参一胶囊维持治疗对晚期NSCLC患者NF—κb、STAT3影响的回顾性研究

徐舒+冯高飞+宋雨鸿

【摘 要】 目的：对晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者进行回顾性分析，探讨参一胶囊维持治疗对患者炎症因子及STAT3 （信号传导蛋白和转录激活物， signal transducers and activators of transcription 3） 和NF-κB（核因子-κB， nuclear factor kappa B）的影响。方法：经一线化疗后取得缓解或稳定的40名晚期NSCLC患者意向性分为治疗组（A组，20人）和对照组（B组，20人）。A组继续服用参一胶囊每天2次，每次20mg，服药至疾病进展或无法耐受；B组未予特殊治疗。分别于第1d、90d采血，酶联免疫吸附测定患者外周血肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、SATA3和NF-κB。结果：治疗前后比较，治疗组各项炎症指标均未发生明显变化，差异无统计学意义（P>0.05）；而对照组的TNF-α、IL-6、SATA3和NF-κB显著上升，差异均具有统计学意义（P<0.01）；治疗后两组间比较，对照组TNF-α、IL-6、SATA3和NF-κB显著高于治疗组，差异均具有统计学意义（P<0.01）。结论：参一胶囊维持治疗可使晚期NSCLC患者TNF-α、IL-6、SATA3和NF-κB得到有效抑制，进一步提示阻断炎症-癌症正反馈恶性循环可能是参一胶囊维持治疗抑制NSCLC进展的机制之一。

【关键词】 参一胶囊；非小细胞肺癌；维持治疗；信号传导蛋白和转录激活物-3；核因子-κB

【中图分类号】R734 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）12-0121-02

Abstract：Objective To retrospectively investigate the influence of Shenyi Capsule maintenance therapy on inflammatory factors， as well as STAT3 （signal transducers and activators of transcription 3） and NF-κB（nuclear factor kappa B） in patients with advanced NSCLC .Method Forty patients with advanced NSCLC， who had become palliative or stable after first-line chemotherapy ， were intentionally assigned to treatment group and control group equally. Shenyi Capsule was given to treatment group （20mg p.o.， bid） until appearance of deterioration or intolerance， while no special treatment was given to control group. Tumor necrosis factor α （TNF-α）， interleukin-6（IL-6）， STAT3 and NF-κB were tested by blood specimens taken respectively on 1st day and 90th day with ELISA test kit. Results In treatment group， there were no statistical differences （P>0.05） in the level of all the four indexes between 1th day and 90th day. In control group， however， TNF-α， IL-6， STAT3 and NF-κB altogether increased significantly （P<0.01） after 90days. Furthermore， the level of TNF-α， IL-6， STAT3 and NF-κB in treatment group were also lower （P<0.01） than control group on 90th day. Conclusion Shenyi Capsule maintenance therapy could inhibit the expression of TNF-α， IL-6 STAT3 and NF-κB in patients with advanced NSCLC， which once more indicates that blocking the positive feedback of inflammation-cancer vicious spiral may be one of the mechanisms of inhibition from NSCLC progression by Shenyi Capsule maintenance therapy .

Keywords：Shenyi Capsule， NSCLC， Maintenance therapy， SATA3， NF-κB

前期临床观察发现[1]，晚期NSCLC患者一线化疗获益后参一胶囊换药维持治疗可以延长患者平均疾病无进展生存期（PFS）和平均生存时间（OS）；除了参一胶囊抗血管生成机制外，我们发现参一胶囊维持治疗可使晚期NSCLC患者TNF-α、IL-1β及IL-6的低表达，提示调节炎症反应可能是参一胶囊维持治疗抑制NSCLC进展的机制之一[2]。STAT3 和NF-κB是形成肿瘤炎症微环境的关键分子，参一胶囊维持治疗中炎症因子表达的变化是否也伴随有上述关键信号调控蛋白的变化。本文对此前参一胶囊换药维持治疗的晚期NSCLC患者进行回顾性分析，进一步探讨参一胶囊抗肿瘤在炎症方面的作用机制。

1 资料与方法

1.1 标本采集 血清样品采集于2009年12月至2012年12月在广州市中西医结合医院内三科（部分病例来自广州市第一人民医院中医科及东莞市人民医院肿瘤科）收治的经病理学确诊为晚期NSCLC、按标准方案化疗4～6个周期后疗效评价为部分缓解（PR）或稳定（SD）的患者共40例，根据意向分组，治疗组（A组，20例）服用参一胶囊（20mg，口服，2次/d）维持治疗，对照组（B组，20例）未接受维持治疗。分别在末次化疗周期后第1天及第90天抽取患者血液，4℃过夜，5000r/min离心5min取上清，-78℃低温冰箱保存。两组患者年龄、性别组成、吸烟情况（包括二手烟）、病理类型、化疗前临床分期、末次化疗疗效评价、肿瘤转移情况、ECOG评分等组间无差异，具有可比性[1]。

1.2 血清炎症因子、SATA3与NF-κb检测 炎症因子TNF-α、、IL-6，SATA3、NF-κb亚基p65亲和肽 （NF-κb p65） ELISA检测试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司。按照试剂盒说明书操作，使用标准抗原作为对照，做标准曲线，标准曲线的r2>0.9（P<0.01），分别检测两者的表达水平。

