固相微萃取—气相色谱/质谱法测定菊花的挥发性成分

王 聪 ， 谢 磊 ， 康凌之

(杭州职业技术学院 临江学院 ， 浙江 杭州 310018)



固相微萃取—气相色谱/质谱法测定菊花的挥发性成分

王 聪 ， 谢 磊 ， 康凌之

(杭州职业技术学院 临江学院 ， 浙江 杭州 310018)

采用顶空固相微萃取—气相色谱/质谱法测定了杭菊中的挥发性成分。结果表明，0.50 g 样品装入顶空样品瓶中，用聚四氟乙烯隔垫密封，80 ℃恒温水浴预热30 min，将萃取头顶空吸附30 min，在GC进样口250 ℃解吸5 min，经GC和MS分析，产生近70个色谱峰，对主要的22个物质进行鉴定。本法快速、简便、准确，确为药材质量控制的良好方法。

顶空固相微萃取 ； 气相色谱/质谱法 ； 指纹图谱 ； 菊花

0 前言

菊花(Chrysanthemi Flos)为菊科植物菊的干燥头状花序。药材按产地不同，分为“亳菊”、“滁菊”、“贡菊”、“杭菊”。菊花性甘、苦，微寒，主要含有萜类、黄酮类、有机酸类、生物碱类等活性物质。现代药理研究表明，菊花具有广泛的生物活性，如抗炎、抗氧化性、抗肿瘤、保护心血管等作用[1]。固相微萃取(SPME)是20世纪90年代出现的一种无溶剂样品前处理技术，它集采集、萃取、浓缩、进样于一体，能方便地与气相色谱等一起联用，快速有效地分析样品中的痕量有机物，近年来被成功应用于厚朴、藿香、白头婆等药材的指纹图谱分析[2-4]。分析比较不同产地铁皮石斛的裂解气相指纹图谱，采用浙江桐乡的杭菊，用HS-SPME-GC方法，产生近70个色谱峰，结合相关文献和质谱分析，共鉴定出22个挥发性化学物质[5]。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

美国 Agilent 7890A/5975C 气相色谱/质谱联用仪；美国Agilent 7890A 气相色谱仪，配氢火焰检测器(FID)；美国Supelco 手动固相微萃取装置，配65 μm PDMS/DVB萃取头。杭菊样品购于中药房，取干燥菊花样品10 g研磨成粉过120 μm(120目)筛，备用。

1.2 实验过程

将粉碎后的0.50 g 样品装入 20 mL 螺口顶空样品瓶中，用聚四氟乙烯隔垫密封，水浴80 ℃恒温预热30 min，将固相微萃取器的萃取头通过聚四氟乙烯隔垫插入到容器中，顶空吸附30 min。在GC进样口250 ℃解吸5 min，经GC和MS进行分析。

SPME-GC分析装置为美国RESTEK Rtx-1701石英毛细管柱(30 m × 0.25 mm × 0.25 μm)。柱箱升温程序：初始温度35 ℃(保持2 min)，以5 ℃/min速率升至200 ℃(保持15 min)；进样口温度：250 ℃。不分流模式；载气：氦气；流速：1 mL/ min。FID温度：300 ℃。SPME热解析温度250 ℃，保持5 min。MS条件电子轰击(EI)离子源，电离能量70 eV，温度：230 ℃。扫描范围50～550 m/z；传输线温度280 ℃。

2 方法与结果

2.1 固相微萃取——气相色谱图

按照上述方法节制备样品并进行顶空吸附，SPME-GC条件下测定杭菊样品。图1即为样品在80 ℃下HS-SPME-GC得到的色谱图。由图1可见，菊花顶空固相微萃取产生近70个色谱峰，选择有效成分色谱峰、相对强度较强为考察对象，即保留时间为35 min内的1～22号峰。

图1 S5菊花HS-SPME-GC图谱及共有峰

2.2 杭菊挥发性成分鉴定

结合相关文献[6-8]、质谱分析可知，大部分为倍半萜烯烃及其氧化衍生物。图1中3为樟脑，4为龙脑，9为菊酮，1，5～8和10～12为倍半萜烯烃，分别为α-蒎烯，β-榄香烯，丁香烯，石竹烯，α-姜黄烯，β-石竹烯，β-和β-红没药烯；18～22为倍半萜的氧化衍生物，分别为桉叶醇、雪松醇、桉叶烯醇、杜松醇、红没药醇。樟脑、龙脑具有提神醒脑作用，α-蒎烯具有抗氧化作用、β-榄香烯具有抗癌作用。

3 结论

本研究采用固相微萃取—气相色谱测定杭菊的挥发性成分，此法为一种无溶剂样品前处理技术，快速有效地分析天然动植物中的痕量有机物。样品不需要进行复杂的前处理，减小了因前处理带来的测试误差，同时也避免了因大量使用溶剂而造成的环境污染。本法适用于具有挥发性气味的天然产物分析。

[1] 瞿 璐,王 涛,董勇喆,等.菊花化学成分与药理作用的研究进展[J].药物评价研究,2015,38(1):98-104.

[2] 林 茵,王 麟,张 静,等.厚朴炮制前后挥发油化学成分的GC-MS分析[J].中草药,2010,41(8):1261-1264.

[3] 李昌勤,姬志强,康文艺.藿香挥发油的HS-SPME-GC-MS分析[J]. 中草药,2010,41(9):1443-1444.

[4] 杨再波,钟才宁,孙成斌,等. 白头婆挥发油的固相微萃取分析[J].中国药学杂志,2008,43(15):1188-1190.

[5] 王丽丽,王 聪,潘再法,等. 铁皮石斛的裂解气相色谱指纹图谱及其系统聚类分析[J]. 色谱,2008,26(5):613-617.

[6] Yuan Jun,Hao Li jun,Wu Gang,et al.Effects of drying methods on the phytochemicals contents and antioxidant properties of chrysanthemum flower heads harvested at two developmental stages[J].Journal of Functional Foods,2015,19:786-795.

[7] Wang Tao,Guo Qiao sheng,Mao Peng fei.Flavonoid accumulation during florescence in three Chrysanthemum morifolium Ramat cv Hangju genotypes[J].Biochemical Systematics and Ecology,2014,55:79-83.

[8] 高申蓉,吕翼,卢金清.固相萃取——气质联用分析菊花挥发性化学成分[J].中国医院药学杂志,2014,34(5):380-383.

2016-07-21

庄心生(1974-)，男，高级工程师，从事企业生产一线技术管理工作，电话：18537512345；联系人：王留栓(1972-)，男，高级工程师，从事企业技改管理工作，电话：13939953552。

•分析测试•

O657.71

B

1003-3467(2016)11-0050-02