索氏抽提法提取酸枣仁油的研究

吴修利，郭春香，姜 雪，高 姗，应王玮

（长春大学食品科学与工程学院，吉林长春130012）

索氏抽提法提取酸枣仁油的研究

吴修利，郭春香，姜 雪，高 姗，应王玮

（长春大学食品科学与工程学院，吉林长春130012）

本实验采用索氏抽提法，以石油醚为溶剂，研究酸枣仁油提取的工艺条件。实验发现，当液料比为3∶80克/毫升，提取时间5小时，提取温度60℃，酸枣仁油提取率最高为32.99%。GC-MS分析表明，酸枣仁油中脂肪酸含有棕榈酸、油酸、亚油酸、硬脂酸、花生酸。

索氏抽提法；酸枣仁油；工艺优化

酸枣仁（Semen ZiziphiSpinosae）为鼠李科枣属植物酸枣的干燥成熟种仁，是中医常用的安神良药，具有养肝宁心、安神敛汗等功效。酸枣仁主要成分有脂肪酸、酸枣仁皂甙、黄酮类化合物、三萜类化合物、甾醇、蛋白质、维生素C以及生物碱等[1，2]。随着现代实验手段的发展，对酸枣仁作用机制及活性成分的研究逐渐深入。研究发现，酸枣仁油作为一种氧化稳定性较好的油脂，是酸枣仁发挥镇静、催眠作用的有效成分，对小鼠产生直接催眠作用且无耐受性[3]。酸枣仁中油含量高于大豆，油中游离脂肪酸含量较高，酸值相对较高，碘值、皂化值与一般油脂接近，油中磷脂含量和大豆油、花生油接近[4]。

本实验以酸枣仁为材料，采用索氏抽提法提取酸枣仁油，对影响酸枣仁油提油率的主要影响因素进行优化设计试验，从而得出提取酸枣仁油的最佳条件，旨在为酸枣仁油的大规模生产提供实验依据。

1　材料与方法

1.1材料试剂与仪器

试验材料与试剂：酸枣仁（长春益民大药房）；石油醚(分析纯，天津天泰精细化学品公司)。

主要仪器：索氏提取器（SXT-02杭州汇尔仪器设备有限公司）；数显恒温水浴锅（DZKW北京市永光明医疗仪器厂）；电热鼓风恒温干燥箱（GZX-9270ME上海博讯实业有限公司）；气质联用色谱仪（GCMS-QP2010日本岛津）。

1.2酸枣仁油含量测定及提取[5]

酸枣仁油脂含量参照GB5512-1985方法进行测定。

酸枣仁油的提取流程：酸枣仁→粉碎→过100目筛→浸提→蒸馏回收有机溶剂→烘干称重→计算提油率

提油率＝（提取油质量／酸枣仁粉末质量）×100%

1.3酸枣仁油脂肪酸组成GC-MS分析

1.3.1酸枣仁油甲酯化 取适量酸枣仁油水解液，加入水解液1.5倍的甲醇，加入甲醇用量2%的硫酸（催化剂），78℃下冷凝回流2.5小时。甲酯化后用95℃的热水洗涤，除去杂质及剩余硫酸，取上层清液进行酸枣仁油含量检测。

1.3.2GC-MS检测条件 取适量甲酯化的样品溶于石油醚配成5%样品溶液，然后用气质联用色谱仪分析脂肪酸组成。色谱分析条件：GSBP-SMS石英毛细管柱（30m×0.25mm× 0.5μm）。采用程序升温，GC柱箱温度 190℃，最终温度300℃，进样口温度 250℃，线速度 30cm/s，吹扫流量3.0mL/min，分流比40∶1。MS离子源温度200℃，接口温度200℃，溶剂延迟时间2分钟。

2　结果与分析

影响酸枣仁油提取率的因素很多，如溶剂种类、颗粒直径大小、提取温度和时间等，本研究探讨提取温度、固液比、提取时间三个主要影响因素。通过改变单因素筛选出最适宜的提取条件，利用正交试验进行优化。

