补喂γ-氨基丁酸对哺乳期马驹血浆生化指标及免疫球蛋白含量的影响

赵 芳，陈学济，李晓斌，聂彪彪，杨 帆，杨开伦

(新疆农业大学动物科学学院/新疆肉乳用草食动物营养重点实验室，乌鲁木齐 830052)



补喂γ-氨基丁酸对哺乳期马驹血浆生化指标及免疫球蛋白含量的影响

赵 芳，陈学济，李晓斌，聂彪彪，杨 帆，杨开伦

(新疆农业大学动物科学学院/新疆肉乳用草食动物营养重点实验室，乌鲁木齐 830052)

【目的】研究补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马驹血浆主要生化指标及免疫球蛋白含量的影响，为γ-氨基丁酸在哺乳期马驹的饲养管理提供参考。【方法】选取月龄相近(2.5月龄左右)、体重相近(平均体重为85.79±11.2 (kg))健康哺乳期伊犁马马驹20匹，随机分为4组，每组5匹，分别为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组，各组马驹分别饲喂体重0.6 %的饲粮，在此基础上试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组马驹分别饲喂40、80、120 mg/(匹·d )γ-氨基丁酸。别于试验的第0、30、60和90 d 颈静脉采血。【结果】在整个试验期，各试验组血浆中γ-氨基丁酸含量均高于对照组；30 d时，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组马驹血浆总蛋白含量显著高于试验Ⅲ组(P<0.05)；试验Ⅱ组马驹血浆白蛋白含量极显著高于对照组(P<0.01)；各组间血浆尿素氮含量差异不显著(P>0.05)；试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组马驹血浆中IgA、IgG含量相比对照组均呈增加趋势，分别比对照组高出13.27%、7.12%、4.85%；5.13%、14.09%、12.15%。【结论】补喂γ-氨基丁酸可增加哺乳期伊犁马马驹血浆中γ-氨基丁酸、总蛋白、白蛋白、I gA及I gG含量，但对血浆中球蛋白、尿素氮含量无显著影响。

γ-氨基丁酸；哺乳期马驹；血浆生化指标；免疫球蛋白

0 引 言

【研究意义】伊犁马是我国新疆境内优质马属品种之一，目前占国内运动马数量的60%，其运动性能、产肉产乳性能、适应能力均优于其他国产马品种[1]。马驹在0～24月龄阶段的生长发育情况直接影响到成年期的生产性能，其中哺乳期是马驹器官、体格发育及免疫系统等走向成熟的重要时期。因此，哺乳期马驹的科学饲养对马匹后期健康及生产性能的发挥至关重要。【前人研究进展】γ-氨基丁酸是哺乳动物神经中枢一种重要的神经递质，主要分布在下丘脑区域[2]。γ-氨基丁酸具有促进动物生[3]、提高机体免疫力、调节胃肠道激素分泌[4]等作用。Zhang等[5]研究发现在热应激蛋鸡饲粮中添加50 mg/kg γ-氨基丁酸，可显著提高产蛋量、产蛋率、平均蛋重和蛋壳强度，且测得蛋鸡血清中甲状腺激素、I gG、IgA和总蛋白含量显著升高。Weigert等[6]通过给胃内灌注γ-氨基丁酸的方法发现老鼠胃内胃泌素的分泌量明显增加，而生长抑素的分泌量可被γ-氨基丁酸剂量依赖性的抑制。在21 d断奶仔猪饲粮中分别添加0、50、100 mg/kg γ-氨基丁酸饲喂28 d，结果表明，饲粮中添加50、100 mg/kg γ-氨基丁酸可提高断奶仔猪的采食量和日增重[7]。钟刚[8]给奶牛饲喂10 g/d包被γ-氨基丁酸，可提高血清中甲状腺激素和生长激素水平。【本研究切入点】目前关于γ-氨基丁酸的研究多集中于单胃动物。研究以哺乳期伊犁马马驹为试验动物。【拟解决的关键问题】通过测定血浆中γ-氨基丁酸、总蛋白、白蛋白、球蛋白及免疫球蛋白含量，探究γ-氨基丁酸作为哺乳期马驹饲喂添加剂的可能性。

