田间小菜蛾对9种杀虫剂的抗药性测定

朱 航，周小毛 

（湖南省农业生物技术研究中心，湖南 长沙 410125）

田间小菜蛾对9种杀虫剂的抗药性测定

朱 航，周小毛

（湖南省农业生物技术研究中心，湖南 长沙 410125）

在室内采用浸叶法测定湖南3个蔬菜产区（长沙市长沙县、株洲市茶陵县和永州市祁阳县）的田间小菜蛾对9种药剂的抗药性。试验结果表明，小菜蛾对高效氯氰菊酯抗性达到极高水，对定虫隆、阿维菌素和茚虫威抗性属于高抗水平，对溴虫腈, 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和多杀菌素属于中抗水平，对氯虫苯甲酰胺和苏云金杆菌相对敏感。因此，这3个地区的小菜蛾防治应该减少溴虫腈、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和多杀菌素的使用，交替使用氯虫苯甲酰胺和苏云金杆菌，停止阿维菌素、茚虫威、高效氯氟氰菊酯的使用，以便延缓抗药性的产生与发展。

小菜蛾；杀虫药剂；抗药性监测

小菜蛾（Plutella xylostella）属于鳞翅目夜蛾科，是一种危害十字花科蔬菜的世界性的农业害虫[1]。防治小菜蛾的最有效的方法是使用杀虫剂，但是由于频繁用药和小菜蛾的本身世代周期短、繁殖快的特点导致小菜蛾抗药性发展得越发严重[2-3]。目前我国小菜蛾已经对90%以上的杀虫剂都产生了不同程度的抗性，已经成为抗药性最为严重和最难防治害虫之一[4]。

自Ankersmit[5]首次报道印度尼西亚爪哇岛的小菜蛾种群对DDT产生抗性以来，随后在东南亚各国、中国台湾、日本、美国等国家和地区先后报道了小菜蛾对各种杀虫剂产生了不同程度的抗性[6-9]。近年来湖南地区小菜蛾的危害日益严重，试验利用小菜蛾敏感品系，采用浸叶法先建立了小菜蛾对阿维菌素、茚虫威、溴虫腈、高效氯氟氰菊酯等7种杀虫剂的敏感毒力基线。并在此基础上测定了2014年湖南部分地区小菜蛾田间种群的抗性水平，旨在准确掌握该地区小菜蛾的抗性现状，以便及时提出合理化建议，为田间科学合理施药以及抗性治理提供理论依据。

1　材料与方法

1.1供试昆虫

小菜蛾敏感品系：由湖南省植物保护研究所提供，在实验室内用甘蓝和萝卜苗饲养，不接触任何杀虫剂。

小菜蛾田间种群：分别采自湖南省长沙县、株洲茶陵县和永州祁阳县的十字花科蔬菜上。采集3～4龄的小菜蛾幼虫在室内饲养一代，然后挑选虫体大小基本一致的3龄幼虫供室内生物测定用。

1.2供试昆虫的饲养

从长沙县、茶陵县和祁阳县采集的小菜蛾田间种群在室内人工气候箱种用甘蓝和萝卜苗饲养至化蛹，然后将蛹转移到养虫笼中待其羽化，在笼中悬挂沾有15%蜂蜜水的脱脂棉球供小菜蛾成虫取食，并定期更换新的脱脂棉球，在笼内放置方形蜡纸供其产卵，每天将产有卵的蜡纸转移到放有甘蓝叶的养虫缸内待其孵化，全程置于人工气候箱内，饲养条件：温度（25±1）℃，相对湿度60%～70%，光照条件L/D=16h/8 h。

1.3供试药剂

97.2%阿维菌素（abamectin，河北威远生物化工有限公司）；97 % 茚虫威（indoxacarb）美国杜邦公司；95.3%氯虫苯甲酰胺（chlorantraniliprole，上海悦联化工有限公司）；95%高效氯氟氰菊酯（Beta-Cypermethrin，江苏扬农化工集团有限公司）；97%定虫隆（chlorfuazuron，石家庄济泰三沐化工有限公司）；90%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（emamectin benzoate，河北威远生物化工有限公司）；16 000 IU/mg 苏云金杆菌粉剂（bacillus thuringiensis，扬州绿源生物化工有限公司）；90%多杀菌素（spinosad，美国陶氏公司）；94.5% 溴虫腈[chlorfenapyr，巴斯夫（中国）有限公司]。

