血清PD-ECGF在伴或不伴糖尿病脑梗死患者中的差异性研究

钱淑霞 沈宇斐 张晓玲 官俏兵

血清PD-ECGF在伴或不伴糖尿病脑梗死患者中的差异性研究

钱淑霞 沈宇斐 张晓玲 官俏兵

目的 研究血清血小板衍生内皮细胞生长因子（PD-ECGF）在伴或不伴糖尿病脑梗死患者中的差异性。方法 将73例急性脑梗死患者根据是否伴有糖尿病分为伴有糖尿病的急性脑梗死组（CI+DM组）32例和不伴糖尿病的急性脑梗死组（CI组）41例，动态测定发病后第1、3、7、10～14天时血清PD-ECGF水平，评价入院时、发病第10～14天的美国国立卫生院神经功能缺损评分（NIHSS）。同时测定30例伴有糖尿病非脑血管病患者（DM组）、30例不伴糖尿病非脑血管病患者（NC组）血清PD-ECGF水平作为对照。结果 与NC组相比，CI组患者在脑梗死后第1、3、7、10～14天时的血清PD-ECGF水平均明显增高且出现动态变化（P＜0.05）。与DM组相比，CI+DM组患者在脑梗死后第1、3、7、10～14的血清PD-ECGF水平不增高且无动态变化（P＞0.05）。与NC组相比，DM组PD-ECGF水平明显增高（P＜0.05）。CI+DM组发病第10～14天的NIHSS评分高于CI组（P＜0.05）。结论 糖尿病患者的基线PD-ECGF水平较高，当急性脑梗死发生后，PD-ECGF反而未能像不伴糖尿病的急性脑梗死患者那样进一步升高并呈动态变化。

脑梗死 糖尿病 血小板衍生内皮细胞生长因子 血管生成

糖尿病是缺血性脑血管病的独立危险因素，糖尿病患者并发的脑梗死具有病情重、易进展、愈后不理想的特点[1]。因此，从新的角度探寻糖尿病与脑梗死的关系，对于实施防治、改善预后具有十分重要的意义。目前已发现多种促血管生长因子调节了脑梗死后新生血管形成、血管再通，其中血小板衍生内皮细胞生长因子（platelet derived endothelial cell growth factor，PDECGF）与脑梗死的关系研究较少，尤其是脑梗死患者在伴有或不伴有糖尿病的情况下，其PD-ECGF是否存在差异，目前尚未见报道。因此，笔者观察了伴有或不伴有糖尿病的急性脑梗死患者在发病后第1、3、7、10～14天时血清PD-ECGF水平的动态变化，现报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 收集2014年2至6月我院神经内科住院的急性脑梗死患者73例。所有患者起病时间24h以内，经头颅CT或MRI检查证实，排除严重感染、肿瘤、脑外伤、糖耐量异常、拒绝签署知情同意书、中途退出者。按是否伴有糖尿病（糖尿病的诊断采用1999年世界卫生组织的诊断标准）分为两组：伴有糖尿病急性脑梗死患者（CI+DM组）32例，其中男18例，女14例，年龄41～84（69.4±12.0）岁；不伴糖尿病急性脑梗死患者（CI组）41例，其中男23例，女18例，年龄45～80（67.6±11.2）岁。收集我科同期住院伴有糖尿病非脑血管病患者（DM组）30例和不伴糖尿病非脑血管病患者（NC组）30例，其中DM组男18例，女12例，年龄40～89（70.4±12.6）岁；NC组男16例，女14例，年龄41～82（68.8±13.3）岁。4组间年龄、性别比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），具有可比性。本研究经我院伦理审查委员会批准，所有受试者均了解该研究的方法和目的并签署知情同意书。

1.2 方法 测定CI+DM组、CI组患者发病后第1、3、7、10～14天血清PD-ECGF水平。所有纳入对象均根据中国脑血管病防治指南进行规范化治疗，并测定入院时、发病10～14d的NIHSS评分。DM组、NC组测定住院后第1天血清PD-ECGF水平。

1.3 标本采集及处理 清晨抽取患者空腹肘静脉血2ml装入空白真空管，待其自凝后3 000r/min离心10min，收集血清，-20℃保存待检。试剂盒购于上海西唐生物科技有限公司，酶标仪型号：DENLEY DRAGON Wellscan MK 3，操作方法严格按试剂盒说明书进行，采用双抗夹心ELISA法测定血清PD-ECGF水平。

