MGD伴蒸发过强型干眼症患者泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平与眼部体征的关系

张海霞，冯雪云，张林昌

(天津市第五中心医院，天津300450)



MGD伴蒸发过强型干眼症患者泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平与眼部体征的关系

张海霞，冯雪云，张林昌

(天津市第五中心医院，天津300450)

目的 观察睑板腺功能障碍(MGD)伴蒸发过强型干眼症患者泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)水平变化，并探讨其与眼部体征的关系。方法 选择MGD伴蒸发过强型干眼症患者90例(观察组)及健康志愿者30例(正常对照组)，均行泪河高度检测、泪液分泌试验、泪膜破裂时间测算、角膜结膜荧光染色评分、睑板腺功能评分5项检查；用ELISA法检测泪液中fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平；用Spearman秩相关分析fractalkine/CX3CL1、IL-1 Ra水平变化与患者眼部体征的关系。结果 两组泪河高度、泪膜破裂时间、角膜结膜荧光染色评分、睑板腺功能评分比较差异有统计学意义(P均<0.05)。观察组泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平高于对照组(P均<0.05)。观察组泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平与泪液分泌量呈负相关(r分别为-0.475、-0.684，P均<0.05)，IL-1Ra水平与泪膜破裂时间呈负相关(r=-0.529，P<0.05)。结论 MGD伴蒸发过强型干眼症患者泪液中fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平升高；IL-1Ra与泪膜稳定性、泪液分泌有关，Fractalkine/CX3CL1与泪液分泌有关。

干眼症，蒸发过强型；睑板腺功能障碍；fractalkine/CX3CL1；白细胞介素1受体拮抗剂；眼部体征

干眼症是由于泪液的量、质或流体动力学异常引起的泪膜不稳定和(或)眼表损害，从而导致眼部不适及视功能障碍的一类疾病[1]。炎症反应是干眼症发生的中心环节。有研究提出，干眼症急性和慢性炎症机制假说[2]，从炎症方面进一步阐明干眼症的发病机制和临床合理治疗方法。睑板腺功能障碍(MGD)是一种慢性、弥漫性睑板腺异常疾病。据报道超过87.6%的干眼症患者与MGD有关[3]。本研究观察由于MGD导致的蒸发过强型干眼症泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)水平变化，并分析二者与眼部体征的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2014年2月～2015年1月本院就诊的干眼症患者90例(观察组)，均符合干眼症诊断标准[1]，男27例、女63例，年龄(57.7±12.5)岁。患者入选标准：干眼相关症状至少持续存在6个月；近3个月内除人工泪液外无其他治疗史；停用药物至少1周；均为伴有睑缘改变和睑板腺疾病；有或无眼表损害；伴有异常泪膜破裂；有正常泪液生成；角结膜染色为阳性。排除标准：既往或现有其他眼病史；有手术或隐形眼镜配戴史；其他系统疾病(除外不需药物控制的高血压或高脂血症)。同期选取健康志愿者30例作为对照组，男8例、女22例，年龄(53.1±8岁)；无妊娠、无眼病史、无眼部异常症状体征、无隐形眼镜配戴史、未服用任何药物。两组性别、年龄比较差异无统计学意义，具有可比性。两组均知情同意。

1.2 眼部体征检查 ①泪河高度检测：利用裂隙灯测量下睑中央泪河高度。②泪液分泌试验：采用美国博士伦公司提供的Whatmann 41号滤纸(5 mm×35 mm)，测量患者不滴用表面麻醉药状态下滤纸5 min的湿长代表泪液分泌量。③泪膜破裂时间测算：将1%荧光素钠溶液滴入结膜囊内，患者连续轻微眨眼3次后计时[4]，重复3次取平均值。④眼表损害程度评价：采用角膜结膜荧光染色评分。将1%荧光素钠滴入结膜囊内，在蓝钴光裂隙灯下观察，按牛津方案[5]行角膜结膜染色分级。角膜和结膜各取5个区域计分：中央、下方、上方、鼻侧和颞侧，各个区域均1分，总得分为5个区域之和，得分越高眼表损害越严重。⑤睑板腺功能评分：无症状、无异常体征，计0分；无症状或轻微症状，临床体征示睑脂分泌异常，无新生血管，无充血，计1分；轻到中度症状，临床体征示睑脂分泌异常，睑缘变钝圆或增厚，轻度新生血管增生有充血，计2分；中到重度症状，临床体征示睑脂分泌异常，睑缘明显增厚增生，新生血管明显增生充血，计3分。统计各项总分。

1.3 泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra检测 自外眦角用微量吸管无创伤性采集泪液1 μL，按1∶10比例稀释入含Beadlyte细胞因子分析缓冲液(冰预冷)的无菌试管。采用ELISA法检测泪液炎性因子fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平。

2 结果

2.1 两组眼功能检查指标比较 除滤纸湿长外，两组泪河高度、泪膜破裂时间、角膜结膜荧光染色评分、睑板腺功能评分比较差异有统计学意义(P均<0.05)。见表1。

表1 两组眼功能检查指标比较±s)

2.2 两组泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平比较 观察组泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平[(965±1)、(50 216±1)pg/mL]高于对照组[(73±4)、(6 875±4)pg/mL]，比较差异有统计学意义(P均<0.05)。

