上都表现出较好的生长速度和生长势,但除在原种(棉籽壳)培养基上,菌株P10、 P13、P17在其他四种培养基上都生长快,长势好。这与杨小兵等、杜适普等认为平菇品种繁多,同一品种在不同环境条件下或不同品种在同一环境条件下栽培,其结果有很大差异[13-14]的研究结果一致。
3.2 参试菌株出菇情况
在木薯秆(渣)培养基上,产量较高的白菇菌株是P10、P13、P12、P16、 P11、P7、 P8,黑菇菌株P1、P3比较突出,其他差异不显著;在桑枝屑培养基上,P16、P10、P12、P17、P13、P8、P7等白菇菌株产量较高,黑菇菌株产量较高是P1、P6,其他黑菇菌株差异不显著;在桉树皮培养基上,白菇菌株P12、P10、P16、P7、 P11、P13、P8产量较高,黑菇产量较高的菌株是P1、P4、P2、 P3。
综上所述,在3个本地原料培养基上产量都较高的白菇菌株是P7、P8、P10、P12、P13、P16,黑菇菌株是P1、P3,其中最突出的是白菇菌株P10和黑菇菌株P1,使用木薯秆(渣)、桑枝屑、桉树皮作为原料都表现出最高的产量。
3.3 参试菌株综合性状评价
生长速度快,菌丝长势强,菌丝粗壮洁白且污染少是鉴定菌株优劣的一个重要参考指标,但菌丝生长速度与子实体产量之间并不存在完全的相对应关系。本研究结果表明,菌株P17在PDA、木薯秆(渣)、桑枝屑、桉树皮培养基上都表现出较好的生长速度和生长势,但其产量在参试白菇菌株中只是居中,这与黄宁等[15]的研究结果一致。而平菇子实体的产量则是衡量菌株是否为优良品种最重要的标准,因为平菇产量的高低直接影响菇农收入。因此,综合各菌株的生长情况、菇型菇质和生物学效率,较适宜广西地区利用木薯废弃物、桑枝屑、桉树皮为基质栽培的白菇菌株是P7(茶39)、P8(平菇558)、P10(灰平39)、P12(高温08-2)、P13(夏灰1号)、P16(姬菇6号),黑菇菌株是P1(夏丰1号)、P3(基因2005)。黑菇菌株是P1(夏丰1号)具有较强的适应性,王秀玲也认为其是适宜北京地区高温季节栽培的优良平菇品种[16];姜新良等通过七个高温平菇品种比较试验,认为夏丰 1 号的出菇性状和产量均优于当地主栽品种,可作为江苏夏季高温平菇主栽菌株[17];黄卓忠等进行了7个秀珍菇型高温平菇菌株比较试验,认为夏丰1号菌株菌丝生长速度快,长势旺,菇形及商品性好,生物学效率高,综合表现好,适宜在南宁地区推广种植[18]。本试验结果与以上研究相吻合。本试验结果可为优选适宜广西原料栽培的优良高温平菇菌株提供一定的借鉴作用,对于广温平菇优良菌株的筛选有待进一步研究。
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(责任编辑 王冠玉)
Experimental Research on Screening Suitable Strains ofPleurotusgeesteranusfor Cultivation with Guangxi Raw Material
CHEN Li-xin1, HUANG Zhuo-zhong1, CHEN Zhen-ni1, ZHANG Yan-jun2, WEI Shi-yan1, WU Sheng-jin1, WANG Can-qin1
(1.Microbiology Research Institute of Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Guangxi Nanning 530007, China; 2.Hezhou University, Guangxi Hezhou 542800, China)
In order to screen the fungus strains ofPleurotusostreatuswhich was suitable for cultivation with cassava wastes, on PDA medium culture, culture experiment with cassava wastes, mycelia growth condition, the biological efficiency and agronomic traits were compared with 18P.ostreatusstrains. The results showed that strains white mushroom P7, P8, P10, P12, P13, P16 and black mushroom P1, P3 were suitable to be cultivated in Guangxi with cassava stalk, mulberry sawdust and eucalyptus bark.
Eucalyptus-bark;Pleurotusostreatus; Excellent strain; Screening
1001-4829(2016)07-1556-07
10.16213/j.cnki.scjas.2016.07.012
2016-01-30
广西农业科学院科技发展基金重点项目(桂农科2014YZ18);广西农业科学院优势学科团队项目(2015YT178);国家现代农业食用菌产业技术体系广西创新团队专项项目
陈丽新(1966-),女,广西容县人,研究员,主要从事食用菌技术研究与开发工作,E-mail:clx@gxaas.net。
S646.1+4
A