大黄对大鼠肾脏的毒性及可逆性研究*

张　腾，佟继铭，梁　策，万慧杰，张树峰△

（1.河北省中药研究与开发重点实验室/承德医学院中药研究所，河北承德 067000；2.华北理工大学中医学院）

大黄对大鼠肾脏的毒性及可逆性研究*

张腾1、2，佟继铭1，梁策2，万慧杰1，张树峰1△

（1.河北省中药研究与开发重点实验室/承德医学院中药研究所，河北承德 067000；2.华北理工大学中医学院）

目的：观察长期应用大黄对大鼠肾脏的毒性及其可逆性。方法：40只SD大鼠随机分为对照组（n=10）和大黄用药组（n=30），大黄用药组大鼠给予2g/kg的大黄水煎液连续灌胃60d，分别于末次给药后24h、停药30d、停药60d处死10只大鼠。分别检测各组大鼠血肌酐和尿素氮的含量， HE染色观察肾脏的形态结构。结果：大黄给药期间大鼠精神萎靡、尿液呈深红色改变、排稀便，停药后10d恢复正常。给药60d组大鼠血尿素氮的含量明显高于对照组（P＜0.05），血肌酐含量未见明显异常改变；停药30d、60d组大鼠血尿素氮和肌酐的含量与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。光镜下观察可见，给药60d组大鼠肾脏近曲小管上皮细胞肿胀变性，肾小管管腔变窄，偶见部分上皮细胞脱落出现细胞空洞，肾小球未见萎缩、纤维化、肥大等异常病理变化；停药30d、60d组大鼠肾脏形态结构未见明显病理改变。结论：给予大鼠2g/kg的大黄灌胃给药60d对肾脏有一定的毒性作用，但这种损害是可逆的，且恢复较快。

大黄；肾脏；毒性；可逆性

大黄在我国传统医学中应用已久，始载于我国现存最早的药学专著《神农本草经》，且历代本草均有收载。我国8000多种中药制剂中约有800多种含有大黄，大黄被广泛用于治疗多种疾病［1］。现代研究证明，大黄具有降脂、减肥、美容等作用。由于减肥美容用品多含有大黄，使大黄非中医药理论指导、非治疗目的超长时间应用几率大幅度增加，以至大黄引起各种不良反应的报道逐年增多。文献报道，大黄具有潜在的肝肾毒性［2-3］。但目前尚未见大黄致肾毒性是否可逆，恢复期需要多长时间等报道。本研究旨在观察大黄对大鼠肾脏损伤的程度、以及大黄所致肾脏损伤是否可逆，为大黄的临床安全用药提供实验依据。

1　材料与方法

1.1药物制备 大黄饮片，购自安国市长安中药材有限公司，批号20130902。大黄水提物的制备：大黄药材粉碎为粗粉，10倍水浸泡2h，煎煮10min，药渣加8倍水，煎煮10min，过滤，合并滤液。40℃减压浓缩至含大黄0.4g/ml（按生药计算）的药液。

1.2实验动物分组及处理 8周龄SPF级SD大鼠40只，雌雄各半，体重180-200g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司，合格证号：SCXK（京）2009-0004。大鼠随机分为对照组（n=10）和大黄水煎液2g/kg组（n=30），大黄用药组大鼠按2g/kg灌胃给予大黄水煎液60d，分别于末次给药后24h、停药30d、停药60d处死大鼠，每次随机处死10只大鼠。

1.3检测血清肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的含量 4%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，经腹主动脉取血，3000r/min离心10min，取血清，全自动生化分析仪检测血清肌酐和尿素氮的含量。

1.4观察肾脏的形态结构 大鼠取血后处死，取双侧肾脏，4%多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，5μm厚连续切片，常规HE染色，光镜下观察。

2　结果

2.1大鼠一般状况 给药第5d大鼠尿液呈深红色，排稀便、软便，粪便颜色呈深褐色；给药第30d，大鼠皮毛的清洁度较差，大鼠活动减少，精神不佳；停药第10d大鼠上述症状消失，恢复正常。

2.2血液生化指标检测结果 大黄给药60d组大鼠血清尿素氮的含量明显高于对照组，组间比较差异具有统计学意义（P＜0.05）；大黄给药60d组大鼠血清肌酐的含量与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。大黄停药30d、停药60d组大鼠血清尿素氮和肌酐的含量与对照组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。见附表：

附表 各组大鼠血清尿素氮和肌酐的含量（）

附表 各组大鼠血清尿素氮和肌酐的含量（）

与对照组比较：*P＜0.05

组别　n　尿素氮（mmol/L）　肌酐（μmol/L）对照组　10　6.40±1.19　23.37±3.30大黄用药组给药60d　10　9.22±2.09*　24.00±4.98停药30d　10　6.18±.77　22.55±3.77停药60d　10　7.10±1.43　24.75±3.30

