利拉鲁肽对肥胖大鼠肾脏脂质沉积的影响

刘　剑，吴明昊，山秀杰，张　蕊，高　宇，胡桂才

（1.承德医学院，河北承德 067000；2.承德医学院附属医院）

基础医学

利拉鲁肽对肥胖大鼠肾脏脂质沉积的影响

刘剑1，吴明昊1，山秀杰1，张蕊1，高宇2△，胡桂才2

（1.承德医学院，河北承德 067000；2.承德医学院附属医院）

目的：研究利拉鲁肽对肥胖大鼠肾脏脂质沉积的影响。方法：32只雄性Wistar大鼠随机分为普食组、肥胖组、利拉鲁肽干预1组和利拉鲁肽干预2组，每组8只大鼠。采用高脂饮食制作肥胖大鼠模型，以体重高于普食组20%作为肥胖成模标准，利拉鲁肽干预1组和利拉鲁肽干预2组分别给予不同剂量利拉鲁肽干预2周。分别检测4组大鼠的24小时尿蛋白（MAU），血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）和游离脂肪酸（FFA）的含量，以及肾脏甘油三酯（TG）和甘油二酯（DAG）的含量。结果：与普食组比较，肥胖组大鼠MAU、Scr、BUN、FFA、TG、DAG均明显升高（P＜0.01）；与肥胖组比较，干预2组大鼠的MAU、Scr、BUN、FFA、TG、DAG明显降低（P＜0.01，P＜0.05），而干预1组大鼠仅MAU、FFA明显降低（P＜0.05）；与干预1组比较，干预2组大鼠的MAU、FFA、TG、DAG明显降低（P＜0.05）。结论：利拉鲁肽可能通过减轻肾脏脂质沉积改善肥胖相关性肾脏损伤。

利拉鲁肽；肥胖；肾脏；脂质沉积

据统计，目前全球成人中有23亿人超重，7亿人达到肥胖水平［1］。肥胖率的不断攀升，给公众健康造成巨大隐患。越来越多的证据表明，肾脏脂质堆积是肥胖所致肾损伤的原因之一［2］。利拉鲁肽是一种新型降糖药和减肥药，有研究发现其对肥胖大鼠肾脏具有保护作用，但作用机制尚不明确。本研究应用利拉鲁肽对高脂诱导肥胖大鼠进行干预，探讨利拉鲁肽阻断肥胖所致肾损伤的可能机制。

1　材料与方法

1.1动物模型的建立与分组 雄性Wistar大鼠32只，体重180-220g。随机选取其中的8只作为普食组，普通饲料喂养8周；另24只大鼠高脂饲料喂养8周，以体重高于普食组20%作为肥胖成模标准［3］，成模肥胖大鼠再随机分为肥胖组、利拉鲁肽干预1组和利拉鲁肽干预2组，每组8只大鼠。后普食组大鼠继续普食喂养2周，同时给予100μg/ kg/d生理盐水腹部皮下注射；肥胖组、利拉鲁肽干预1组和利拉鲁肽干预2组大鼠继续高脂饲料喂养2周，同时分别给予100μg/kg/d生理盐水、100μg/kg/d利拉鲁肽、200μg/kg/d利拉鲁肽腹部皮下注射。

1.2指标检测

1.2.124h尿微量白蛋白（MAU）：药物干预2周后，应用代谢笼收集各组大鼠24h尿液，免疫比浊法测定各组大鼠的MAU。

1.2.2血液指标：大鼠麻醉后处死，经腹主动脉取血，离心取血清，-80℃冰箱保存。采用全自动生化分析仪（日立7600）检测血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）的含量；铜试剂比色法检测血清游离脂肪酸（FFA）的含量（试剂盒购自南京建成生物工程公司）。

1.2.3肾脏指标：取大鼠肾脏匀浆，采用GPO-PAP法检测甘油三酯（TG，试剂盒购自南京建成生物工程公司）的含量，采用ELISA法检测甘油二酯（DAG，试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司）的含量。

2　结果

与普食组比较，肥胖组大鼠的MAU、Scr、BUN、FFA和肾脏TG和DAG的含量均显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）。与肥胖组比较，干预1组大鼠仅MAU、FFA明显降低（P＜0.05）；与肥胖组比较，干预2组大鼠的MAU、BUN、Scr、FFA、TG、DAG均明显下降（P＜0.01，P＜0.05）。与干预1组比较，干预2组大鼠的MAU、FFA、TG、DAG明显降低，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见附表：

附表 四组大鼠各指标检测结果（n=8）

3　讨论

肥胖症与慢性肾脏病（CKD）的发病率增加呈平行关系，流行病学研究显示，肥胖是CKD的独立危险因素［4］。久坐不动的生活方式以及高能量食物不断进入日常饮食中，造成人体能量摄入过多诱发体重增加，导致肥胖症的发病率不断攀升。近几年研究表明，肾脏异位脂质沉积可能是肥胖相关性肾损伤的原因之一。本次研究亦发现，高脂诱导的肥胖大鼠，肾功能下降、MAU升高；同时，肥胖组大鼠肾脏的TG和DAG含量明显上升，表明肾脏异位脂质沉积可能参与了肥胖相关性肾损伤的发病过程。

