鼻息肉与变应性鼻炎患者鼻黏膜IL-17水平及嗜酸性粒细胞计数变化及其相关性

刘飞，刘军

(河南省人民医院，郑州450000)



鼻息肉与变应性鼻炎患者鼻黏膜IL-17水平及嗜酸性粒细胞计数变化及其相关性

刘飞，刘军

(河南省人民医院，郑州450000)

目的探讨鼻息肉和变异性鼻炎患者白细胞介素17(IL-17)表达和嗜酸性粒细胞(Eos)浸润情况及其相关性。方法 选择行鼻内镜手术的患者53例，包括鼻息肉组30例、变应性鼻炎组23例，另选择单纯鼻中隔偏曲患者25例作为对照组。采用免疫组织化学染色法检测鼻黏膜组织中IL-17表达，显微镜下观察IL-17阳性细胞计数及Eos计数，并进行相关性分析。结果 鼻息肉组和变应性鼻炎组鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞率分别为83.33%和60.87%，均明显高于对照组的8.00%，且前两组间比较，P<0.05。鼻息肉组鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞数、Eos计数分别为(23.87±2.33)、(14.84±1.44)个/HP，变应性鼻炎组鼻黏膜组织中分别为(16.49±1.89)、(12.03±1.05)个/HP；对照组分别为(4.20±0.33)、(3.27±0.30)个/HP，三组间各指标比较，P均<0.05。鼻息肉、变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞数与Eos计数呈显著正相关(r分别为0.548、0.430，P均<0.05)。结论 鼻息肉和变异性鼻炎患者鼻黏膜组织中IL-17表达升高，Eos浸润增强，且二者具有正相关关系。

鼻息肉；变应性鼻炎；白细胞介素17；嗜酸性粒细胞

白细胞介素17(IL-17)是由Th17细胞分泌的一种强大的炎症前细胞因子，能够促进多种细胞因子释放，其异常表达与多种慢性炎症性疾病的发生密切相关[1,2]。多项研究[3～6]指出，IL-17在慢性气道炎症性疾病中发挥重要作用，参与哮喘气道黏膜的重建，而鼻息肉、变应性鼻炎在气道重建方面与哮喘有许多相似之处，推测其在鼻息肉和变应性鼻炎的发生、发展中发挥重要作用。嗜酸性粒细胞(Eos)浸润被认为是气道变应性病变的主要特征，在鼻息肉等发病中发挥重要作用[7,8]。本研究重点探讨鼻息肉和变应性鼻炎患者IL-17阳性表达和Eos浸润情况，并探讨了其相关性。

1　资料与方法

1.1临床资料研究对象均选自2014年1月～2015年6月于本院耳鼻喉科住院治疗并行鼻内镜手术的患者，均符合2009年武夷山会议制定的诊断标准[9]，且经术后病理检查确诊。其中鼻息肉组患者30例，男20例、女10例，年龄16～54(34.43±4.44)岁；变应性鼻炎组患者23例，男15例、女8例，年龄18～56(33.01±3.20)岁。另选择单纯鼻中隔偏曲患者25例为对照组，且CT或内窥镜检查显示无鼻息肉、鼻窦炎或变应性症状，男17例、女8例，年龄16～59(32.18±3.62)岁。以上患者均为首次就诊且未经过任何系统治疗，均排除其他全身性疾病，且术前4周未服用糖皮质激素、抗组胺药物、免疫抑制剂、抗生素等。研究均征得患者同意，且获得医院伦理委员会审核通过并全程跟踪。3组性别、年龄等资料均衡可比。

1.2标本收集及处理对照组患者取正常下鼻甲部分黏膜组织，鼻息肉患者于鼻内镜术中摘取鼻息肉组织，变应性鼻炎患者于部分下鼻甲组织取小块下鼻甲黏膜组织。标本处理：标本经10%多聚甲醛固定后常规脱水，石蜡包埋、组织切片(4 μm)。切片常规脱蜡，0.1 mol/L PBS洗3次，每次5 min，柠檬酸抗原修复10 min后自然冷却。

1．3鼻黏膜组织IL-17表达的检测及IL-17阳性细胞数、Eos计数的观察采用免疫组织化学染色法检测鼻黏膜组织IL-17。严格按照说明书操作。DAB显色后采用苏木精轻度复染、脱水、透明，中性树胶封片，于显微镜下观察IL-17阳性细胞数、Eos计数，并以PBS代替一抗作为阴性对照。 每张切片随机选择5个视野，于高倍视野下进行Eos计数，取平均值。结果判定：显微镜下观察组织，发现细胞质中出现棕黄色或棕褐色颗粒为IL-17表达阳性。组织中IL-17阳性细胞数、Eos计数阳性判定标准：阳性细胞数≤5%为阴性(-)；阳性细胞数6%～30%为弱阳性(+)；阳性细胞数31%～50%为阳性(++)；阳性细胞数>50%为强阳性(+++)。