1.4 统计学处理 应用SPSS15．0统计软件。正态分布的计量资料以表示，多组间比较采用方差分析，两两比较LSD-t检验；非正态分布的计量资料以M（Q25，Q75）表示，组间比较采用Mann-Whitney秩和检验；计数资料组间比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 4组患者不同时点血清PD-ECGF水平的比较与NC组比较，CI组脑梗死后第1、3、7、10～14天的PDECGF水平均有明显增高，其中第3天达最高峰，两组间及各时点间比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与DM组比较，CI+DM组脑梗死后第1、3、7、10～14天的PD-ECGF水平差异均无统计学意义（均P＞0.05），且CI+ DM组各时点无统计学差异（P＞0.05）。CI+DM组血清PD-ECGF水平明显高于CI组，DM组血清PD-ECGF水平明显高于NC组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。详见表1。

表1 4组患者不同时点血清PD-ECGF水平的比较（μg/ml）

2.2 CI+DM组、CI组患者入院前后NIHSS评分的比较 CI+DM组、CI组患者入院时NIHSS评分差异无统计学意义（P＞0.05），第10～14天时CI+DM组NIHSS评分高于CI组，差异有统计学意义（P＜0.05），表明合并糖尿病急性脑梗死患者短期预后相对较差，详见表2。

表2 CI+DM组、CI组患者入院前后NIHSS评分的比较（分）

3 讨论

急性脑梗死缺血中心区的脑组织产生不可逆损伤，而缺血半暗带的脑组织损伤是可逆的，新生血管形成、闭塞血管再通、尽早恢复缺血半暗带的血流成为治疗脑梗死的一个新突破点、研究热点。在动物的离体、在体实验中，血管生长因子可致新生血管形成、闭塞血管再通等作用已得到了广泛肯定[2]。对血管生成作用较为明确的肽类血管生成因子有PD-ECGF、血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、碱性纤维母细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、血管生成素和肿瘤生长因子（tumor growth factor，TGF）等[3]。

糖尿病是脑梗死发病有决定性的、独立的因素，伴有糖尿病的脑梗死具有病情重、预后差的特点，给社会和家庭造成了沉重负担[1]。本研究发现，伴有糖尿病急性脑梗死患者发病第10～14天时的NIHSS评分高于不伴糖尿病急性脑梗死患者，提示预后不佳。近年来，我国糖尿病的患病率呈现日益增高的趋势，本研究中伴有糖尿病急性脑梗死患者占43.8%（32/73），因此，糖尿病和脑梗死的关系日益受到人们的重视。

PD-ECGF是血管生成研究领域一个较新的细胞生长因子，分布广泛，具有刺激内皮细胞生长、促进血管生成的作用，其表达的程度与微血管密度关系密切，在血管生成相关性疾病中起着至关重要的作用[4]。PDECGF能水解胸腺肽产生2-脱氧核糖-1-磷酸和脱氧核糖，这些核糖和脱氧核糖具有高度血管生成性[5]。有研究报道，糖尿病患者血清PD-ECGF水平显著升高[6]；也有研究认为，显著增加的PD-ECGF水平通常在高龄、血糖控制不佳、一些微血管疾病中较为常见[7]。

本研究发现，CI组患者血清PD-ECGF水平在脑梗死后各时间呈现动态增高，第3天达到高峰，第10～14天后仍一直维持较高水平，这与Renner[8]等的大鼠MCA-O模型实验吻合。Hayashi等[9]发现在实验大鼠脑缺血后，缺血灶周围PD-ECGF表达增加，并猜测PDECGF可能是一种潜在的缺血性脑梗死的治疗剂。急性脑梗死引起的缺血缺氧对PD-ECGF表达有强烈的诱导作用，促使新生血管的形成和侧支循环的建立，这可能是机体的代偿和保护机制，从而改善了脑组织的缺血缺氧，随着血流供应的改善，PD-ECGF开始降低，机体对PD-ECGF的激活效应减弱。

本研究中DM组的PD-ECGF水平较NC组明显升高，与以往研究相一致[6-7]。动物研究表明，大鼠在确定糖尿病后10～12周可出现血管的重构[10]。高糖状态对PDECGF有诱导作用，使糖尿病患者的PD-ECGF水平上调，原因可能是患者长期的糖代谢紊乱损害了体内的血管内皮细胞，诱导了PD-ECGF及其受体系统的表达。

本研究中伴有糖尿病患者在急性脑梗死后（CI+ DM组），PD-ECGF并未如实验预期那样进一步升高，而是呈现完全不同的趋势：不显著增高，各时间点也不出现动态变化，推测可能的原因是长期的高血糖使PD-ECGF水平上调并维持高值，当机体出现缺血缺氧时，PD-ECGF系统失去了应激效应的防御机制，也就失去了促进血管新生的能力，可能是伴有糖尿病急性脑梗死患者病情重、预后差的原因之一。

总之，糖尿病患者PD-ECGF水平较非糖尿病患者高，当急性脑梗死发生后，这类患者的血清PD-ECGF未能像不伴糖尿病急性脑梗死患者那样进一步升高并呈现动态变化。如何通过PD-ECGF系统的外界调控改善伴有糖尿病脑梗死患者的预后，是今后值得继续探索的思路之一。

[1]Matz K,Keresztes K,Tatschl C,et al.Disorders of glucose matabolism in acute stroke patients:an underrecognized problem [J].Diabetes Care,2006,29(4):792-797.