1.4测定方法

参照 Tabashnik 和 Cushing[10]提出的叶片浸渍饲喂法，对小菜蛾3龄幼虫进行毒力测定。根据预备试验的结果，先用0.1% Triton X-100 溶液等比级数稀释药剂，顺次配制5个系列浓度，以清水作为对照。将新鲜洁净的甘蓝叶（避开主脉）用打孔器制成直径为6.5 cm的圆形叶片。将叶片在系列浓度的药液中浸渍10 s，搁置于平板上自然风干后放置在事先垫有润湿的滤纸的培养皿中，每个培养皿中接入10头小菜蛾试虫，每个处理4次重复。将培养皿置于温度为(25±1)℃，相对湿度60%～70%，光周期L∶D=16∶8的人工气候箱中，饲养条件同1.2放置48 h后检查试虫的死亡情况，用毛笔尖轻触虫体，不动者是为死亡。室内毒力测定结果用DPS软件进行分析处理。

2　结果与分析

2.1小菜蛾对9种杀虫剂的敏感毒力基线

采用浸叶法建立了小菜蛾敏感品系3龄幼虫敏感独立基线，从表中的结果得知，小菜蛾的敏感品系对不同的杀虫剂的敏感性不同，对阿维菌素的敏感性最高，LC50仅为0.033 mg/L，对高效氯氟氰菊酯的敏感性最低，LC50为3.282 mg/L。敏感性由高到低依次为阿维菌素＞多杀菌素＞甲维盐＞茚虫威＞苏云金杆菌＞氯虫苯甲酰胺＞定虫隆＞溴虫腈＞高效氯氟氰菊酯。

2.2小菜蛾对9种药剂的抗药性监测

从调查结果（表2）可以看出相对于敏感种群，湖南3个地区小菜蛾田间种群对9种杀虫剂的抗药性差异较大，其中对高效氯氟氰菊酯（RR=108.7～207.9）的抗性水平最高，长沙地区达到了极高水平抗性，对阿维菌素（RR=57.6～95.0）、茚虫威（RR=71.2～91.2）、定虫隆（RR=40.6～53.0）表现为高等水平抗性，对溴虫腈（RR=21.2～25.6）、甲维盐（RR=21.4～31.6）、多杀菌素（RR=15.2～27.3）表现为中等水平抗性，对氯虫苯甲酰胺（RR=4.4～7.9）、苏云金杆菌（RR=5.3～10.5）主要表现为低水平抗性。

表1　小菜蛾敏感种群对9种药剂的敏感基线

图2　湖南部分地区小菜蛾田间种群对9种杀虫剂的抗性水平监测

3　讨 论

试验选用9种在田间小菜蛾防治过程中应用广泛的药剂，对2015年湖南省长沙、茶陵和祁阳3个县的小菜蛾田间种群进行了抗药性监测，随着阿维菌素和茚虫威推广使用的时间越来越长，它们的复配制剂大量、频繁的使用，其防治效果明显下降，害虫的抗性水平不断提高。黄雄英等[11]的研究表明2006年长沙地区小菜蛾对阿维菌素、茚虫威的抗药性倍数仅为18.2、11.7倍，而试验中长沙地区小菜蛾对阿维菌素和茚虫威的抗药性倍数达到了95倍和108.5倍。高效氯氟氰菊酯表现为高水平至极高水平抗性，说明阿维菌素、茚虫威和高效氯氟氰菊酯这3种药剂已经不适合继续作为这3个县小菜蛾防治的主要药剂。试验结果发现3个县对溴虫腈、甲维盐和定虫隆表现为中等水平抗性，应当适当的降低这3种药的使用频率，减少其使用量。氯虫苯甲酰胺属于邻酰胺基苯甲酰胺类杀虫剂，其作用位点是鱼尼丁受体，通过活化鱼尼丁受体来到达杀虫的目的[12-13]，试验发现小菜蛾田间种群对该药较为敏感，因此氯虫苯甲酰胺可以作为长沙、茶陵和祁阳县小菜蛾防治的主要药剂之一。此外，试验结果还表明微生物源低毒杀虫剂——苏云金杆菌表现出低水平抗性，所以这两种药剂可以在3个县轮换使用。研究还发现长沙地区小菜蛾的抗药性水平普遍高于其他两个地方，这可能是因为长沙地区属于湖南的平原地带，因为有良好的经济效益，该地区的十字花科蔬菜的复种指数较高，这种连续性的种植十字花科蔬菜导致了小菜蛾有着丰富的寄主植物，有利于其种群繁殖，致使农民使用化学农药防治的次数相对更多，所以该地区的表现出相对较高的抗性水平。