2.1固液比对酸枣仁油提取率的影响

提取溶剂为石油醚，称取粉碎粒度60目的酸枣仁3克，55℃提取3小时，分析不同固液比对酸枣仁提油率的影响，结果见图1。酸枣仁提油率随固液比的增加基本呈平稳趋势，当固液比3∶70（克/毫升）时提油率较高。索氏抽提过程溶剂量要足以完成虹吸，而且要能够充分的溶解酸枣仁中所含的油，但溶剂量过多一方面会造成浪费，另一方面也会增加后处理负担，因此选取固液比3∶70（克/毫升）。

2.2提取温度对酸枣仁油提取率的影响

称取粉碎粒度60目的酸枣仁3克，固液比3∶70（克/毫升），不同提取温度提取3小时，分析温度对提油率的影响，结果见图2。随温度的增加，提油率缓慢增加，在60℃达到最高值。由于选用的石油醚沸点为30℃～60℃，当温度超过60℃后，会造成石油醚回流速度过快，难以完全提取滤纸包中的油脂。综合提油率、成本等因素选定60℃作为提取温度。

2.3提取时间对酸枣仁油提取率的影响

称取粉碎粒度60目的酸枣仁3克，固液比3∶70（克/毫升），在60℃提取温度条件下，分析提取时间对提油率的影响，实验结果见图3。

当提取时间从2小时增至4小时时，提油率变化较明显。之后，随着提取时间的延长，酸枣仁油得率变化较缓慢，这说明4小时提油基本完成。

2.4正交优化试验

通过对单因素的筛选，实验确定了三因素三水平正交试验，以提油率作为考察指标，试验方案如下：

图1　不同固液比对提油率的影响

图2　不同提取温度对提油率的影响

图3　不同提取时间对提油率的影响

表1　正交试验因素设计表

表2　正交试验结果

由极差分析可知，对酸枣仁出油率的影响因素从大到小依次为：提取温度＞提取时间＞固液比。提取条件的优化组合为A3B3C2，即最佳提取工艺为提取温度60℃，提取时间5小时，固液比为3：80（克 /毫升），该条件最大提油率为32.99%。

2.5GC-MS分析

根据酸枣仁油脂肪酸甲酯的总离子流色谱图（TIC），通过NIST05质谱图库对质谱数据进行检索，并结合文献进行人工分析、鉴定，采用归一化法得出各组分的相对含量。GC-MS分析表明，酸枣仁油中主要脂肪酸组成为：棕榈酸15.04%，亚油酸12.77%，油酸36.73%，硬脂酸31.36%，花生酸4.11%。

3　结论

以石油醚为溶剂，采取索氏抽提法提取酸枣仁油。试验考察了固液比、提取温度和时间等因素，选取影响酸枣仁油提取率的主要因素进行正交试验，得到最佳提取条件温度为60℃，提取时间为5小时和固液比为3∶80（克/毫升），该条件出油率可达32.99%。酸枣仁油GC-MS鉴定结果，其中饱和脂肪酸占46.40%，主要是棕榈酸及硬脂酸，不饱和脂肪酸占54.60%，主要是油酸及亚油酸。

[1]祝洪艳,林海成,杨鹤,等.中心组合设计——响应面法优选酸枣仁总皂苷的提取工艺研究[J].食品安全质量检测学报,2014(11):3718-3726.

[2]张巧月,杨浩天,史贺,等.HPLC-MS法同时测定酸枣仁中9种成分[J].中草药,2015,46(01):123-127.

[3]周永红,王立升,李伟光.酸枣仁油理化特性及脂肪酸组成分析[J].中国油脂,2005,30(09):68-69.

[4]卢奎,张玲丽,王萌,等.酸枣仁油的理化性质及成分分析[J].中国油脂,2006,31(08):70-72.

[5]罗程佳,林华庆,余楚钦,等.超临界CO2萃取法、超声法与压榨法提取青刺果油试验比较[J].安徽农业科学,2015(29): 19-20.

吉林省教育厅吉教科合字〔2014〕第288号

TQ644

ADOI编号：10.14025/j.cnki.jlny.2016.22.029

吴修利，博士，长春大学食品科学与工程学院，副教授，研究方向：天然产物的开发利用。