内蒙古地区健康及患阴道蝇蛆病双峰驼的主要血液指标比较分析

姜建强，戴 钦 ，那仁巴图，哈斯楚鲁，白 龙，宝 山 ，额尔德木图 ，额尔敦木图

（1.内蒙古农业大学兽医学院 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010018；2.内蒙古阿拉善经济开发区农牧业服务中心，内蒙古 阿拉善左旗 750336；3.内蒙古农业大学动物科学学院，内蒙古 呼和浩特 010018；4.内蒙古阿拉善右旗农牧业和科学技术局，内蒙古 阿拉善右旗 737300；5.内蒙古鄂托克旗蒙西镇农牧业执法队，内蒙古 鄂托克旗 016062；6.内蒙古巴彦淖尔市家畜改良工作站，内蒙古 临河区 015000；7.内蒙古苏尼特右旗畜牧工作站，内蒙古 苏尼特右旗 011200）

内蒙古地区健康及患阴道蝇蛆病双峰驼的主要血液指标比较分析

姜建强1，戴 钦2，那仁巴图3，哈斯楚鲁4，白 龙5，宝 山6，额尔德木图7，额尔敦木图1

（1.内蒙古农业大学兽医学院 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010018；2.内蒙古阿拉善经济开发区农牧业服务中心，内蒙古 阿拉善左旗 750336；3.内蒙古农业大学动物科学学院，内蒙古 呼和浩特 010018；4.内蒙古阿拉善右旗农牧业和科学技术局，内蒙古 阿拉善右旗 737300；5.内蒙古鄂托克旗蒙西镇农牧业执法队，内蒙古 鄂托克旗 016062；6.内蒙古巴彦淖尔市家畜改良工作站，内蒙古 临河区 015000；7.内蒙古苏尼特右旗畜牧工作站，内蒙古 苏尼特右旗 011200）

旨在了解内蒙古地区健康及患阴道蝇蛆病双峰驼的主要血液指标之间的差异。从内蒙古阿拉善左旗等地采集健康及患阴道蝇蛆病双峰驼血液样本107份，采用瑞氏染色法和吉姆萨染色法对制备的血液涂片进行染色，观察并比较健康及患病双峰驼血液的红细胞与白细胞的形态特征；利用血液细胞分析仪测定血液样本的血细胞含量，并对相同及不同地区的健康及患病双峰驼的主要血常规指标进行统计学分析；应用比值方法估计血液样本的血浆含量。结果表明，患病驼血液中的嗜碱性粒细胞含量较少，嗜酸性粒细胞含量较多，且血小板含量较健康驼多；来自相同地区的患病驼与健康驼的各种血细胞含量无显著差异（P＞0.05）；不同地区的健康驼血细胞含量趋于平稳，但不同地区的患病驼血细胞含量变化存在较大波动；双峰驼的血浆含量为0.349 0～0.736 5，患阴道蝇蛆病的双峰驼血浆含量普遍高于健康双峰驼。

阴道蝇蛆病；双峰驼；血细胞含量；差异

图1 双峰驼阴道感染黑须污蝇

图2 黑须污蝇幼虫

图3 健康及患阴道蝇蛆病双峰驼的血液涂片观察

双峰驼阴道蝇蛆病的病原为黑须污蝇的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期幼虫。黑须污蝇是我国北方草原及半荒漠草原地区常见的寄生性蝇类。该病一般在每年的4月底至5月初开始出现，9月底至10月初消失，其中6月、7月、8月为该病流行的高峰期，7月为最高峰［1］。研究表明，黑须污蝇只寄生在活体动物组织内［2］。 据报道，黑须污蝇可感染山羊［3］、马［4］、狗［5］、鹅［6］，也可感染人类［7］。

当黑须污蝇在双峰驼的阴门处产下幼虫后，通常会有数个蝇蛆以头在里尾在外的形式在阴门处形成蝇蛆孔道，使阴门肿胀、紧闭，蝇蛆破坏阴道内部组织时可引起局部组织出血（见图1、图2）。阴道蝇蛆病在我国阿拉善地区骆驼群体中的发病率为20%～30%，死亡率为 2%左右［8］。