表2　湖南部分地区小菜蛾田间种群对9种杀虫剂的抗性水平

目前，小菜蛾的抗药性发展越来越快，抗药性的治理也越发困难，因此应该做好小菜蛾的抗药性监测。因地制宜，根据不同地区小菜蛾抗性监测结果交替轮换使用敏感，低抗药剂、合理混用和使用增效剂等手段，并结合农业防治、生态防治、生物防治等措施，在减缓抗药性的发展速度的同时提高防治效果。

[1]Sarfraz R M，Dosdall L M，Keddie A B，et al．Larval survival，host plant preferences and developmental responses of the diamondback moth Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) on wild brassicaceous species[J]．Entomological Science，2011，14（1）：20-30．

[2]梁 沛，高希武，郑炳宗，等．小菜蛾对阿维菌素的抗性机制及交互抗性研究[J]农药学学报，2001，3（1）：41-45．

[3]Zalucki M P，Furlong M J．Predicting outbreaks of a migratory pest: an analysis of DBM distribution and abundance revisited[A].Srinivasan R，Shelton A M，Collins H L．Management of the diamondback moth and other crucifer insect pests：proceedings of the sixth international workshop[A].AVRDC The World Vegetable Center，Shanhua，Taiwan.2011：8-14．

[4]白 滨，刘敏艳．3 种生物杀虫剂防治蔬菜害虫试验研究[J]．甘肃农业科技，2003，（3）：51-53．

[5]Ankersmit G W．DDT-resistance in Plutella maculip ennis(curt.)(Lep.) in Java[J]．B.EntomolRes，1953，44（3）：421- 425．

[6]Barroga S F．A survey of diamondback moth population for resistance to the insecticides in the Philippines [D]．Los Banos:Univ Philippines，1974.117．

[7]The Sixth International Workshop on Management of the Diamondback Moth and Other Crucifer Insect Pests[M].AVRDCWorldVegetableCenter, 2011.

[8]Altmann J A．An investigation of resistance in cabbage moth (Plutellaxylostella L.) to pyrethroids in the Lockyer Valley[J]．Graduate Diploma, Queensland Agricultural College，1988．

[9]Hama H .Insecticide resistance characteristic of the diamondback moth [C].Talekared NS．Management of the diamondback moth and other crucifer pests．Proceedings of the Second International Work shop，1992：455-463．

[10]Tabashnik B E，Cushing N L，Johnson M W．Diamondback moth (Lepidoptera: Plutellidae) resistance to insecticides in Hawaii: intra-island variation and cross-resistance[J]．Journal of Economic Entomology， 1987，80（6）：1091-1099．

[11]黄雄英，周小毛，柏连阳.长沙地区小菜蛾对13种药剂的抗药性测定.植物保护，2008，34（5）：146-149．

[12]孙丽娜，闫晓静，芮昌辉.以昆虫鱼尼丁受体为靶标的化合物活性筛选方法研究进展[J]．农药学学报，2010，12（4）：402-407．

[13]张一宾．鱼尼汀受体抑制剂类杀虫剂的研发现况[J].世界农药，2008，30（1）：1-8．

（责任编辑：肖 亮）

Determination of Plutella xylostella (L.)Resistance to Nine Insecticides in Field Populations

ZHU Hang，ZHOU Xiao-mao
（Hunan Agricultural Biotechnology Research Center, Changsha 410125, PCR）

The resistance of field population of Plutella xylostella to nine insecticides in three production areas of vegetables (Changsha Country of Changsha City, Chaling Country of Zhuzhou City and Qiyang Country of Yongzhou City) in Hunan province was determined by leaf-dip method under experimental conditions.The results showed that the P.xylostella have an extremely high level of resistance to beta-cypermethrin and high level of resistance to Chlorfluazuron, abamectin and indoxacarb.Mean while it have moderate level of resistance to spinosad,chlorfenapyr and emamectin benzoate and remain a relatively high level of sensitivity to chlorantraniliprole and bacillus thuringiensis(Bt).Therefore, the prevention of Plutella xylostella would focus on the alternative use of spinosad,chlorfenapyr, emamectin, chlorantraniliprole and bacillus thuringiensis.what’s more, we must stop using beta-cypermethrin so as to delay the generation and development of resistance to insecticides.

Plutella xylostella; insecticide; drug resistance determination

S572

A

1006-060X（2016）11-0049-03

10.16498/j.cnki.hnnykx.2016.011.015

2016-08-17

国家自然科学基金（31371966）

朱 航（1990-），男，湖南益阳市人，研究实习员，主要从事农药毒理学及害虫抗药性相关研究。

周小毛