1 材料与方法

1.1 材 料

试验于2013年7月1日～10月10日在新疆伊犁昭苏军马场进行。

选取月龄相近(2.5月龄左右)、体重相近(平均体重为85.79±11.2 (kg))健康哺乳期伊犁马马驹。

1.2 方 法

表1 试验设计和分组
Table 1 Experiment design and group

组别Groups马匹数Numberofhorse颗粒精料Pelletedconcentrate(kg)粗饲料Roughage(kg)处理Treatment(mg/foal/d)对照组Controlgroup5体重的6%自由采食0γ-氨基丁酸试验Ⅰ组TrailgroupⅠ5体重的6%自由采食40γ-氨基丁酸试验Ⅱ组TrailgroupⅡ5体重的6%自由采食80γ-氨基丁酸试验Ⅲ组TrailgroupⅢ5体重的6%自由采食120γ-氨基丁酸

1.2.1 试验设计

选取月龄相近(2.5月龄左右)、体重相近(平均体重为85.79±11.2 kg)健康哺乳期伊犁马马驹20匹，随机分为4组，每组5匹，分别为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组，各组马驹颗粒饲料的饲喂量为体重的0.6%，粗饲料自由采食，在此基础上试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组马驹分别饲喂40、80、120 mg/(匹·d)γ-氨基丁酸。分别于试验的第0、30、60和90 d 颈静脉采血，收集血浆用于测定血浆中γ-氨基丁酸、生化指标及免疫球蛋白含量。表1

1.2.2 饲养管理及饲粮组成

试验期间，每天08:00 ～19:00 对马驹进行栓系饲养，每天19:00至第2 d 08:00各组马驹进行散养，期间自由摄入母乳、自由饮水、自由采食粗饲料(由紫花苜蓿和小麦秸秆按1∶1比例混合粉碎而成)。颗粒精料平均分为3份，使用料兜分别于每天09:00、13:00、18:00进行饲喂，饲喂量按马驹体重的0.6 %计算进行饲喂，之后每隔30 d进行1次马驹体重称量，按照体重0.6 %计算，调整饲料饲喂量。将定量饲喂的γ-氨基丁酸装入胶囊中于每天09:00放入颗粒经精料中进行补喂。

颗粒精料的组成参照美国国家研究委员会(NRC)[9]马饲养标准中的马驹营养需要量，并制成颗粒精料，直径约0.5 cm，长约1.0 cm至1.5 cm；粗饲料(由紫花苜蓿和小麦秸秆按1∶1的比例混合组成)切短至长度为5 cm后饲喂。颗粒精料组成及营养水平。表2

表2 颗粒精料组成及营养水平 (以干物质计；%)
Table 2 Composition and nutrient levels of the pelleted concentrate(DM basis, %)

原料组成Ingredients配比Ratio营养水平Nutrientlevel含量Content玉米Corn4995有机物OM9338麸皮Wheatbran13粗蛋白CP1886次粉Wheatmidding6中性洗涤物NDF3149大豆粉Soybeanmeal26酸性洗涤物ADF993磷酸氢钙CaHPO42钙Ca072食盐NaCl1磷P033石粉Limestone05预混料Premix1)1赖氨酸Lys025蛋氨酸Met03总计(Total)100

注：预混料为每千克饲粮提供VA 0.03 IU，VB1 0.02 mg，VB2 0.02 mg，VB6 0.01 mg，VC 0.02 mg，VD 0.01 IU，VE 0.5 IU，泛酸0.01 mg，烟酰胺0.01 mg，铜0.25 mg，铁1.07 mg，锰0.81 mg，锌0.74 mg，碘0.06 mg，硒0.14 mg，钴0.03 mg，氯化胆碱0.12 mg

Note：The premix provided the following per kg of diets：VA 0.03 IU，VB1 0.02 mg，VB2 0.02 mg，VB6 0.01 mg，VC 0.02 mg，VD 0.01 IU，VE 0.5 IU，Pantothenic acid 0.01 mg，Nicotinamide 0.01 mg，Cu (as copper sulfate) 0.25 mg，Fe (as ferrous sulfate) 1.07 mg，Mn (as manganese sulfate) 0.81 mg，Zn (as zinc sulfate) 0.74 mg，I (as potassium iodide) 0.06 mg，Se (as sodium selenite) 0.14 mg，Co (as cobalt chloride)0.03 mg，Choline chloride 0.12 mg

1.2.3 血浆采集

分别于试验期间0、30、60、90 d对各组试验马驹用肝素钠采血管进行颈静脉采集血液5 mL，1 500×g离心15 min，吸取上层血浆装入1.5 mL Eppendrof管，-20 ℃冷冻保存待测。

1.2.4 样品测定

血浆中γ-氨基丁酸(GABA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)及尿素氮(BUN)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)采用试剂盒测定(试剂盒购于北京华英生物科技公司)。具体测定方法参照试剂盒说明进行操作。

