YKL-40在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值

徐志伟，王冠男，叶龙强，汤耀东，李桃红，董绉绉

YKL-40在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值

徐志伟，王冠男，叶龙强，汤耀东，李桃红，董绉绉

目的探讨YKL-40在良恶性胸腔积液中的鉴别诊断价值。方法选取胸腔积液患者95例，其中恶性胸腔积液（MPE）42例，良性胸腔积液（BPE）53例。采用夹心酶联免疫吸附法检测胸腔积液及血浆中YKL-40浓度。结果MPE中YKL-40显著高于BPE中（＜0.05）。然而，胸腔积液中YKL-40和癌胚抗原（CEA）间无相关性（=0.2478，=0.298）。YKL-40在诊断MPE的最佳临界值为180.2 ng/ml，受试者工作特征曲线下面积为0.7944 （95％0.68～0.89，＜0.01），其敏感度为83.9％，特异度为73.3％，具有较高的诊断价值。结论检测胸腔积液中YKL-40有助于MPE的鉴别诊断。

胸腔积液；YKL-40；鉴别诊断

良恶性胸腔积的液鉴别诊断一直是临床工作中的难点。胸腔镜等检查特异性高［1］，但属于有创检查，高龄患者无法耐受。因此，亟须寻找一种简单无创、敏感性及特异性较好的方法。YKL-40是一种壳多糖酶样蛋白，通常在炎症和肿瘤过程中产生，主要由巨噬细胞、滑液细胞、软骨细胞和中性粒细胞分泌［2］。血浆YKL-40水平在多种恶性疾病中升高，并和预后相关，另外在哮喘、肝硬化、肉瘤样变、骨关节炎和炎症性肠病等疾病升高［3-5］。目前，YKL-40的功能尚未完全明确，可能在组织重组发挥作用。考虑到肿瘤在其发展过程中同时伴随显著的组织重构，因此研究YKL-40可能对恶性胸腔积液（MPE）的诊断提供帮助。癌胚抗原（CEA）是上皮来源肿瘤细胞的肿瘤标记物。本研究拟采用夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测胸腔积液及血浆中YKL-40表达水平，并评估其在MPE中的诊断效能。报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料收集2013年1月至2015年12月宁波市医疗中心李惠利医院收治的胸腔积液患者247例，胸腔积液患者于住院24h内，未经过任何治疗前收集标本。MPE诊断需符合下列3项：（1）影像学结果符合原发性支气管肺癌并发胸腔积液；（2）经纤维支气管镜或者胸腔镜取得的肺部组织活检，病理学确诊为肺癌；（3）胸腔积液脱落细胞学检查检测到转移性肿瘤细胞［6-7］。剔除符合以下任意一项者：（1）入院前半年内，曾罹患有胸部外伤者或接受任何关于创性胸膜腔检查治疗者；（2）曾接受过任何抗肿瘤或抗结核治疗，使用过糖皮质激素、非甾体抗炎药，或免疫抑制剂者；（3）合并有其他免疫因素性疾病；（4）胸腔积液的病因诊断不清楚者。

1.2方法（1）抽取胸腔积液患者清晨空腹静脉血4ml，分离血浆，低温（-80℃）冰箱冻存，待统一检测；（2）采用标准胸腔穿刺术抽取胸水后，留取新鲜胸水10ml， 3 000 r/min离心10 min，收集上清液置于-80℃冰箱保存，待测定YKL-40；（3）YKL-40采用ELISA测定，兔抗人YKL-40多克隆抗体试剂盒（购自上海蓝基生物有限公司），严格按试剂说明书操作。根据标本吸光度绘制标准曲线并计算YKL-40浓度。采用化学发光法分析检测CEA。

1.3统计方法应用SPSS19.0统计软件进行分析，如结果符合正态分布，计量资料用平均数±标准差表示，采用检验；若不符合正态分布，采取中位数（四分位数间距）表示，采取Wilcoxon秩和检验行组间比较；曲线分析胸腔积液及血浆中YKL-40水平在鉴别良恶性胸腔积液中的价值；Spearman's研究胸腔积液及血浆的相关性。＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1一般情况最终有95例患者纳入研究。良性胸腔积液（BPE）患者53例，其中结核性胸腔积液36例，肺炎旁胸腔积液12例，心源性胸腔积液5例；MPE 42例，其中肺腺癌20例，肺鳞癌16例，转移性肿瘤6例。良恶性胸腔积液患者年龄、性别、BMI差异均无统计学意义（均＞0.05）；总白蛋白、乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶差异均有统计学意义（均＜0.05），见表1。