2.3大鼠肾脏的形态结构 ⑴对照组：大鼠肾脏形态结构正常，皮质、髓质分界清楚，肾小球未见萎缩、纤维化和肥大，肾小管管腔内未见细胞管型及蛋白管型。⑵给药60d组：与对照组大鼠比较，给药60d组大鼠肾脏近曲小管上皮细胞出现肿胀变性，肾小管管腔变窄，偶见部分上皮细胞脱落出现细胞空洞，但肾小球的形态结构未见异常。⑶停药30d组、停药60d组：大鼠肾脏形态结构未见明显病理改变。

3　讨论

血肌酐和尿素氮的含量是临床常用评价肾功能的重要指标。肌酐由肌肉代谢产生释放到血液中，经肾小球滤过，随尿液排出体外；尿素氮是蛋白质代谢的主要终末产物，主要经肾小球滤过，各段肾小管均可重吸收。血肌酐和尿素氮含量的升高，提示肾小球滤过功能受损［4］。在肾功能损害的早期，尿素氮的含量可在正常范围，当肾小球滤过率下降到50%以下时，尿素氮的含量才迅速升高。肌酐含量是反应肾实质损伤的指标，肾小球滤过率下降到正常的1/3时，肌酐含量才会明显升高［5］。

本研究发现，与对照组大鼠比较，给予大鼠大黄水煎液连续灌胃60d，大鼠血尿素氮的含量明显升高，而肌酐的含量无明显变化；肾脏病理学检查显示，近曲小管上皮细胞出现肿胀变性，肾小管管腔变窄，偶见部分上皮细胞脱落出现细胞空洞，但肾小球的形态结构未见异常，与文献报道结果相似［6］。本研究提示，给予大鼠2g/kg的大黄水煎液灌胃给药60d，所导致的肾脏损伤处于早期阶段；停用大黄30d，大鼠血肌酐、尿素氮的含量以及肾脏的形态结构均已恢复正常。因此本研究表明，长期应用大黄对肾脏有一定的毒性作用，但这种损害是可逆的，且恢复较 快。

［1］曹俊岭，孙玉琦，肖小河，等.对大黄“毒性”的认识与思考［J］.世界中西医结合杂志，200 7，2（2）：112-114.

［2］张陆勇，江振洲，濮存海，等.大黄总蒽醌对SD大鼠灌胃给药的长期毒性研究［J］.中国生化药物杂 志，2004，25（4）：206-209.

［3］王清秀，吴纯启，廖明阳.大黄及其主要成分的毒性毒理研究［J］.毒理学杂志，2007，21（4）：301-302.

［4］朱旭明，郁昊达，张健，等.血肌酐、尿素氮及白细胞计数在原发性高血压中的意义［ J］.国际检验医学杂志，2011，32（15）：1749-1750.

［5］李波，李峰.血清胱抑素C、β2-微球蛋白及传统标志物检测在肾功能不同损害期的临床研究［J］.中国卫生检验杂志，2014，24（9）：1287-1289.

［6］王青秀.大黄及其主要成份的毒性毒理研究［D］.北京：中国人民解放军军事医学科学院，2007.

STUDY ON TOXICITY AND REVERSIBILITY OF RHUBARB ON RATS’ KIDNEY

ZHANG Teng， TONG Ji-ming， LIANG Ce， et al
(Hebei Key Laboratory of Research and Exploitation of Traditional Chinese Medicine/Institute of Chinese Materia Media, Chengde Medical College, Hebei Chengde 067000, China)

Objective: To observe the toxicity and reversibility of long-term application of rhubarb on rats' kidney. Methods: 40 SD rats were randomly divided into control group （n=10） and rhubarb group （n=30）. The rats in rhubarb group were lavaged with rhubarb （2g/kg） for 60 days and then the rats were killed respectively 24h after drug administration， 30d after drug withdrawal and 60d after drug withdrawal. The urea nitrogen and creatinine content in serum of rats were respectively detected； HE stain was used to observe the morphology of kidney. Results: During rhubarb administration， the rats were dispirited， the urine was dark red and defecated looser stools. The urea nitrogen content of rats in drug administration 60d group was obviously higher than that of rats in control group （P＜0.05）； but the creatinine content showed no obvious abnormal changes. The urea nitrogen and creatinine content of rats in drug withdrawal 30d group and 60d group had no statistically significant differences compared with rats in control group（P＞0.05）. The morphological changes of rats' kidney in drug administration 60d group: proximal tubule epithelial cells swelled， the renal tubular lumen became narrow， part of the epithelial cells shed； The glomerulus appeared no obvious pathological changes，such as atrophy， fibrosis and hypertrophy. The kidney of rats in drug withdrawal 30d group and 60d group showed no obvious pathological changes. Conclusions: Lavaging rhubarb （2g/kg） for 60 days has certain toxic effects on rats' kidney， but the injury is reversible and recove r more fast.

Rhubarb； Kidney； Toxicity； Reversibility

R285.5

A

1004-6879（2016）01-005-03

2015-05-29）

* 河北省教育厅重大项目（2009301）