2.3 观察组泪液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平与眼功能检查指标的关系 经Spearman相关分析结果显示，观察组泪液fractalkine/CX3CL1水平与泪液分泌量呈负相关(r=-0.475，P<0.05)，与泪膜破裂时间、泪河高度、角膜结膜荧光染色评分、睑板腺功能评分无相关性。观察组泪液IL-1Ra水平与泪液分泌量(滤纸湿长)呈负相关(r=-0.684，P<0.05)，与泪膜破裂时间呈负相关(r=-0.529，P<0.05)，与泪河高度、角膜结膜荧光染色评分、睑板腺功能评分无相关性。

3 讨论

干眼症是一种眼表炎症，临床上常发现患者体征和症状不相符。特别是轻、中度干眼症患者，虽然只具有轻、中度眼表体征，却有中、重度临床症状[6]。多数干眼症与MGD有关，通过症状询问和裂隙灯下体征检查即可确诊MGD。在确诊MGD的基础上，如果患者出现泪膜破裂时间异常即可确诊为MGD致蒸发过强型干眼。同时，患者可伴有角膜荧光染色的异常。眼表与泪膜相互依赖，是构成眼部微环境的重要组成部分。泪膜的稳定与神经、激素的精细调节有关，它们之间构成一个整体功能单位，其中任何一个环节的异常都可导致泪液质、量及泪液动力学的异常，从而导致泪膜的不稳定和眼表异常，最终导致干眼病。免疫炎症反应是各种类型干眼症发病的共同机制，睑板腺分泌的泪液是组成泪膜脂质层的主要成分，睑板腺功能障碍，导致脂质合成和分泌的减少，泪膜破裂时间缩短，泪膜蒸发率升高，是导致蒸发过强型干眼症的主要原因。本研究发现，观察组泪河高度高于对照组，其可能与干眼症泪液清除延迟、泪液表面张力增大有关。观察组泪膜破裂时间短于对照组，角膜结膜荧光染色评分高于对照组，说明干眼症影响了眼表的稳定性，已对眼表造成损害。观察组睑板腺功能评分高于对照组，说明患者为MGD伴蒸发过强型干眼症。

Fractalkine/CX3CL1属于CX3C类炎症趋化因子，具有特殊的分子结构，既有可溶性形态又可以膜结合形态存在[7]。Fractalkine/CX3CR1参与众多疾病的病理过程，通过调节单核细胞浸润及下游炎症因子释放，直接或间接影响纤维增生过程。正常人泪液中含有一定量的fractalkine/CX3CL1,本研究发现，在MGD致蒸发过强型干眼症患者泪液中水平升高，可能会促进眼表局部炎症的进展。目前已有人进行了Fractalkine/CX3CL1对Sjögren综合征动物模型作用的研究[8]，但是，其在人类干眼症中的具体作用机制仍不明确。促炎性细胞因子IL-1参与人类多种炎症性疾病(如感染性休克、风湿性关节炎等)的病理过程，是一种重要的炎症和免疫介质。IL-1与许多眼科疾病相关，特别是与角膜及眼表疾病(如圆锥角膜、无菌性角膜溃疡等)关系尤为密切。IL-1有IL-1α和IL-1β两种促炎性形式。有研究观察到泪液中成熟形式的IL-1β浓度与角膜荧光染色检测眼表破坏的严重程度相关，IL-1β在干眼症的发生、发展过程中起着非常重要的作用[9]。在许多炎性疾病中，IL-1的活性是通过其天然的受体拮抗剂IL-1Ra来调节的。正常泪液中存在高水平IL-1Ra，浓度大约是IL-1α和IL-1β浓度的15～100倍。这可能与正常状态下泪液维持稳态，抑制IL-1介导的眼表炎症反应的发生有关[10]。IL-1Ra基因包含2个内含子，有着众多的多态性等位基因；IL-1Ra竞争性结合IL-1受体后，并不会激活细胞内信号传导通路，而是阻断下游级联炎症反应，作为IL-1活性抑制剂发挥作用。本研究发现，在MGD所致干眼症患者泪液中有高水平的IL-1Ra。IL-1Ra基因作为可诱导基因，在炎症状态下其表达可上调，这种表达上调在被脂多糖刺激下培养的人角膜上皮细胞中也有发现[10]。本研究发现，fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra在观察组泪液中表达明显增高。两种炎性因子水平均与泪液分泌量呈负相关，说明两种炎性因子均影响了泪液的分泌，在某种意义上显示炎性因子可能导致泪液分泌不足型干眼症。IL-1Ra水平与泪膜破裂时间呈负相关，说明IL-1Ra影响了泪液分泌功能的稳定性。泪液Fractalkine/CX3CL1水平未显示与泪膜破裂时间的相关性，可能与本研究病例不足、研究时间短有关，其结论尚待进一步证实。

目前研究证实，抗炎治疗对MGD有效。糖皮质激素可以显著改善MGD患者的症状和体征，其效果优于非甾体类抗炎药[11]。进一步研究炎性因子的作用，明确下游信号通路的传导途径，采取多效性抑制甚至阻断其下游信号因子，可能会为MGD伴蒸发过强型干眼症的治疗提供新的方向。

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2016-04-19)