石墨炉原子吸收分光光度法测定深海鱼油中铅和镉的含量

孙晶晶，李井涛，张婷婷

1.吉林省药品检验所，吉林长春130033；2.吉林省食品检验所，吉林长春130033

石墨炉原子吸收分光光度法测定深海鱼油中铅和镉的含量

孙晶晶1，李井涛2，张婷婷1

1.吉林省药品检验所，吉林长春130033；2.吉林省食品检验所，吉林长春130033

目的建立石墨炉原子吸收分光光度法测定深海鱼油中铅和镉含量的方法。方法石墨炉原子吸收分光光度法。结果在0.001～0.2 ng/mL范围内铅(r=0.9999，n=6)、镉(r=0.9992，n=6）线性关系良好；平均回收率分别为92.3%（RSD=1.45%，n=6）和94.6%（RSD=1.53%，n=6）。结论本法简便，快捷，灵敏度、重现性好，可作评价深海鱼油中铅、镉含量的质控方法。

原子吸收分光光度法；深海鱼油；铅镉

深海鱼油概念为深海鱼类体内不饱和脂肪的简称，鱼油是指富含EPA(二十碳五烯酸）、DHA(二十二碳六烯酸）的鱼体内的油脂。普通鱼体内含EPA、DHA数量极微，只有寒冷地区深海里的鱼，如三文鱼、沙丁鱼等体内EPA、DHA含量极高，陆地其他动物体内几乎不含EPA、DHA。因此，深海鱼油主要提取于深海的鱼体[1-2]。EPA (二十碳五烯酸)、DHA(二十二碳六烯酸)具有降低人体内血清胆固醇及低密度脂蛋白含量、防治心血管病和抗炎、抗癌等作用，还具有健脑益智、提高视力，预防老人痴呆等功效[1-6]。目前，随人们保健意识的提高，深海鱼油的食用范围和人群呈剧增趋势，其重金属的含量测定鲜有报道。该文采用原子吸收分光光度法测定鱼油中铅、镉的含量，拟为其安全食用提供依据[7-8]。

1　仪器与试剂

ZEEnit700P原子吸收分光光度计；AL204-IC型电子分析天平（十万分之一）；热解涂复石墨管；CEM微波消解仪（聚四氟乙烯消解管）；EH20B电热板；铅标准液（GBW08619，1 000 μg/mL）、镉标准液（GBW08612，1 000 μg/mL），均由国家标准物质研究中心提供；硝酸、H2O2为分析纯。

2　方法与结果

2.1原子吸收分光光度计工作条件

空心阴极灯，塞曼扣背景，灯电流为8 mA，狭缝1.2，进样体积10 μL。铅测定波长283.3 nm（偏差0.045），镉测定波长228.8 nm（偏差0.041）。

2.2石墨炉升温程序及微波消解程序

石墨炉升温程度及微波消解程序见表1和表2。

表1　石墨炉升温程序

表2　铅、镉微波消解程序

2.3溶液的制备

2.3.1标准储备液的制备精密量取铅、镉标准液适量，加2%硝酸溶液稀释制成每1 mL分别含铅（Pb）1 μg、含镉（Cd）0.1 μg的混合溶液，即得。

2.3.2标准曲线的制备精密量取铅、镉标准储备液适量，加2%硝酸溶液稀释制成每1 mL分别含铅、镉各20 ng的溶液，作为标准溶液。通过2%硝酸溶液自动稀释，分别精密制成每1 mL含铅、镉0、0.1、1.0、5、10、20 ng的溶液，精密取10 μL注入石墨炉原子化器，测定吸光度，以吸光度（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线。铅、镉曲线方程分别为：A=0.004544C+0.024977，r= 0.9999(n=6)和A=0.043050C+0.0165，r=0.9992(n=6)。

2.3.3样品溶液的处理取样品0.3 g（批号20100408，广东仙乐制药有限公司提供），置聚四氟乙烯消解管内，加硝酸8 mL，再加过氧化氢2 mL，混匀，浸泡过夜，盖好内盖，旋紧外套，置微波消解炉内，进行消解。消解完成后，置电热板上缓缓加热至红棕色挥尽，并浓缩至2 mL，放冷，用水转入25 mL容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。同法同时制备试剂空白溶液。

2.4精密度实验

分别取每1 mL含铅、镉各20 ng的溶液，稀释成含铅和镉各5 ng/mL的混合溶液，精密吸取10 μL注入石墨炉原子化器，重复测定5次。结果铅平均含量为4.9914ng/mL，RSD=0.91%(n=5)；镉平均含量为4.9961ng/mL，RSD=1.02%(n=5)。表明仪器精密度良好。

2.5稳定性实验

取2.4项下溶液，分别于0、4、8、16、24、48 h精密吸取10 μL注入石墨炉原子化器。结果铅含量RSD为1.04%(n=6)，镉含量RSD为1.35%(n=6)，表明铅、镉在48 h内测定结果稳定。

2.6加样回收实验

精密称取同一供试品6份（20100408），0.3 g/份，每份再精密加入对照品溶液（铅、镉各5 ng/mL）1 mL，依法2.3.3消解处理、测定。结果铅平均回收率为92.3%，RSD=1.45%（n=6）；镉平均回收率为94.6%，RSD=1.53%（n=6）。表明本法回收率较好，准确度高，符合定量分析的要求。见表3。

2.7重复性试验

精密称取同一供试品6份（20100408），0.3 g/份，依法平行消解、测定，结果样品中铅平均含量为26.5644 ng/g，RSD=1.26%(n=6）；镉平均含量为16.6401 ng/g，RSD= 1.41%(n=6）。表明方法的重复性良好。