1 材料与方法

1.1 样本来源 于2014年8月，分别从内蒙古阿拉善盟阿拉善左旗、阿拉善右旗，锡林郭勒盟苏尼特右旗以及鄂尔多斯市鄂托克旗采集健康和患阴道蝇蛆病双峰驼的血液样本，每只双峰驼采集1份，共107份。血液样本用EDTA-K2抗凝。

1.2 血液涂片的观察 利用采集的双峰驼血液样本制备全血涂片。为了更容易地观察到嗜酸性粒细胞与嗜碱性粒细胞，待血细胞沉降分层后吸取白细胞层进行涂片 （带有其他血细胞，但以白细胞居多），并用瑞氏染色法和吉姆萨染色法对其进行染色，于显微镜下观察红细胞与白细胞的形态特征。

1.3 血常规分析 利用BC-2600Vet型血液细胞分析仪（Mindray公司产品）对血液样本进行血常规指标的检测。

表1 内蒙古地区健康及患阴道蝇蛆病双峰驼的血常规指标测定与比较分析结果

表2 样本的血浆含量统计结果

表3 血浆含量方差分析

1.4 血浆含量分析 采用比值方法估计血浆含量。将采集的血液样本2 500 r/min离心10 min后，用游标卡尺分别测量上部血浆的宽度及下部血细胞的宽度（包括白细胞层与红细胞层），用血浆宽度与全血宽度比值来表示血浆含量。

1.5 数据处理 试验数据用SAS软件进行Oneway ANOVA（单因素非均衡数据）分析，差异性水平为 α=0.05。

2 结果与分析

2.1 血液涂片观察 对双峰驼的血涂片进行观察可以看出，双峰驼的红细胞为椭圆形无核细胞（见图3A），中性粒细胞核分叶较多（见图3A），多在4～5叶；在患病驼的血液中存在发生形变的白细胞，且血小板含量较健康驼多（见图3B）；在患病驼血液中嗜碱性粒细胞含量较少（见图3C），但存在较多含量的嗜酸性粒细胞（见图3D）。

2.2 健康及患阴道蝇蛆病双峰驼的血细胞含量差异性分析 由表1可以看出，来自同一地区的患病驼与健康驼的各种血细胞含量无显著差异 （P＞0.05），仅存在不同程度的波动。对不同样本来源地区的患病驼血细胞含量进行分析（DUNCAN分组对比）可知，多个地区的患病驼血细胞含量呈现显著差异，如阿拉善左旗患病驼白细胞总量 ［（27.47±8.06）×109/L］显著高于阿拉善右旗患病驼白细胞总量［（12.46±3.87）×109/L］（P＜0.05），阿拉善左旗、阿拉善右旗、苏尼特右旗的患病驼淋巴细胞含量均显著高于鄂托克旗患病驼淋巴细胞含量 （P＜0.05），等。此外，健康驼的部分血细胞含量也呈现出显著的地区差异，并且主要集中在阿拉善左旗和阿拉善右旗这两个地区的双峰驼，如阿拉善左旗健康驼的白细胞总量、单核细胞含量、中性粒细胞含量及血小板含量均显著高于阿拉善右旗健康驼（P＜0.05）。由此可知，各地区健康驼的血细胞含量趋于平稳，但不同地区的患病驼血细胞含量变化较不同地区的健康驼血细胞含量变化存在较大波动。

2.3 血浆含量分析 测量样本的血浆宽度及下部血细胞的宽度，采用比值方法估计血浆含量。结果表明，样本的血浆含量从0.349 0～0.736 5不等。对血浆含量数据进行初步统计分析，结果见表2。

对获得的数据进行分组，组1为血浆含量过低组 （0.349 0～0.455 6）， 组 2为血浆含量正常组（0.461 5～0.597 0），组 3 为血浆含量过高组（0.600 0～0.736 5），用SAS软件对3组数据进行One-way ANOVA分析，结果见表3。由表3可知，在0.05水平下组1、组2、组3之间相互存在显著差异 （P＜0.05）。统计各组双峰驼阴道蝇蛆病的发病率，组1为17.6%，组2为13.5%，组3为82.4%。由此可知，患阴道蝇蛆病的双峰驼血浆含量普遍高于健康双峰驼。