通常摄入过剩的能量由白色脂肪组织以TG形式储存起来，当能量摄入超过白色脂肪组织的存储容量时，就会导致异位脂质堆积，可沉积在肝、骨骼肌、胰腺、肾脏等部位［5］。TG本身无脂毒性，但可导致FFA的蓄积，FFA通过其中间代谢产物，如脂肪酰辅酶A（FA-CoA）、甘油二脂（DAG）、神经酰胺等对沉积部位造成脂毒性损害［6］。脂毒性对肾脏的损伤机制包括活性氧的大量产生、细胞内信号转导通路的破坏、炎症和纤维化因子的释放、脂质诱导的细胞凋亡等［7-8］。

利拉鲁肽是一种较新的降糖药与减肥药，因其广泛独特的胰外效应，在临床应用中备受关注。利拉鲁肽对肥胖患者和糖尿病肾病患者的肾脏保护作用已得到证实，但具体机制尚不明了。本研究发现，经高剂量利拉鲁肽干预后，肥胖大鼠的肾功能、尿蛋白明显得到改善，且效果优于低剂量利拉鲁肽组。本研究表明，利拉鲁肽对肥胖大鼠的肾脏具有保护作用，且效应呈浓度依赖性。本研究同时还发现，经药物干预后，肥胖大鼠肾脏TG、DAG的含量明显下降，提示利拉鲁肽可能通过减少肾脏脂质沉积，进而改善肥胖相关性肾脏损伤。因此，本研究可为利拉鲁肽在肥胖相关性肾病的临床治疗上提供新的思考领域。

［1］Jensen MD，Ryan DH，Apovian CM，et al.2013 AHA/ACC/TOS guideline for the management of overweight and obesity in adults: a report of the American College of Cardiology/ American Heart Association Task Force on Practice Guidelines and The Obesity Society［J］.J Am Coll Cardiol， 2014，63（25 Pt B）:2985-3023.

［2］Li Z， Woollard JR， Wang S， et al. Increased glomerular f iltration rate in early metabolic syndrome is associated with renal adiposity and microvascular proliferation［J］. Am J Physiol Renal Physiol，2011， 301（5）: F1078-F1087.

［3］申瑞玲，马婧.四种肥胖动物模型方法的比较［J］.动物医学进展，2007，28（3）：105-108.

［4］Wang Y，Chen Y，Song Y，et al.Association between obesity and kidney disease: a systematic review and meta-analysis［J］.KidneyInt，2008，73（1）:19-33.

［5］Samuel V，Shulman G.Mechanisms for insulin resistance: common threads and missing links［J］. Cell，2012，148（5）:852-871.

［6］Jornayvaz F， Shulman G. Diacylglycerol activation of protein kinase Cε and hepatic insulin resistance［J］.Cell Metab，2012，15（5）: 574-584.

［7］Samuel V，Petersen K，Shulman G， et al.Lipid-induced insulin resistance: unravelling the mechanism［J］.Lancet， 2010，375（9733）: 2267-2277.

［8］Guebre-Egziabher F，Alix PM，Koppe L，et al.Ectopic lipid accumulation: A potential cause for metabolic disturbances and a contributor to the alteration of kidney function［J］.Biochimie， 2013，95（11）:1971-1979.

EFFECTS OF LIRAGLUTIDE ON RENAL LIPID DEPOSITION OF OBESE RATS

LIU Jian， WU Ming-hao， SHAN Xiu-jie， et al
(Chengde Medical College, Hebei Chengde 067000, China)

Objective: To study the effects of liraglutide on renal lipid deposition of obese rats. Methods: 32 male Wistar rats were randomly divided into the following 4 groups with 8 rats in each group: normal diet gr oup， obese group，liraglutide intervention group 1 and liraglutide intervention group 2. The obese rats were established by using fat diet and the standard for successful model was rats' body weight increasing 20%. Then the rats in liraglutide intervention group 1 and liraglutide intervention group 2 were given liraglutide in different dose for 2 weeks. The 24-hour proteinuria （MAU），creatinine （Scr） ，urea nitrogen （BUN） and free fatty acid （FFA） content in serum， as well as triglyceride （TG）， diglyceride（DAG） content in kidney of rats in each group were detected. Results: Compared with rats in normal diet group， the MAU，Scr， BUN， FFA， TG and DAG of rats in obese group increased obviously （P＜0.05）. Compared with rats in obese group， the MAU， Scr， BUN， FFA， TG and DAG of rats in liraglutide intervention group 2 decreased obviously （P＜0.01，P＜0.05）； only the MAU and FFA of rats in liraglutide intervention group 1 decreased obviously （P＜0.05）. Compared with rats in liraglutide intervention group 1， the MAU， FFA， TG and DAG of rats in liraglutide intervention group 2 decreased obviously （P＜0.05）. Conclusions: Liraglutide can improve obesity related renal injury by alleviating renal lipid deposition.

Liraglutide； Obesity； Kidney； Lipid deposition

R965

A

1004-6879（2016）01-001-03

2015-08-26）