2.8检测限的确定

取空白溶液连续进样20次，以其标准偏差（S）的3倍计算，结果铅检测限为0.75 ng/g；镉检测限为0.5 ng/g。

表3　回收率实验测定结果（n=6）

2.9样品的测定

取不同生产厂商的样品7批，依法处理、测定吸光度，计算铅、镉的含量。见表4。

表4　铅、镉的含量[（±s），ng/L]

表4　铅、镉的含量[（±s），ng/L]

编号品名产品批号铅含量镉含量1234567 A牌鱼油软胶囊B牌鱼油软胶囊C牌鱼油软胶囊D牌鱼油软胶囊E牌鱼油软胶囊F深海鱼油软胶囊G深海鱼油软胶囊20100402 20100702 20100802 20100408 20110101 20101007 20100903 17.29±0.26 18.15±0.21 16.56±0.33 26.56±0.34 22.13±0.14 23.56±0.48 19.42±0.41 15.06±0.10 16.11±0.12 14.99±0.23 16.64±0.12 15.31±0.44 16.43±0.37 17.16±0.18

3　讨论

重金属对人体正常的生理功能和新陈代谢具有明显的毒害作用，当人体内重金属过量时就会导致各种疾病的发生、发展。因此重金属的含量应该作为深海鱼油质量评价的一个指标。该研究分别采用了不同厂商的7批品种，其铅、镉的含量均在GB/T 5009规定范围内（铅≤500 ng/g；镉≤500 ng/g）。

通过对样品消化液的研究，硝酸8 mL；硝酸8 mL+过氧化氢2 mL，结果发现方法测定的样品峰高适度，峰形亦比较美观，确定其为本实验的消化液体；同时对微波消解的温度进行了考察，发现温度超过120℃，升温时间短促时容易导致暴沸，造成消解管的损坏。通过对比确定该研究的初始温度为90℃，升温时间为5 min。

消解完成后的挥酸过程中，对电热板的控制温度进行了研究，结果发现电热板的控制温度高于120℃时，测定数值有偏低的现象，而采用110℃挥酸比较适宜，测定结果比较准确、可靠。故确定本实验挥酸的温度为110℃。

在测定铅、镉含量的过程中，有些干扰物质会与待测元素形成不易解离的化合物分子[9]。其一方面干扰灰化、原子化的过程，另外，额外吸收亦可能导致一些较高的虚假信号，从而产生背景，影响测定结果的准确性。该研究分别针对正常测定和加入基体改进剂（磷酸二氢铵和硝酸镁）同时提高灰化、原子化温度进行了对比研究（均采用塞曼扣背景）。结果二者的测定结果无统计学差别。提示塞曼扣背景可有效的消除外来物质的干扰，提高仪器的灵敏度。

[1]郭玉华，李钰金．水产品中EPA和DHA的研究进展[J]．肉类研究，2011（1）：90-94．

[2]吴昊，张春枝，吴文忠．尿素循环包络浓缩鱼油中EPA和DHA[J]．大连工业大学学报，2010（6）：44-46．

[3]李立，王亚东，张焱，等．深海鱼油对高脂模型大鼠降血脂作用的实验研究[J]．实用预防医学，2010（1）：144-145．

[4]王顺，马爱群，宋少武，等．短期补充鱼油对超重高血压患者大动脉弹性的改善作用[J]．中国循环杂志，2007（1）：26-29．

[5]阮鹏，况军，刘杰，等．W-3鱼油脂肪乳对危重症患者胃肠功能衰竭的防治作用[C]．第三届重症医学大会论文汇编，2009：280．

[6]曾远平，黄学敏，刘建业．抗氧化剂对鱼油抗氧化作用的研究[J]．水产科技，2010（2）：17-18．

[7]彭文进，吴霞菊．石墨炉原子吸收分光光度法测定莪术油注射液中重金属铅的含量[J]．中国现代药物应用，2009，3（12）：19-20．

[8]高晓玲，陈丰连，曾元儿，等．微波消解—原子吸收光谱法测定岗梅根茎中铅、镉的含量[J]．广州中医药大学学报，2011，28（6）：639-642．

[9]陆明华，朱书秀，郑春播．原子吸收分光光度法测定接装纸中的砷、铅[J]．烟草科技，2007（4）：36-39．

Graphite Furnace Atomic Absorption Spectrometry in Measuring the Contents of Lead and Cadmium in the Fish Oil of Deep Sea

SUN Jing-jing1,LI Jing-tao2,ZHANG Ting-ting1
1.Jilin Institute for Drug Control,Changchun,Jilin Province,130033 China；2.Food Inspection Institute of Jilin Province, Changchun,Jilin Province,130033 China

Objective To establish a method of graphite furnace atomic absorption spectrometry in measuring the contents of lead and cadmium in the fish oil of deep sea.Methods The graphite furnace atomic absorption spectrometry was adopted. Results The linear relationship between lead(r=0.9999,n=6)and cadmium（r=0.9992，n=6）from0.001 to 0.2ng/mL was good, and the average recovery rate was 92.3%(RSD=1.45%,n=6)and 94.6%(RSD=1.53%,n=6).Conclusion The method is simple and rapid with good sensitivity and reproducibility,which can be used as a quality-control method of evaluating the contents of lead and cadmium in the fish oil of deep sea.

Atomic absorption spectrometry;Fish oil of deep sea;Lead and Cadmium

R284

A

1672-5654（2016）11（a）-0011-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.31.011

孙晶晶（1982.9-），女，辽宁沈阳人，硕士，主管药师，主要从事药品的检验和质量标准的起草、复核工作。

（2016-08-02）