3 讨论

3.1 全血涂片 从血液涂片可以看出，患病驼的血细胞组成与健康驼存在一定的差别，患病驼的部分白细胞发生形变，且有较多含量的嗜酸性粒细胞，但嗜碱性粒细胞含量较少。有学者对单峰驼的中性粒细胞进行形态观察发现，单峰驼的中性粒细胞存在较多的分叶核，核质比较低，并存在类似于嗜酸性粒细胞中的层状颗粒［9］。由图3C可以看出，患病双峰驼的中性粒细胞的核质比较低，推测在蝇蛆病发病过程中嗜酸性粒细胞发挥重要的抵抗作用，且中性粒细胞可能对嗜酸性粒细胞起到一种间接的补偿作用。

3.2 血细胞含量 该研究结果表明，患病驼的中性粒细胞含量普遍较健康驼高（P＞0.05）。在其他寄生虫感染，如阴道滴虫感染中，中性粒细胞能够同时包围杀灭虫体，在有氧环境下中性粒细胞对阴道滴虫的杀灭率为97%，无氧条件下为15%［10］。从血小板含量来看，大部分地区的患病驼略高于健康驼，原因可能是蝇蛆造成的伤口引起机体应激，产生多量的血小板用于伤口血液凝固，促进伤口愈合。但从实际观察来看，血小板的保护机制并没有明显作用，蝇蛆的不断生长与蠕动使伤口不断扩大、恶化，直至蝇蛆落地，若在此期间有新的蝇蛆寄生，则会造成伤口持久不能愈合，最终破坏双峰驼外阴或阴道的正常组织结构，严重的甚至发生脱肛与脱阴。有研究表明，与人血小板相比，骆驼的血小板拥有更大的α颗粒、致密体及鞭状扩展，但是缺乏与表面相连的开放管道系统，这些骆驼与人及其他动物血小板之间的结构差异和变化可能在骆驼的止血和血栓形成过程中发挥重要作用［9］。

3.3 血浆含量差异 研究过程中发现，采集的血液中血浆含量差异较大，3组血浆含量在0.05水平下存在显著差异。Yagil等［11］在研究骆驼红细胞时发现，骆驼在饮水后有大量水会进入血液。从各组的阴道蝇蛆病发病率来看，患病驼的血浆含量相对较高，存在阴道蝇蛆病导致双峰驼血浆含量升高的可能。但在该研究中，因为地域、气候、环境等影响因素较多，且所采集样本群体为野外采食状态，在采血之前并没有进行统一饲养，因此群体与群体、个体与个体之间的营养状况存在较大差异，所以不考虑血浆含量对双峰驼阴道蝇蛆病血细胞含量变化的影响，仅对此提出疑问。血浆含量升高和阴道蝇蛆病的发生之间是否存在关联性仍有待进一步研究。

4 小结

相同地区的患病驼与健康驼血细胞含量变化并不显著，只存在一定程度的增高与降低，但是不同来源地区的双峰驼（包括健康和患病驼）血细胞含量存在较大差异，这可能与不同群体的双峰驼所处的环境、营养状况及发病阶段（病程约7 d左右）有关。该研究结果可为进一步阐明健康与患阴道蝇蛆病的双峰驼的生理指标变化特征及不同地区双峰驼群体的生理特征差异提供科学依据。

［1］呼和巴特尔，白音巴图，杜跃峰.双峰骆驼阴道蝇蛆病流行病学调查［J］.内蒙古农牧学院学报，1994（4）：59-62.

［2］呼和巴特尔，白音巴图，杜跃峰.黑须污蝇（Wohlfahrtia magnifica Schiner.1862）生活习性的观察与研究［J］.内蒙古农牧学院学报，1994（2）：1-4.

［3］SOTIRAKI S，STEFANAKIS A，HALL M J.Assessment of coypermethrin and doramectin for controlling wohlfahrtiosis in Crete［J］.Vet Parasitol，2003，116（4）：327-332.

［4］FARKAS R，KÉPES G.Traumatic myiasis of horses caused by Wohlfahrtia magnifica［J］.Act Vet Hung，2001，49（3）：311-318.

［5］FARKSA R，HALL M J，BOUZAGOU A K，et al.Traumatic myiasis in dogs caused by Wohlfahrtia magnifica and its importance in the epidemiology of wohlfahrtiosis of livestock ［J］.Med Vet Entomol，2009，23 （Suppl 1）：80-85.

［6］HADANI A，BEN YAAKOV B，ROSEN S.Myiasis caused by Wohlfahrtia magnifica （Schiner,1862）in the Arabian camel（Camelus dromedarius）in the Peninsula of Sinai［J］.Rev Elev Vet Trop，1989，42（1）：33-38.