1.3 数据统计

试验结果以平均数(Mean)±标准差(SD)表示。试验数据均采用SPSS 19.0进行方差分析。各组结果采用Duncan法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马马驹血浆中γ-氨基丁酸含量的影响

补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马马驹血浆中γ-氨基丁酸含量的影响为，在整个试验期，各组马驹血浆中γ-氨基丁酸含量随补喂时间的延长呈下降趋势，但各试验组血浆中γ-氨基丁酸含量均高于对照组。0～60 d时，对照组血浆中γ-氨基丁酸含量急剧下降，而试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组血浆γ-氨基丁酸含量下降趋势较缓慢，由此表明，补喂γ-氨基丁酸可增加哺乳期伊犁马马驹血浆中γ-氨基丁酸含量。表3

表3 补喂γ-氨基丁酸哺乳期伊犁马马驹血浆中γ-氨基丁酸含量变化
Table 3 The effect of supplemented with GABA on the content of GABA in plasma of nursing Yili foals (n=5)

项目Item对照组Controlgroup试验Ⅰ组TrialgroupⅠ试验Ⅱ组TrialgroupⅡ试验Ⅲ组TrialgroupⅢ0d834±065859±029839±043882±05530d720±040726±099777±121770±08460d615±014658±055700±075693±07990d646±080672±073700±142706±067

2.2 补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马马驹血浆主要生化指标的影响

补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马马驹血浆主要生化指标的影响为，0 d时各组马驹血浆中总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮含量无明显差异(P>0.05)。30 d时，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组马驹血浆总蛋白含量显著高于试验Ⅲ组(P<0.05)；试验Ⅱ组马驹血浆白蛋白含量极显著高于对照组(P<0.01)；各组间血浆尿素氮含量差异不显著(P>0.05)。60 d时，各组血浆中总蛋白、白蛋白、球蛋白及尿素氮含量差异不显著(P>0.05)，但各试验组血浆中总蛋白含量均高于对照组；试验Ⅱ组、试验Ⅲ组血浆尿素氮含量低于对照组。90 d时，试验Ⅱ组血浆总蛋白含量显著高于对照组(P<0.05)；而试验Ⅱ组、试验Ⅲ组血浆尿素氮含量低于对照组。在整个试验期间，各试验组马驹血浆中总蛋白、球蛋白含量均呈现出上升趋势，白蛋白含量相对趋于稳定，无显著变化。表4

2.3 补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马马驹血浆中IgA、IgG含量的影响

补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马马驹血浆中IgA、IgG含量的影响为，0、30及60 d时，各组之间马驹血浆中IgA、IgG 含量无显著差异。但90 d时，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组马驹血浆中IgA含量相比对照组均呈增加趋势，分别增加13.27%、7.12%、4.85%，各试验组血浆中IgG含量也呈现出上升趋势，分别比对照组高出5.13%、14.09%和12.15%。表5

表4 补喂γ-氨基丁酸哺乳期伊犁马马驹血浆生化指标变化(n=5)
Table 4 Effect of supplemented with GABA on blood biochemical index of nursing Yili foals(n=5)

项目Item对照组Controlgroup试验Ⅰ组TrialgroupⅠ试验Ⅱ组TrialgroupⅡ试验Ⅲ组TrialgroupⅢ0d总蛋白TP(g/L)589±2305956±2475951±1635798±351白蛋白ALB(g/L)3309±1723434±179345±0993293±238球蛋白GLB(g/L)2581±0922523±0812500±1142504±148尿素氮BUN(mmol/L)402±085423±061374±047408±09530d总蛋白TP(g/L)6041±056ab6111±092a613±016a5944±167b白蛋白ALB(g/L)3365±078Bb3459±029ABab3505±063Aa3401±084ABb球蛋白GLB(g/L)2676±081a2652±101ab2625±073ab2543±093b尿素氮BUN(mmol/L)478±070533±037488±030470±07960d总蛋白TP(g/L)6162±1466340±128628±2126187±182白蛋白ALB(g/L)3383±0933527±1943521±1853448±098球蛋白GLB(g/L)278±1992812±172276±1052739±137尿素氮BUN(mmol/L)449±046489±072438±080405±07490d总蛋白TP(g/L)6238±153b6443±125ab6524±252a6332±128ab白蛋白ALB(g/L)3371±1053400±2283512±263398±157球蛋白GLB(g/L)2866±1393044±2633012±1842933±19尿素氮BUN(mmol/L)460±057464±055439±092440±107

