鸭病毒性肝炎二价（1型+3型）卵黄抗体（JS株+SD株）被动免疫持续期研究

宋扬，李建华，藏玉婷，孙德君，孙晓峰，武啸

（哈药集团生物疫苗有限公司研发中心黑龙江哈尔滨150069）

鸭病毒性肝炎二价（1型+3型）卵黄抗体（JS株+SD株）
被动免疫持续期研究

宋扬，李建华，藏玉婷，孙德君，孙晓峰，武啸

（哈药集团生物疫苗有限公司研发中心黑龙江哈尔滨150069）

本实验取3批实验室试制的卵黄抗体，按0.5mL/只接种3日龄SPF雏鸭，1.0mL/只接种6日龄SPF雏鸭，分别在注射抗体后1、3、5和7d攻毒，观察攻毒保护情况。结果显示，3和6日龄雏鸭接种抗体后1～5d注射1型和3型鸭甲型肝炎强毒，攻毒保护率均在90%以上；雏鸭接种抗体后7d注射鸭甲型肝炎强毒的攻毒保护率仅在70%～76.7%之间，攻毒对照组90%～100%死亡，健康对照组100%健活。说明注射抗体后5d抗体仍能产生良好地保护作用，而7d后保护作用大幅减弱。因此，确定鸭病毒性肝炎二价（1型+3型）卵黄抗体（JS株+SD株）被动免疫保护期为5d。

被动免疫保护期；卵黄抗体；雏鸭

鸭病毒性肝炎 （Duck viral hepatitis，DVH）是由鸭肝炎病毒（duck hepatitis virus，DHV）引起雏鸭的一种以肝脏为主要病理变化的急性、高度致死性传染病。目前我国主要流行1型鸭甲型肝炎病毒及“韩国新型”（即3型鸭甲型肝炎病毒），且发病率和死亡率均呈上升趋势［1］。1～3周龄的雏鸭易感，发病严重，传播迅速，死亡率高。雏鸭一般感染病毒后30h发病，并在2h内死亡。早期预防对控制本病十分重要，但各种抗菌药物对本病均无治疗作用，本病的特异性防治依赖于被动免疫和主动免疫，为了控制该病的发生，使用卵黄抗体做紧急预防接种有较大的实践意义。但使用卵黄抗体时，卵黄抗体在机体内的被动免疫期是决定卵黄抗体免疫程序的决定性因素［2，3］。为此，本实验对制备的二价卵黄抗体进行了抗体接种雏鸭后不同时间对与雏鸭攻毒保护相关性研究，以确定鸭肝炎二价卵黄抗体在雏鸭体内的被动免疫持续期。

1　材料与方法

1.1材料

1）鸭病毒性肝炎二价（1型+3型）卵黄抗体（JS株+SD株）：批号：201201、201202、201203，由哈药集团生物疫苗有限公司制备。

2）检验用强毒：1型鸭甲型肝炎病毒JS株肝组织悬液，批号：DHAV-JS-Q-01-2，病毒含量：106.50LD50/0.1mL，规格：2.0 mL/瓶；3型鸭甲型肝炎病毒SD株肝组织悬液，批号：DHAV-SD-Q-01-2，病毒含量：106.38LD50/0.1mL，规格：2.0mL/瓶，由哈药集团生物疫苗有限公司分离、鉴定、保管和供应。

3）SPF雏鸭：3、6日龄SPF雏鸭，购自哈尔滨兽医研究所。

4）注射器：1.0mL注射器，购自上海达美医用塑料厂。

1.2方法

1.2.13日龄雏鸭被动免疫期试验

每批抗体颈部皮下注射3日龄SPF雏鸭80只，每只0.5mL，同时设同批3日龄SPF雏鸭80只，每只颈部皮下注射生理盐水0.5mL作为攻毒对照；取同批次3日龄SPF雏鸭10只，不注射任何药品作为健康对照。在抗体注射后1、3、5和7d，分别从抗体试验组和攻毒对照组雏鸭中随机抽取20只，各分成两组，每组各10只，一组注射1型鸭甲型肝炎病毒JS株肝组织悬液，每只0.5mL（含100LD50）；另一组注射3型鸭甲型肝炎病毒SD株肝组织悬液，每只0.5mL（含100LD50），各组同条件下隔离饲养10d，记录结果。共计进行3批抗体试验。

