中药与矿物盐微粉对急性血瘀模型大鼠血液流变性的影响

傅卫红　张　青　周玉宝　张琳静　彭立静　王永兴　李超民

解放军第四五一医院(西安710054)



中药与矿物盐微粉对急性血瘀模型大鼠血液流变性的影响

傅卫红张青周玉宝张琳静彭立静王永兴李超民

解放军第四五一医院(西安710054)

目的：探讨中药与矿物盐微粉对急性血瘀模型大鼠血液流变学指标的影响。方法：采用冰水浴和皮下注射盐酸肾上腺素致大鼠急性血瘀模型，检测全血低切、中切及高切黏度、血浆黏度、红细胞压积和纤维蛋白指数等指标，探讨中药与矿物盐微粉对急性血瘀模型大鼠血液流变学指标的影响。结果：血瘀模型组高、中、低切变率的全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、纤维蛋白较正常对照组明显升高(P<0.01)。中药与矿物盐微粉各剂量组的全血黏度均有不同程度的下降，其中大剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.05)，中、小剂量组较模型组降低，但无统计学意义；中药与矿物盐微粉大、中剂量组的血浆黏度较模型组有显著性降低(P<0.05)；各剂量组的红细胞压积、纤维蛋白与模型组相比有不同程度的降低，但无统计学差异。结论：中药与矿物盐微粉能够改善急性血瘀模型大鼠的全血和血浆黏度，具有明显的活血化瘀作用。

中药与矿物盐微粉系专利产品多功能外用热疗包的内容物微粉混匀而成。主要成分包括没药、川芎、花椒、羌活、透骨草等十八味中药和矿物盐，具有活血、祛瘀、止痛的功效。对多种病因引起的颈肩腰腿痛有较好的疗效。本研究采用肾上腺素加冰浴法复制大鼠急性血瘀模型，研究中药与矿物盐微粉对急性血瘀模型大鼠血液流变学指标的影响，探讨中药组方与矿物盐微粉的活血化瘀作用。现将结果报道如下。

1材料

1.1实验动物清洁级SD大鼠，雌雄各半，体重160～220g。由第四军医大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(军)2012-0007。饲养于空调恒温室内，室温24±2℃，相对湿度40%～60%，过滤送风，自动控制昼夜各12h。灭菌全价营养颗粒饲料(购于第四军医大学实验动物中心)喂养，自由饮水。实验开始前饲养观察2周，选择健康动物用于实验。

1.2药物和试剂多功能外用热包批号：20130305。称取其内容物适量，先粉碎成棕色粗粉，后微粉，收集微粉( 300目筛通过率≥95%)，室温保存备用。地奥心血康胶囊(成都地奥制药集团有限公司，批号：1211029)；盐酸肾上腺素(西南药业股份有限公司出品，批号：1310151)。

1.3实验仪器FW-177型中草药粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司生产)；BFM-6型超微粉碎机(济南倍力粉技术工程有限公司生产)；AF-100制冰机(美国IMI CORNELIUS.INC)；CR21F型离心机(日本HITACHI)；F280SZ全自动血液流变学仪(重庆迈迪克科技开发公司)； Milli-Q纯水机(MilliPore Corporation, France.)；低温冰箱(美国Nair公司)。

2方法2.1动物分组及给药剂量将试验动物随机分为6组，分组及给药如下：正常对照组、血瘀模型组、地奥心血康阳性对照组(300mg/kg)及中药与矿物盐微粉高剂量组(150g/kg)、中剂量组(45g/kg)、低剂量组(15g/kg)。每组 10 只。剂量设置依据临床拟用剂量。阳性对照组动物给予地奥心血康300mg/kg灌胃，中药与矿物盐微粉低、中、高剂量组动物颈背部包裹中药与矿物盐微粉治疗包热敷15min，每天2次，连续7d。第6天除正常组外其余各组大鼠参考文献方法制备大鼠急性血瘀模型(具体方法见2.2)。第7天末次给药30min后腹主动脉取血检测血液流变学指标。

2.2血瘀模型的制作皮下注射盐酸肾上腺素注射液0.5mg/kg，共 2 次，间隔8h，在2次之间(前后各间隔2h)，将大鼠浸于0～2℃冰水中5min，禁食不禁水过夜。第二次皮下注射盐酸肾上腺素注射液后即成血瘀证模型。

