冯航
(西安文理学院生物与环境工程学院,陕西西安710065)
蚊香对动物细胞微核的诱导
冯航
(西安文理学院生物与环境工程学院,陕西西安710065)
选用3种不同品牌的盘式蚊香为原料,对老鼠做经口鼻吸入毒性实验,观察老鼠骨髓细胞微核数目,研究不同蚊香产生的毒性。结果表明,使用盘式蚊香会产生微核现象,且绿组高于蓝组;而在实验过程中绿组的保险膜上有明显的黄色污圈,这是由烟尘和焦油产生的,而蓝组没有,究其原因可能在于烟尘和焦油,也就是说微核的产生与烟尘、焦油有关;小鼠体重的变化也和这两个因素有关。
蚊香;微核;骨髓细胞
蚊虫不仅骚扰吸血,且传播多种疾病,故防治蚊虫是控制或消灭蚊媒病的重要措施之一。人类对蚊虫的防治已有悠久的历史,目前防治蚊虫的方法较多,有蚊帐、驱蚊灯、盘式蚊香、电热蚊香片、电热蚊香液和杀虫雾剂等产品,还有起保护作用的驱蚊花露水、驱蚊露和驱蚊霜等。其中蚊香的使用历史较长,多用木粉和人工合成的拟除虫菊酯类农药为有效成分制作而成。
由于木粉燃烧时会产生大量的烟,对人体健康大为不利。因此,近年来人们改用无烟的炭粉代替木粉,由此出现了无烟蚊香。
为了从实验动物整体水平证明烟尘和焦油会导致染色体断裂和基因毒性[1],本实验研究蚊香对小鼠细胞微核率及体重的影响。
1.1实验动物及材料
实验动物:小鼠,24只。
3种品牌的盘式蚊香:超威(绿色、微烟)、枪手(蓝色、无烟)、灭害灵(红色、无烟)。
1.2实验试剂
柠檬酸钠、氯化钾、甲醇、冰醋酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和姬姆萨染液。
1.3实验过程
实验共4组,空白对照6只,实验组根据蚊香种类不同分3组,每组各6只。
1.4建立蚊香环境
实验组:在鼠笼旁燃一盘蚊香,然后用60cm×30cm×30cm的纸箱将蚊香和鼠笼罩住,纸箱上开若干小孔,保证气流通畅,每天8h。
对照组:无蚊香,其余同实验组。
1.5染毒次数及取样时间
每天染毒一次(8h),连续4d,第5天取样观察
1.6观察检验
用拖颈椎法处死小鼠,处死后取出小鼠肱骨,除净上面的肌肉碎渣和结缔组织。
用剪刀剪开肱骨的两端使骨髓露出,将装有2%柠檬酸钠溶液的5mL注射器插入肱骨的上端,缓慢冲洗骨髓腔,冲洗的溶液从股骨下端渗入到离心管中,反复冲洗至股骨变白灰色,经1000rpm离心后弃去上清液。
离心管中加入0.075mol/LKCl5mL用吸管将骨髓细胞吹打成细胞悬液,37℃低渗30min。
沿离心管壁缓慢加入固定液5mL,用吸管吹打成细胞悬液,室温静置20min。离心弃去上清液后加入0.3mL固定液,用吸管轻轻吹打成细胞悬液。
取细胞悬液滴在载玻片上,每个载玻片两端各滴一滴,自然晾干。先用姬姆萨染液染片30min,然后用0.1mol/L的磷酸缓冲液冲洗,吸干水分后待检。选择细胞分布均匀、细胞无损、着色适当的区域镜检,每个小鼠选取3个视野,统计微核和细胞数量,计算微核率。每天对每只小鼠的体重进行称量,计算各组小鼠的平均体重。
实验组中其中一组(灭害灵)的小鼠第一次染毒后3只死亡,故取3只小鼠重新进行第二次实验,但4h后全部死亡,所以这一组不计入统计,直接视为毒性强于其他实验组。
2.1微核结果统计
细胞微核率统计结果见表1。由表1可知,实验组均出现微核现象,与对照组相比微核率高出很多,且绿组微核千分率高于蓝组。
表1 细胞微核率统计
2.2体重影响
小鼠体重统计见表2。由表2可知,与对照组相比,实验组5日内的体重明显降低,其中实验组前2d体重降低明显,随后蓝组体重缓慢上升,绿组缓慢降低。但仍可确定,蚊香对小鼠体重增长有明显抑制作用,但具体的抑制程度因蚊香种类不同而不同。
表2 小鼠平均体重变化
实验表明,使用盘式蚊香会产生微核现象,且绿组高于蓝组。而在实验过程中,绿组的保险膜上有明显的黄色污圈,是由烟尘和焦油产生的[2],蓝组没有,因此原因可能在于烟尘和焦油。也就是说微核的产生与烟尘、焦油有关。小鼠体重的变化也和这两个因素有关,建议使用盘式蚊香选择无烟较好[3]。
[1]曹佳.微核实验在中国的应用、发展与展望[J].遗传,2003,25(1):73-76.
[2]胡文涛.蚊香烟尘和焦油的测定及对小鼠的影响[J].中化卫生杀虫药械,2004,10(2):79-82.
[3]周晓蓉,李百祥,邱向红,等.小鼠骨髓及肝血中嗜多染红细胞微核率的比较[J].卫生毒理学杂志,1999,13(1):66-67.
The Animal Cell Micronucleus Induced by Mosquito Coil
Feng Hang
(Xi’an University,College of Biological and Environmental Engineering,Shanxi Xi’an 710065)
Three different kinds of mosquito coils is used as raw material,the mouse do is inhaled through the nose and mouth toxicity test and observation of the number of mice bone marrow cell micronucleus,study the different mosquito coils incense toxicity. The results showed that using mosquito coils would produce the phenomenon of micronucleus and green group,it was higher than that of the blue group; In the experimental process of Zhonglu group insurance membrane had obvious dirty yellow circle,speculation was produced by smoke and tar,and blue group did not,guess the reason may lie in the dust and tar,that is to say,the production of micronucleus was related to the dust and tar; Changes in body weight of mice was also associated with speculation that the two factors.
Mosquito Coil; Micronucleus; Marrow cells
X834
A
2096-0387(2016)05-0047-02
冯航(1982-),女,陕西西安人,硕士,实验师,研究方向:植物种质资源的开发与利用。