降解检材亲缘关系鉴定1例

刘亚举，齐孝蕊（许昌市公安局刑事科学技术研究所，河南许昌461000）



降解检材亲缘关系鉴定1例

刘亚举，齐孝蕊
（许昌市公安局刑事科学技术研究所，河南许昌461000）

关键词：法医遗传学；亲子关系；X染色体；短串联重复序列；插入/缺失

1案　例

1.1简要案情

1998年10月末，在某钢材市场的大门处发现一名女性死者，系机械性窒息死亡，经目击者证实其是来讨账的，而债务人王某（系钢材市场商户）已失踪。2013年5月，在外省将潜逃的王某抓获，并供述了死者的家庭住址，办案人员送检死者疑似父母生物样本和案发时提取的死者血纱布，要求DNA检验确定身源。1.2检验过程及结果

取死者血样检材适量，按照磁珠法提取基因组DNA，用30 μL纯水进行洗脱。按IdentifilerTMPlus试剂盒（美国AB公司）、Investigator®DIPplex试剂盒（德国QIAGEN公司）和AGCU X-12试剂盒（无锡中德美联生物技术有限公司）说明书配制PCR反应液，在9700型扩增仪（美国AB公司）上采用10μL扩增体系，模板DNA为1、2、4μL进行梯度扩增，其中IdentifilerTMPlus试剂盒分28和30个循环进行扩增、Investigator® DIPplex和AGCU X-12试剂盒进行30个循环扩增。扩增产物在3130型遗传分析仪（美国AB公司）上检测，用GeneMapper ID-X软件进行STR分型。

死者血纱布结果是，IdentifilerTMPlus试剂盒采用2 μL模板DNA经30个循环扩增，检出的STR基因座数最多，为12个STR基因座分型（其中CSF1PO、D16S539、D2S1338和D18S51基因座未检出）；而Investigator®DIPplex和AGCU X-12试剂盒采用1 μL模板DNA进行30个循环扩增即可检出全部基因分型；检出的基因分型均小于260bp。

1.3鉴定意见

疑似父母与女死者11个常染色体STR基因座、12个X-STR基因座和30个插入/缺失（insertion/deletion，InDel）位点的基因型符合生物学上的亲缘关系。

2讨　论

在本案中，通过DNA提取、PCR扩增方法的改善，以及PCR试剂盒的选择使用，检出的基因分型均在260 bp以下，说明死者血样DNA已降解。微量、降解DNA检材采用常用试剂盒进行检验，大片段的基因座常不能扩增成功，针对这样的情况，一般采用MiniFiler[1]、AGCU Mini[2]进行补充检验，但miniSTR也有等位基因丢失、染料污斑、片段长度确定难等缺陷[3]。而InDel和单核苷酸多态性（SNP）为二等位基因，具有检测片段短、突变率低的优点，适合微量、降解的生物样本进行个体识别和亲缘关系鉴定。

本例DNA检验采用的Investigator®DIPplex试剂盒包含30个独立常染色体InDel，兼具STR和SNP的优点，分布在19个常染色体上，扩增子片段短（70~ 205bp），适合微量降解的现场检材；X-STR与常染色体STR具有相同的效力，通常应用在一些特殊的亲缘关系（如父女关系）鉴定中，由于AGCU X-12试剂盒能检测X染色体上的12个miniSTR（68~240 bp），因此也适用于微量降解检材的检验。本案例属于父母皆疑，将父母作为一个整体考虑时，他们与女儿在30个InDel和12个X-STR基因座的基因型符合孟德尔遗传规律，虽然其系统效能不足以满足鉴定需求，但同时结合所检出的11个常染色体STR结论，能够确定该死者的身源。

本案检验提示，随着微量、陈旧降解检材DNA提取方法的成熟，PCR扩增试剂盒的选择也至关重要，虽然二等位基因的SNP和InDel不可以替代常染色体STR，但另辟蹊径能够拓展DNA技术在法庭科学中的应用，促进DNA技术的深度应用。

参考文献：

[1]唐建平，吴丹，张晨，等. MiniFiler试剂盒运用于法医微量物证的检验[J].法医学杂志，2007，23（4）：304-306.

[2]苏艳佳，吴微微，郝宏蕾，等. AGCU Mini系统在法医学中的应用[J].中国法医学杂志，2012，27（3）：219-221.

[3]王会品，刘超，孙宏钰. MiniSTR技术的研究进展[J].法医学杂志，2006，22（2）：159-160，S1-S2.

（本文编辑：李成涛）

·院系风采·

收稿日期：（2014-09-15）

作者简介：刘亚举（1978—），男，副主任法医师，主要从事法医物证检验及鉴定；E-mail：horse3697@126.com

文章编号：1004-5619（2016）01-0080-01

中图分类号：DF795.2

文献标志码：B

doi：10.3969/j.issn.1004-5619.2016.01.024