2　结果

2.1各组病理学特征所有切片染色背景均清晰，而阴性对照不着色。IL-17的阳性反应为褐色，且主要存在于细胞质中。切片镜下观察，鼻息肉组织中IL-17主要在浆细胞的细胞质内表达，少量在上皮细胞棘细胞层及浆液腺泡内表达。免疫印迹显示，IL-17及受体在鼻息肉组中呈特异性条带表达，且强度明显高于对照组。变应性鼻炎组中IL-17主要在鼻黏膜下层浸润的炎性细胞中显著表达，而间质中腺腔内和血管周围炎细胞中均有不同程度表达，但变应性鼻炎组中未见上皮层表达，可区别于鼻息肉组织。对照组中仅见弱阳性表达且多散在分布于间质中。

变应性鼻炎组黏膜表面为假复层柱状纤毛上层覆盖，黏膜下层间质中有大量炎细胞浸润，且以Eos为主，伴有少量中性粒细胞及浆细胞等；鼻息肉组织表面有假复层柱状纤毛上皮覆盖，且上皮层及间质中以Eos、中性粒细胞浸润为主，另外还可见淋巴细胞、肥大细胞和浆细胞等。对照组下鼻甲黏膜表面覆盖鳞状上皮组织，可见增厚基膜，黏膜下层有较多浆液黏液腺，有少量或无Eos细胞浸润。

2.2各组鼻黏膜组织中IL-17表达比较鼻息肉组和变应性鼻炎组鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞率分别为83.33%和60.87%，均明显高于对照组8.00%，鼻息肉组与变应性鼻炎组比较，P<0.05。见表1。

表1　各组鼻黏膜组织中IL-17表达比较

注：与对照组比较，aP<0.05；与鼻息肉组比较，bP<0.05。

2.3各组鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞数和Eos计数比较见表2。鼻息肉、变应性鼻炎组患者鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞数、Eos计数高于对照组，且鼻息肉组与变应性鼻炎组两指标比较，P均<0.05。

表2　各组鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞数和Eos计数比较(个

注：与对照组比较，aP<0.05；与鼻息肉组比较，bP<0.05。

2.4相关性分析鼻息肉患者鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞数与Eos计数呈显著正相关(r=0.548，P<0.05)；变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞计数与Eos计数呈显著正相关(r=0.430，P<0.05)。

3　讨论

鼻息肉、变应性鼻炎均为耳鼻喉外科的常见、多发疾病，其发生率均呈逐年上升趋势，但其发病机制尚不十分明确，而多认为是一个多因素、多环节、多步骤的过程，且疾病复发率高、易反复，现有手段治疗效果有限，给临床医生带来较大困扰[10～12]。IL-17是由Th17分泌的一种强有力的前炎性细胞因子，具有强大的趋化、激活中性粒细胞和Eos作用，与慢性炎症性疾病、自身免疫系统疾病、过敏反应等均有密切相关性[13，14]。Th17还可调节Th2介导的Eos浸润为主的炎症，通过不同细胞内信号激酶而调节Eos功能，以促进炎症反应[15]。

研究[16]认为，哮喘和鼻息肉、变应性鼻炎均是大量Eos浸润的同一类气道疾病，且存在气道重建方面的相似之处。鼻息肉以Eos浸润为主，是鼻黏膜的慢性炎症性疾病。IL-17在鼻息肉患者中表达增加，以有助于气道重建，在趋化炎症细胞和组织重塑方面有重要作用;在变应性鼻炎发病中发挥免疫炎症反应，与Eos趋化同等重要。

本研究重点探索鼻息肉和变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中IL-17阳性表达和Eos浸润情况，结果显示，鼻息肉和变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中IL-17阳性率均高于对照组，而IL-17阳性细胞数、Eos计数与对照组比较均有明显增加，且上述指标两组间比较差异均有统计学意义。提示Eos和IL-17均参与鼻息肉和变应性鼻炎的发生。Eos浸润被认为是变态反应的局部特征性表现。临床研究认为，鼻息肉患者绝大多数表现为Eos炎症，可产生、分泌大量促炎细胞因子，加重气道黏膜的慢性损伤，以促进黏膜重塑、疾病发展。IL-17会诱导不同细胞产生大量的促炎症因子，而这些炎症因子与鼻息肉的发病有密切相关性；另外还与过敏反应、自身免疫系统疾病的发生相关。本研究结果显示，鼻息肉患者和变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中IL-17阳性细胞数与Eos计数均呈显著正相关，提示IL-17有趋化Eos的作用，IL-17作为一种促炎细胞因子，对中性粒细胞激活、募集均有巨大的趋化作用，其会促进Eos在气道的浸润和活化，促使炎症扩散及局部组织损伤和黏膜重塑。

综上所述，鼻息肉和变异性鼻炎患者鼻黏膜组织中IL-17表达增强，与Eos浸润共同参与疾病的发生、发展。

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刘飞(E-mail: 450698731@qq.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.29.026

R765.21

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1002-266X(2016)29-0073-03

2016-02-09)