2.3血流变学指标的测定麻醉大鼠，腹主动脉采血，1%肝素抗凝后，检测血液流变学指标：全血低、中、高切变率(200s-1、30s-1、3s-1)下的全血黏度、红细胞压积(Hct)、纤维蛋白原。全血以3000r/min离心15min得到血浆，进行血浆黏度测定。

3结果

3.1对急性血瘀大鼠全血黏度的影响与正常组相比，模型组高、中、低切变率的全血黏度明显升高(P<0.01)，中药与矿物盐微粉各剂量组的全血黏度有不同程度的下降，大剂量组较模型组有显著性差异(P<0.05)，中、小剂量组有下降趋势，但无统计学差异(表1)。

表1　各组大鼠不同切变率下全血黏度的比较

注：与正常组相比：△P<0.01；与模型组相比：*P<0.05，**P<0.01

3.2对急性血瘀大鼠血浆黏度、红细胞压积、纤维蛋白的影响与正常组相比，模型组大鼠血浆黏度、红细胞压积、纤维蛋白均明显升高(P<0.05，P<0.01)，多功能外用热包大、中剂量组的血浆黏度较血瘀模型组有较显著降低(P<0.05)；中药与矿物盐微粉各剂量组对红细胞压积、纤维蛋白与模型组相比亦有降低的趋势，但无统计学差异(表2)。

表2　各组大鼠血浆黏度、红细胞压积、纤维蛋白的比较

与正常组相比：△P<0.05，△△P<0.01；与模型组相比：*P<0.05

4讨论血瘀症是临床最常见的证候类型，也是许多临床疾病的中医学病理机制。由肝肾亏损，气血不足，或过度劳损、外伤或风寒湿邪，使局部气血运行不畅，气血凝滞，经络闭阻不通，离经之血不能及时排出或消散，瘀滞于人体某部，或血液运行不畅，瘀积于经脉或脏器内所出现的证候[1]。血瘀证的现代医学成因可能与微循环障碍、血液流变学异常、血液凝固性增高或纤溶性降低、血小板聚集性增高或释放功能亢进、血流动力学障碍、血管狭窄、阻塞等有关[2]。已有许多学者将血液流变学指标的异常作为诊断血瘀证及判断血瘀程度的重要客观指标[3-4]。临床上患者红细胞流变特异性异常、血液高黏高凝状态和流动性质的改变是“不通则痛”的机制之一[5]。

专利产品外用热疗包依据祖国传统中医药学理论，经过大量基础实验和筛选，以没药、川芎、花椒、羌活、透骨草等为主要成分配合矿物质，利用湿热敷的方法，使有效的成分通过毛孔、皮肤吸收进入人体内，改善病变部位的血液循环，促进炎症及水肿的吸收，减轻或消除关节、肌肉组织的炎性反应，从而达到有效治疗目的。我们前期的研究认为，外用热疗包的治疗作用包括热效应和非热效应的双重作用。其热效应促进血液循环，加强局部组织代谢，降低炎症反应，加快渗出物吸收，减轻水肿。非热效应包括中药及矿物盐的药理作用，其中乳香、没药、延胡索相协活血祛瘀、行气止痛；羌活、当归和五灵脂共奏散寒活血止痛之效[6]；透骨草、生川乌、防风、川芎和花椒可祛留滞经络的风寒湿邪，并有较强的止痛作用；当归、川芎养血兼活血。综合全方，祛邪扶正，标本兼顾，发挥活血止痛、祛湿散寒、通经通络的功效[7]。同时加入了矿物盐，引药下行，入肾软坚，缓和药材辛燥之性，增进药材疗效，并能促进渗液吸收，达到消炎、消肿、止痛作用[8]。