1.2.26日龄雏鸭被动免疫期试验

每批抗体颈部皮下注射6日龄SPF雏鸭80只，每只1.0mL，同时设同批6日龄SPF雏鸭80只，每只颈部皮下注射生理盐水1.0mL作为攻毒对照；取同批次6日龄SPF雏鸭10只，不注射任何药品作为健康对照。在抗体注射后

1、3、5和7d，分别从抗体试验组和攻毒对照组鸭中随机抽取20只，各分成两组，每组10只，一组注射1型鸭甲型肝炎病毒JS株肝组织悬液，每只0.5mL（含100LD50）；另一组注射3型鸭甲型肝炎病毒SD株肝组织悬液，每只0.5mL（含100LD50），各组同条件下隔离饲养10d，记录结果。共计进行3批抗体试验。

2　结果

不同日龄SPF雏鸭注射抗体后不同时间攻击鸭甲型肝炎强毒，攻毒后观察10d，测定抗体被动免疫期，结果（见表1～6）。

从表3～6结果可以看出，3批卵黄抗体注射的3和6日龄SPF雏鸭，注射后1～5d鸭甲型肝炎病毒攻毒保护率分别为96.7%～100%和100%，攻毒对照组雏鸭100%死亡；注射后7d，3和6日龄SPF雏鸭的攻毒保护率分别为73.3%和70%～76.7%，攻毒对照组雏鸭90%～100%死亡，健康对照组100%健活。

表1　1型鸭病毒性肝炎抗体预防持续时间测定结果

3　讨论与结论

雏鸭注射卵黄抗体后，抗体在体内能持续存在一段时间，并产生被动免疫保护作用［2］。雏鸭注射抗体后，持续数天，间隔不同时间注射鸭甲型肝炎强毒，结果3和6日龄雏鸭接种抗体后1～5d注射鸭甲型肝炎强毒的攻毒保护率均在90%以上；接种抗体后7d注射鸭甲型肝炎强毒的攻毒保护率仅在70%～76.7%之间，攻毒对照组90%～100%死亡，健康对照组100%健活。说明注射抗体后5d抗体仍能产生良好地保护作用，而7d后保护作用大幅减弱。因此确定鸭病毒性肝炎二价（1型+3型）卵黄抗体（JS株+SD株）被动免疫保护期为5d。■（编辑：赵晓松）

表2　3型鸭病毒性肝炎抗体预防持续时间测定结果

［1］ 范书才，李虹，袁率珍，等.新型鸭肝炎病毒的分离鉴定［J］.中国预防兽医学报，2009，10: 770-775.

［2］ 殷震，刘景华主编.动物病毒学二版［M］.北京:科学出版社，1997:294，328，335.

［3］ 白文彬，于康震主编.动物传染病诊断学［M］.北京:中国农业出版社，2002: 144-145

The Passive Immunity Duration Research ofDuck ViralHepatitis Bivalent（Type1+Type3）Yolk Antibody（Strain JS+Strain SD）

Song Yang，Li Jian-hua，Zang Yu-ting，Sun De-jun，Sun Xiao-feng，W u Xiao
（Harbin pharmaceuticalgroup bio-vaccine Co.，Ltd.，Harbin HeiLongjiang 150069）

Three sample of yolk antibodymade in laboratory was inoculated 3-day-old and 6-day-old SPF duckswith 0.5mL and 1.0mL respectively.After the injection of1357 days，the duckswere injected virulent viruses.The resultsshowed that the1 typeand 3 type ofduck hepatitis virus protection ratewas above 90%after 1～5 days injected 3-day-old and 6-day-old SPF ducks.After 7 days，virulent viruses attack protection rate wasonly between 70%～76.7%.The virus controlgroup was90%～100%death and healthy controlgroup was 100%healthy living.Theantibody could produce Good protection after5 daysofnjection and weak dramatically after 7 daysof injection.Therefore，determine the duck viralhepatitisbivalent（1+3）yolk antibody（JSseedlings）+SD passive immunity protection is5 days.

Passive Immunization ofProtection；Yolk Antibodies；Ducklings

表3　3日龄雏鸭3批抗体1型鸭病毒性肝炎预防持续时间统计结果

表4　6日龄雏鸭3批抗体1型鸭病毒性肝炎预防持续时间统计结果

表5　3日龄雏鸭3批抗体3型鸭病毒性肝炎预防持续时间统计结果

表6　6日龄雏鸭3批抗体3型鸭病毒性肝炎预防持续时间统计结果

10.3969/j.issn.1008-4754.2016.9.048