注:同行数据没有肩标或相同为差异不显著(P>0.05)，肩标小写字母不同表示差异显著(P<0.05)，肩标大写字母不同表示差异极显著(P<0.01)。下同

Note: The different capitaletters on the upper side if the data are in same line mean extremely significant difference(P<0.01); the different small letters means significant difference (P<0.05); the same letters or have no letters means no difference(P>0.05). The same as below

表5 补喂γ-氨基丁酸哺乳期伊犁马马驹血浆中IgA、IgG含量变化(g/L；n=5)
Table 5 The effect of supplemented with GABA on content of IgA, IgG in plasma ofnursing Yili foals (g/L, n=5)

项目Item对照组Controlgroup试验Ⅰ组TrialgroupⅠ试验Ⅱ组TrialgroupⅡ试验Ⅲ组TrialgroupⅢ0d免疫球蛋白AIgA318±036299±023303±026291±018免疫球蛋白GIgG2248±181207±0862206±1152059±05830d免疫球蛋白AIgA294±033302±012296±013294±018免疫球蛋白GIgG2172±0692089±0422120±082032±0660d免疫球蛋白AIgA308±016294±022321±035314±023免疫球蛋白GIgG2157±0812106±1522183±1192214±08290d免疫球蛋白AIgA309±047350±037331±056324±051免疫球蛋白GIgG2065±0612171±1962356±2542316±254

3 讨 论

3.1 补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马马驹血浆中γ-氨基丁酸含量的影响

γ-氨基丁酸是哺乳动物神经中枢一种重要的神经递质，主要分布在下丘脑区域。此外，机体很多内分泌器官中如胰腺、胃肠道、卵巢、胎盘和肾上腺髓质均分布有γ-氨基丁酸[2]。γ-氨基丁酸是一种可口服、易吸收而且易透过血脑屏障的脑代谢促进药，且对脑内γ-氨基丁酸代谢具有很高的亲和力[4]。王迪铭等[10]在奶牛饲粮中添加γ-氨基丁酸虽可提高奶牛采食量，但对血清中γ-氨基丁酸浓度无显著影响，可能是由于γ-氨基丁酸在奶牛瘤胃中被降解。而徐同锏等[11]发现在奶牛饲粮中添加包被处理的γ-氨基丁酸可提高血清γ-氨基丁酸含量，并随饲喂剂量的增加呈上升趋势。

试验中，各组马驹血浆中γ-氨基丁酸含量无显著差异，但从0 d至90 d各试验组马驹血浆中γ-氨基丁酸含量均高于对照组。由此表明，补喂γ-氨基丁酸增加哺乳期伊犁马马驹血浆中γ-氨基丁酸含量，与徐同锏等[11]的研究结果一致。

3.2 补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马马驹血浆主要生化指标的影响

动物血液相关生化指标能反映动物机体生理状态和健康状况，可为了解动物的饲养管理和生长发育规律提供重要依据。动物血浆总蛋白包括白蛋白和球蛋白，是动物血液生理生化指标的一项重要指标，可反应动物机体营养状况。血浆白蛋白是机体蛋白质的来源之一，可作为营养物质的载体，维持机体血浆渗透压[12]。血浆球蛋白主要由浆细胞分泌，可反映机体免疫功能。杨兵等[13]在仔猪饲粮中添加30 mg/kg γ-氨基丁酸显著提高了血清总蛋白和白蛋白含量，改善仔猪健康状态。蛋鸽补喂γ-氨基丁酸后，蛋重和产蛋率都有提高，且血清白蛋白和总蛋白含量提高，尿素氮含量降低[14]。

在试验中，30 d时试验Ⅰ组和试验Ⅱ组马驹血浆总蛋白含量高于对照组，各试验组白蛋白水平均高于对照组。90 d时，试验Ⅱ组马驹血浆总蛋白含量显著高于对照组。由此表明，给哺乳期马驹补喂80 mg/(匹·d) γ-氨基丁酸可增加血浆中总蛋白、白蛋白含量，这与杨兵等[13]的试验研究结果相似，可能是由于给哺乳期马驹补喂γ-氨基丁酸有助于机体蛋白质的合成，加快机体对饲粮中氨基酸的消化吸收，从而增加血浆中总蛋白含量。

3.3 补喂γ-氨基丁酸对哺乳期伊犁马马驹血浆IgA、IgG含量的影响

Ratnikov等[15]认为γ-氨基丁酸神经元系统与机体体液免疫应答有关。Jin等[16]研究表明γ-氨基丁酸可促进小鼠肠道IgA和IgG抗体的分泌，Adham等[17]研究发现给人服用100 mg/kg BW γ-氨基丁酸可显著提高其唾液中IgA分泌量。李慧等[18]发现在鸡饲粮中添加γ-氨基丁酸可提高鸡血清中IgA和IgG含量。