1.3 统计学分析 用SPSS 21.0软件进行统计分析，采用双侧检验，取P<0.05为有差异具有统计学意义。计量资料采用均数±标准差描述，组内及组间差异采用t检验。

2 结果

2.1 两组炎症因子变化比较 两组间第1天时各炎症因子比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。90天后，治疗组内炎症因子变化差异无统计学意义（P>0.05）；但对照组内TNF-α、IL-6显著上升，差异具有统计学意义（P<0.01）；同样，第90天时两组间比较，对照组TNF-α、IL-6显著升高，差异均具有统计学意义（P<0.01），见表1。

2.2 两组SATA3及NF-κB变化比较 两组间第1天时SATA3和NF-κB比较无统计学差异（P>0.05），具有可比性。90天后，治疗组内SATA3和NF-κB变化差异无统计学意义（P>0.05）；但对照组内SATA3和NF-κB显著上升，差异均具有明显统计学意义（P<0.01）；同样，第90天时两组间比较，对照组SATA3和NF-κB显著升高，差异均具有明显统计学意义（P<0.01）。见表1。

3 讨论

近年来，通过大量的流行病学、遗传学和分子生物学研究，越来越多的证据证实炎症在肿瘤发生、发展中重要作用：肿瘤微环境中炎症介质不断介导产生氧化应激产物，诱导正常上皮细胞发生恶性转化；同时，炎性细胞和/或肿瘤细胞通过分泌多种不同的生长因子、炎性因子，促进肿瘤细胞生长，从而使肿瘤成为“永不愈合的创伤”[3-4]。进一步研究发现[5-7]，SATA3与NF-κB可能是调控肿瘤细胞与炎性细胞交互作用的核心分子。SATA3可通过介导炎症介质的细胞外信号调控肿瘤细胞的生物学行为，是慢性炎症促进肿瘤发生及肿瘤相关性炎症形成过程中不可或缺的关键性分子。NF-κB则参与成百上千个转录基因的调节，控制重要的细胞活动；炎症因子激活NF-κB后可上调促生存基因的表达，并与STAT3产生相互作用促进肿瘤的发生、迁移、侵袭和增殖等生物学反应。NF-κB与STAT3作用的靶基因广泛且相互重叠，它们协同调控多种炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-1等）的表达，而炎症因子的表达又可正反馈增强NF-κB和STAT3的活化，维持肿瘤的炎症微环境，形成炎症-癌症正反馈的恶性循环。

炎症在肺癌中的作用亦是如此：流行病学提示肺部慢性炎症疾病人群发生肺癌的风险要明显高于普通人群[8]；临床研究表明，与健康者相比，NSCLC患者的TNF-α、IL-1β、IL-6显著升高，而IL-10明显下降[9，10]。作为调控肿瘤细胞与炎性细胞交互作用核心分子的NF-κB与STAT3也与肺癌进展有关[11-13]，NF-κB p65和STAT3在肺癌组织中高表达，SATA3在NFSLC患者外周血中也是高表达，而且这种高表达都与肿瘤恶性程度和临床分期正相关。

基于上述基础研究，以及我们前期的回顾性研究[2]，有理由推测，抑制炎症反应、而且有可能是调控炎症反应信号通路的核心分子，也是参一胶囊抗肿瘤的重要机制之一。本研究进一步证实了参一胶囊维持治疗延长患者生存期的过程中，持续抑制了炎症因子TNF-α、IL-6的表达；更为重要的是也抑制了外周血NF-κB p65和STAT3的表达。具体表现为治疗组90天后SATA3和NF-κB变化差异均无统计学意义（P>0.05），而对照组SATA3和NF-κB明显升高，差异具有统计学意义（P<0.01），在第90天两组间比较，对照组SATA3和NF-κB也显著高于治疗组，差异具有统计学意义（P<0.01），说明TNF-α、IL-6、SATA3和NF-κB等与炎症相关的重要分子在治疗组得到了长期的有效抑制，导致了较好的临床结局。当然，由于是回顾性研究，无法完全排除患者自身机会性感染、服药情况等因素对这些炎症因子的影响，但结合两次对照分析来看，炎症因子变化趋势与疗效（生存期）的变化是一致的。虽然不清楚是因为参一胶囊降低了TNF-α、IL-6等炎症因子表达导致SATA3和NF-κB低激活水平，还是直接作用于SATA3和NF-κB，从而抑制了靶基因的表达，抑或对炎症相关的分子及信号转导均有抑制作用；但可以明确的是，参一胶囊的确抑制了炎症的信号转导，阻断了炎症-癌症正反馈的恶性循环，从而起到抑制肿瘤的作用，即便这种作用还不够强大。

肿瘤复杂的生物学特征和既往以化疗为主要治疗手段的历程告诉我们，想要长期控制肿瘤，最终治愈肿瘤，必须从多种机制着手，寻找更为合理的治疗方案。本研究提示，参一胶囊能够通过降低TNF-α、IL-6、SATA3和NF-κB等炎症相关分子表达水平，发挥其抗肿瘤作用；因此阻断炎症-癌症正反馈的恶性循环将是抗肿瘤的重要策略

之一，有必要寻找针对此通路更为稳定、高效的药物，以提高临床抗肿瘤疗效。

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（收稿日期：2016.04.15）