［7］BAYINDIR T，MIMAN O，MIMAN M C，et al.Bilateral aural myiasis（Wohlfahrtia）：a case with chronic suppurative otitis media［J］.Turkiye Parazitol Derg，2012，34（1）：65-67.

［8］额尔敦木图，达能太，王立华，等.阿拉善双峰骆驼阴道蝇蛆病的发病调查 ［J］. 中国兽医杂志，2012，48（3）：46-47.

［9］GADER A G，GHUMLAS A K，HUSSAIN M F，et al.The ultrastructure of camel blood platelets：a comparative study with human，bovine，and equine cells ［J］.Platelets，2008，19（1）：51-58.

［10］赵建玲，高兴政，屈明.中性粒细胞杀灭阴道毛滴虫作用的研究［J］.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2008，25（5）：366-369.

［11］YAGIL R，SOD-MORIAH U A，MEYERSTEIN N.Dehydration and camel blood.Ⅱ.Shape，size，and concentration of red blood cells ［J］.Am J Physiol，1974，262 （2）：301-304.

Comparison and Analysis on Main Blood Parameters of Healthy and Vaginal Myiasis Bactrian Camels in Inner Mongolia

JIANG Jian-qiang1，DAI Qin2，Narenbatu3，Hasichulu4，Bailong5，Baoshan6，Eerdemutu7，Eerdunmutu1
（1.Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease of Ministry of Agriculture，College of Veterinary Medicine，Inner Mongolia Agricultural University， Hohhot 010018，China；2.Agricultural and Animal Husbandry Service Center of Alxa Economic Development Zone of Inner Mongolia,Alxa Left County 750336，China；3.College of Animal Science，Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018，China；4.Agricultural， Animal Husbandry，Science and Technology Bureau of Alxa Right County of Inner Mongolia，Alxa Right County 737300，China；5.Agricultural and Animal Husbandry Enforcement Team in Mengxi Town of Otog County of Inner Mongolia，Otog County 016062，China；6.Livestock Improvement Workstation of Bayannur of Inner Mongolia，Linhe District 015000，China；7.Animal Husbandry Workstation of Sonid Right County of Inner Mongolia，Sonid Right County 011200，China）

The aim of the present study was to understand the differences in main blood parameters between healthy and vaginal myiasis Bactrian camels in Inner Mongolia.A total of 107 Blood samples were collected from healthy and vaginal myiasis Bactrian camels in Alxa Left County and other main Bactrian camels distributing regions of Inner Mongolia.The blood smears were prepared and subsequently stained by Wright′s and Giemsa′s staining methods.The morphological characteristics of red blood cells and white blood cells of healthy and diseased Bactrian camels were observed and compared.The content of blood cells was determined by automatic blood cell analyzer.The main routine blood index of healthy and diseased Bactrian camels from the same and different regions were statistically analyzed.The ratio method was used to evaluate the plasma content of blood samples.The results revealed that the content of basophilic granulocyte in diseased Bactrian camels blood was relatively lower,but the content of eosinophilic granulocyte was relatively higher.Higher content of blood platelets in healthy Bactrian camels blood was found.No significant differences in blood cells content between healthy and diseased Bactrian camels from the same region were observed （P＞0.05）.Obvious changes in blood cells content of diseased Bactrian camels from different regions were found,but no obvious regional changes were observed in healthy Bactrian camels.The plasma content of the Bactrian camels included in this study ranged from 0.349 0 to 0.736 5,and the plasma content of most diseased Bactrian camels was higher than that of healthy Bactrian camels.

vaginalmyiasis；Bactrian camels；blood cells content；differences

S858.245.9

A文章顺序编号：1672-5190（2016）04-0008-04

2016－03－20

项目来源：国家自然科学基金项目（地区基金，31360591）；内蒙古自治区自然科学基金项目（2012MS0421）；教育部留学回国人员科研启动基金项目 ［教外司留（2011）1139号］；内蒙古自治区人才开发基金项目［2010（108-111040）］。

姜建强（1989—），男，硕士研究生，主要研究方向为动物解剖及黏膜免疫。

额尔敦木图（1965—），男，教授，博士，硕士生导师，主要研究方向为动物解剖及黏膜免疫。

（责任编辑：赵俊利）