在试验中0、30和60 d时，各组马驹血浆中IgA、IgG含量均无明显变化，但在第90 d时，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组血浆IgA水平和IgG水平均高于对照组。其次整个试验期，对照组马驹血浆IgA、IgG水平呈现水平或降低趋势，而各试验组马驹血浆IgA、IgG水平呈上升趋势，这也与各试验组血浆中球蛋白含量增加相符合。由此表明，γ-氨基丁酸对哺乳期马驹血浆IgA、IgG水平具有调节作用，可增强马驹免疫力，但是一个长期而缓慢的调节过程，原因可能是随着马驹生长，其胃肠道消化系统和神经系统进一步发育健全和完善，从而对γ-氨基丁酸和饲料消化利用率提高，γ-氨基丁酸作为神经递质可调节内分泌系统激素的分泌，从而使免疫细胞上的各种和激素受体作出应答，以提高免疫细胞的免疫活性。此外，Hagen等[19]发现γ-氨基丁酸可抑制生长抑素的分泌，生长抑素可抑制IgA、IgG分泌量，提示生长抑素分泌水平降低则血浆中IgA、IgG水平升高。试验中对马驹血浆生长抑素的测定发现，整个试验期各试验组血浆生长抑素水平呈现下降趋势，而与血浆IgA、IgG分泌水平呈上升趋势，这与Hagen等[20]的研究结果相符合。

4 结 论

4.1 给哺乳期伊犁马马驹补喂GABA可提高血浆中GABA含量，且添加80 mg/(匹·d) GABA效果明显。

4.2 给哺乳期伊犁马马驹补喂80 mg/(匹·d) GABA，可提高饲喂30 d时血浆中总蛋白、白蛋白、IgA及IgG含量。

4.3 给哺乳期伊犁马马驹补喂GABA对血浆中球蛋白、尿素氮含量无显著影响。

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Effects of Supplementary GABA on the Concentration of Blood Biochemical Index and Immunoglobulin in Nursing Yili Foals Plasma

ZHAO Fang, CHEN Xue-ji, LI Xiao-bin, NIE Biao-biao, YANG Fan, YANG Kai-lun

(College of Animal Science / Xinjiang Key Laboratory of Meat & Milk Production Herbivore Nutrition, Xingjiang Agriculture University, Urumqi 830052, China)

【Objective】 This experiment aims to study the effects of GABA to nursing foals on the concentrations of blood biochemical index and immunoglobulin in plasma and provide the reference data for GABA in nursing foals growth and development. 【Method】20 health Yili nursing foals of similar body weight (85.79±11.2 kg) and aged 2.5 months old were divided into 4 groups. One group was the control group, the others were trial groups. All foals were fed with the amount of body weight 6%, and allowed free access to dry forage. Besides, each horse of the trial groups was fed with 40, 80,120 mg/d/foal GABA. The jugular blood was sampled at 0, 30, 60 and 90 d of the experiment.【Result】The content of GABA of trial groups were higher than that in control group during the experiment. The content of TP in plasma of trial groupsⅠ,Ⅱat 30 d was higher than that in the trial group Ⅲ(P<0.05), the content of ALB in plasma of trial groupⅡ at 30 d was significantly higher than that in the control group(P<0.01), but there was no significant effect on the content of BUN. The content of IgA, IgG of trial groupⅠ,Ⅱ,Ⅲ showed an increase trend, the content of IgA, IgG of trial groupsⅠ,Ⅱ,Ⅲ were increased 13.27%, 7.12%, 4.85%, 5.13%, 14.09% and 12.15% respectively compared with the control group. 【Conclusion】Fodder supplemented with GABA can increase the content of GABA, TP, ALB, IgA, IgG in plasma, but they had no significant effect on the content of GLB and BUN.

γ-aminobutyric acid; nursing foals; blood biochemical index; immunoglobulin

10.6048/j.issn.1001-4330.2016.05.026

2016-01-04

“十二五”农村领域国家科技计划子课题(2012BAD45B01)

赵芳(1989-)，女，新疆人，博士研究生，研究方向为动物营养与饲料科学，(E-mail)937317612@qq.com

杨开伦(1966-)，男，云南人，教授，博士生导师，研究方向为动物营养代谢与饲料资源开发，(E-mail)yangkailun2002@aliyun.com

S821.5

A

1001-4330(2016)05-0974-07