表1　两组一般情况及胸腔积液相关指标

表2　两组患者血浆和胸腔积液中YKL-40及CEA表达水平

2.2两组血浆和胸腔积液中YKL-40及CEA比较胸腔积液YKL-40浓度（［189.22± 74.93）ng/ml］高于血浆中YKL-40浓度（［144.43±54.85）ng/ml，=3.363，＜0.05］。MPE胸腔积液中YKL-40浓度高于BPE组（＜0.01），然而，血浆中YKL-40差异无统计学意义（＞0.05）；MPE组胸腔积液及血浆CEA均高于BPE组（均＜0.05）。见表2。

2.3YKL-40在MPE诊断中的价值胸腔积液中YKL-40的曲线下面积（AUC）（0.7944，95％0.68～0.89，＜0.05）具备较高的诊断价值。YKL-40诊断MPE的最佳临界值为180.2ng/ml，其敏感度为83.9％，特异度为73.3％。胸腔积液CEA浓度为30.24 ng/ml诊断MPE的AUC为（0.8626，95％0.78～0.94，＜0.05），具备较高的诊断价值，敏感度为87.2％，特异度为82.3％。两项指标AUC＞0.7，具有较准确诊断价值，两项AUC差异无统计学意义（=3.29，=0.19）。见图1。

2.4MPE中YKL-40浓度表达和外周血CEA相关性研究胸腔积液中YKL-40浓度和CEA间无相关性（=0.2478，=0.298）。

3　讨论

图1　胸腔积液中YKL-40及CEA诊断良恶性胸腔积液的受试者工作特征曲线

恶性肿瘤的生物学行为主要表现为实质细胞的恶性增殖与间质成分（微环境）的重塑。目前研究发现YKL-40可能类似生长因子在微环境的重塑中发挥重要作用。研究其表达水平可能对肿瘤诊断提供帮助。

本研究显示，患者胸腔积液YKL-40浓度显著高于血浆中YKL-40浓度（＜0.05）。其原因可能与YKL-40在局部微环境释放较多，并发挥重组作用有关。并且在MPE中YKL-40浓度高于其他疾病所致胸腔积液中的浓度。胸腔积液中YKL-40的ROC曲线下面积（0.7944，95％0.68～0.89，＜0.05）具有较高的诊断价值。YKL-40诊断MPE的最佳临界值为180.2 ng/ml，其敏感度为83.9％，特异度为73.3％，提示胸腔积液中YKL-40表达水平在MPE诊断具有较大意义。本研究结果与Attia等［8］报道基本一致，然而，Attia等未进一步研究YKL-40和其他MPE诊断标志物之间是否存在相关性。本研究通过Spearman's相关性分析胸腔积液YKL-40与血浆CEA的关系，结果示两者间无相关性（=0.2609，=0.1562），可能与纳入样本数偏少，未能进一步行亚组分析有关。

究其原因，首先，YKL-40可能具有类似生长因子的作用，细胞实验及动物实验中，通过抑制YKL-40在肿瘤细胞中的表达，肿瘤内皮细胞迁移能力明显减低，血管数量较对照组减少明显［9］。其次，YKL-40和VEGF信号通路存在相互作用，还可能和细胞紧密连接丢失以及MMP家族激活相关。

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［9］ShaoR，HamelK，PetersenL，etal.YKL-40，a secreted glycoprotein，promotes tumor angiogenesis［J］.Oncogene，2009，28（50）：4456-4468.

10.3969/j.issn.1671-0800.2016.08.047

R561

A

1671-0800（2016）08-1067-03

2016-05-04

（本文编辑：孙海儿）

宁波市自然科学基金项目（2016A610193）

315040宁波，宁波市医疗中心李惠利东部医院

徐志伟，Email：xu-zw@ qq.com