[2]Hu W,Huang Y.Targeting the platelet-derived growth factor signaling in cardiovascular disease[J].Clin Exp Pharmacol Physiol, 2015,42(12):1221-1224.

[3]Larke R P,Froese G J,Devine R D,et al.Comprehensive seroepidemiologic study of hepatitis B virus infection in the Northwest Territories ofCanada[J].Arct Med Res,1988,47(1):711-713.

[4]Abe H,Hino R,Fukayama M.Platelet-derived growth factor-A and vascular endothelialgrowth factor-C contribute to the development of pulmonary tumor thrombotic microangiopathy in gastric cancer[J].Virchows Arch,2013,462(5):523-531.

[5]Hamed E A,Zakary M M,AbdelalR M,et al.Vasculopathy in type 2 diabetes mellitus:role of specific angiogenic modulators[J].J PhysiolBiochem,2011,67(3):339-349.

[6]de Bruin M,van Capel T,Van der Born K,et al.Role of platelet-derived endothelial cell growth factor/thymidine phosphorylase in fluoropyrimidine sensitivity[J].Br J Cancer,2003,88 (6):957-964.

[7]Saharinen P,Alitalo K.Double target for tumor mass destruction [J].J Clin Invest,2003,111(9):1277-1280.

[8]Renner O,Tsimpas A,Kostin S,et al.Time amd cell-specific induction ofplatelet-derived growth factor receptor-β during cerebralischemia[J].MolecularBrain Research,2003,113(1-2):44-51.

[9]Hayashi T,Wang,Q X,Zhang H Z,et al.Induction of platelet derived-endothelial cell growth factor in the brain after ischemia[J]. Neuro Res,2007,29(5):463-468.

[10]Harris A,Hutchinson J R,Sashidanandam K,et al.Type 2 diabetes causes remodeling of cerebrovasculature via differential regulation of matrix metalloproteinases and collagen synthesis: role of endothelin-1[J].Diabetes,2005,54(9):2638-2644.

（本文编辑：严玮雯）

《浙江医学》对医学论文中有关实验动物描述的要求

在医学论文的描述中，凡涉及实验动物者，在描述中应符合以下要求：（1）品种、品系描述清楚；（2）强调来源；（3）遗传背景；（4）微生物学质量；（5）明确等级；（6）明确饲养环境和实验环境；（7）明确性别；（8）有无质量合格证；（9）有对饲养的描述（如饲料型、营养水平、照明方式、温度、温度要求）；（10）所有动物数量准确；（11）详细描述动物的健康状况；（12）对动物实验的处理方式有单独清楚的交代；（13）全部有对照，部分可采用双因素方差分析。

本刊编辑部

Serum PD-ECGF levels in acute cerebral infarction patients with or without diabetes mellitus

QIAN Shuxia,SHEN Yufei,ZHANG Xiaoling,et al.Department of Neurology,Jiaxing Second Hospital,Jiaxing 314000,China

Objective To investigate serum levels of platelet derived endothelial cell growth factor(PD-ECGF)in cerebral infarction patients with or without diabetes mellitus(DM). Methods Seventy three consecutive patients with acute cerebral infarction were enrolled,including 32 cases with DM(CI+DM group)and 41 cases without DM(CI group).The PD-ECGF levels were detected by ELISA at d1,d3,d7 and d 10-14 after onset of stroke;the NIHSS was evaluated at d1 and d 10-14.The PD-ECGF levels were also detected in 30 DM patients without cerebrovascular disease(DM group)and 30 normal controls(NC group). Results Serum PD-ECGF levels were significantly increased in CI group at all time points compared with NC group (P＜0.05).There were no differences in serum PD-ECGF levels between CI+DM group and DM group at different time points(P＞0.05).Serum PD-ECGF levels were significantly increased in DM group compared with NC group(P＜0.05).The scores of NIHSS in CI+DM group were higher than those in CI group at d10-14,but no differences at d1. Conclusion Serum PD-ECGF levels are higher in diabetes mellitus patients,but there are no dynamic variations after stroke,which is different from those without diabetes mellitus.

Cerebral infarction Diabetes mellitus Platelet derived endothelial cell growth factor Angiogenesis

2015-08-20）

浙江省中医药科学研究基金计划（2010ZB147）；嘉兴市科技局科技计划（2010AY1038）

314000 嘉兴市第二医院神经内科

官俏兵，E-mail：guanqb@126.com