本研究采用肾上腺素加冰水刺激的方法复制急性血瘀证模型，模拟应激时机体状态，以冰水浸泡动物，模拟外寒侵袭，两种因素的综合作用复制出急性寒凝血瘀型大鼠模型[9-10]，并对专利产品多功能外用治疗包内容物的活血化瘀作用进行了探讨。实验结果表明，大鼠经给予肾上腺素和冰水处理后，造成全血黏度和血浆黏度升高、微循环障碍，造成了急性寒凝血瘀模型。中药与矿物盐微粉热敷具有祛风散寒、活血化瘀、温通经络、调和气血的功能，能够改善急性寒凝血瘀大鼠的全血和血浆黏度，改善血液流变性的异常及微循环障碍，从而缓解血瘀的症状，其具体作用机制及有效成分作用尚需进一步研究。

[1]杜金行，李腾飞，史载祥．血瘀证及活血化瘀临床研究回顾与展望[J]．中华中医药杂志，2012，27(9)：2247-2253．

[2]中国中西医结合学会活血化瘀专业委员会．血瘀证中西医结合诊疗共识[J]．中国中西医结合杂志， 2011，31(6)：829-844．

[3]杨银花, 王佳宁, 韩雪, 等．血瘀证与其客观检测指标关联性研究进展[J]．中医临床研究，2014，6(29)：142-144．

[4]李显华，杜佳林，包玉龙，等．丹龙胶囊活血化瘀作用的实验研究[J]．实验动物学，2012，29( 2)∶18-19．

[5]李小兵，卢军敏．从红细胞流变特性的变化探讨“不通则痛”的实质[J]．陕西中医，2005，26(3)∶242-243．

[6]朱富华, 杨志春, 樊平．中医中药角药研究[M]．西安：陕西省科学技术出版社，2009：246．

[7]张青, 李伟, 张琳静, 等．活血化瘀中药配合矿物质热敷治疗颈肩腰腿痛962例[J]．陕西中医，2014，35(1)：28-29．

[8]江云，黄勤挽．现代中药炮制研究[M]．北京：科学出版社，2010：138-155．

[9]彭成．中医药动物实验方法学[M]．北京：人民卫生出版社，2008：940．

[10]陈奔, 钟振国．血瘀证病证结合动物模型研究进展[J]．世界中西医结合杂志，2015，10(1)：136-139．

(收稿2016-03-20;修回2016-04-19)

Effect of traditional Chinese medicine and mineral salts micropowder on hemorheology in rats of acute blood stasis model

The 451st Hospital of PLA(Xi’an 710032) Fu WeihongZhang QingZhou Yubaoet al

Objective: To explore the effects of external application of the Traditional Chinese medicine and mineral salts(TCM-MS)micropowder on hemorheology in acute blood stasis model of rats. Methods: Sixty SD rats were randomly divided into the normal group, the model group, the Di’ao xinxuekang capsules control group，and high dose(150g·kg-1) , middle dose (45g·kg-1) and low dose (15g·kg-1) of TCM-MS micropowder group, with 10 rats in each group. The TCM-MS micropowder groups were administered with external application of TCM-MS micropowder twice per day for 7 d separately，where as the normal and model group were orally administered with distilled water, and the control group were orally administered with the Di’ao xinxuekang capsules．The models of acute blood stasis were established by means of subcutaneous injection of adrenaline and ice water bath after treatment for 6 days. The hemorheology indexes were measured 7d after continuous administration in order to investigate the influences of TCM-MS micropowder on the acute blood stasis rat model. Results: The whole blood low shear viscosity, medium shear viscosity, high shear viscosity and plasma viscosity, hematocrit(HCT) and plasma fibrinogen (FIB) of model control group were significantly increased compared with those of the normal group (P<0.01); The whole blood viscosity were decreased in different doses of TCM-MS micropowder group, and compared with the model group, there was significant decrease in the high dose group of TCM-MS micropowder(P<0.05). The plasma viscosity index were significantly reduced in high and middle dose of TCM-MS micropowder group (P<0.05)．There were no significant difference in hematocrit (HCT) and plasma fibrinogen (FIB) between the TCM-MS micropowder group and the model group. Conclusion: The TCM-MS micropowder could significantly improve abnormal change of hemorheology on actue blood stasis model of rats．

Acute blood stasisHemorheologymicrocirculatory disturbanceAnimal,experimentationRats

*全军保健专项课题(12BJ207)

血瘀症血液流变学微循环障碍动物，实验大鼠

R96

Adoi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.10.081