全自动血液分析仪外周血细胞计数的影响因素探讨

王宇

中国民航飞行学院医院检验科，四川广汉618307

全自动血液分析仪外周血细胞计数的影响因素探讨

王宇

中国民航飞行学院医院检验科，四川广汉618307

目的探讨全自动血液分析仪外周血细胞计数的影响因素。方法选择中国民航飞行学院医院健康体检人群120例，在不同抗凝剂、不同温度和检测时间采用Sysmex XT-1800i全自动血细胞分析仪检测红细胞（RBC）、白细胞（WBC）和血小板（PLT）。结果肝素钠、枸橼酸钠和EDTA-K2抗凝剂检测WBC和RBC差异无统计学意义（P＞0.05），肝素钠和枸橼酸钠抗凝的血标本PLT计数显著低于EDTA-K2抗凝血标本（P＜0.05）。25℃室温保存下血标本WBC、RBC和PLT在30 min、2、4、6 h的测定结果差异无统计学意义（P＞0.05）。在4℃低温保存下血标本WBC、RBC在30 min、2 h、4 h、6 h的测定结果差异无统计学意义（P＞0.05）。而PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的测定结果差异有统计学意义（P＜0.05）。结论抗凝剂、温度和检测时间是影响外周血计数的重要因素，外周血细胞计数应该选择EDTA-K2抗凝剂、25℃、6h小时内完成检测。

外周血；细胞计数；影响因素

［Abstract］Objective To study the influence factors of peripheral blood cells counts of the fully automatic hematology analyzer.Methods 120 cases of healthy persons with physical examination in the Hospital of Civil Aviation Flight University of China were selected，and the red cells，white cells and blood platelets were tested by the Sysmex XT-1800i fully automatic hematology analyzer under different anticoagulant agents，temperatures and test time.Results The difference in detecting the white cells and red cells between the heparin sodium，sodium citrate and EDTA-K2 anticoagulant agent had no statistical significance（P＞0.05），the blood platelet count of blood specimen of heparin sodium and sodium citrate anticoagulation was obviously lower than that of the EDTA-K2 anticoagulation blood specimen（P＜0.05），the differences in the measurement results of the red cells，white cells and blood platelets of the blood specimens stored at a room temperature of 25℃after 30 min，2 h，4 h and 6 h（P＞0.05），and the differences in the measurement results of blood platelet after 30 min，2 h，4 h and 6 h had statistical significance（P＜0.05）.Conclusion The anticoagulant agent，temperature and test time are the important influence factors of peripheral blood count，and the peripheral blood cell count should choose EDTA-K2 anticoagulant agent，and the test should be finished within 6 h at 25℃.

［Key words］Peripheral blood；Cell count；Influence factor

血液常规分析是临床诊断炎症、感染，以及血液系统疾病的重要辅助指标。血液常规分析组合项目包括外周全血细胞计数和白细胞分类计数、以及各指标衍生参数等。其中，红细胞、白细胞、血小板计数是血液常规分析的重要关键指标［1-2］。然而由于血液成分复杂多样，且存在个体差异性，影响外周静脉全血细胞计数的因素较多［3-5］。该研究从抗凝剂的类型、标本保存时间、保存温度3个方面对外周静脉全血细胞计数的影响进行探讨，以指导临床检验技术人员科学制定质量控制和保证措施，促进血液常规分析质量的提高，报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选择中国民航飞行学院医院健康体检人群120例，包括男性60例和女性60例，年龄分布在12～65岁之间，平均年龄为（36.2±10.8）岁。

1.2仪器和试剂

Sysmex XT-1800i全自动血细胞分析仪及配套试剂，肝素抗凝管，EDTA-K2抗凝管，奥林巴斯显微镜，瑞氏-吉姆萨染色液。

1.3研究方法

所有120例研究对象于早晨8∶00-9∶00空腹采集3 mL的肝素钠抗凝血、枸橼酸钠和EDTA-K2抗凝血。EDTA-K2抗凝的全血标本再分装成等体积的两份，一份在室温下保存，分别于采血后0 min、30 min、2 h、4 h、6 h检测WBC、RBC和PLT三个计数参数；另一份标本保存在4℃，分别于0 min、30 min、2 h、4 h、6 h检测BC、RBC和PLT3个计数参数。

1.4统计方法

采用SPSS 13.0系统检测，计量资料用均值±标准差（±s）表示，多组间均值比较，采用F检验，两组间均值比较采用t检验。

2　结果

2.1不同抗凝剂血常规参数计数测定结果

结果如表1所示，肝素钠、枸橼酸钠和EDTA-K2抗凝剂检测WBC和RBC差异无统计学意义（P＞0.05），而三种抗凝剂检测血小板差异有统计学意义，且与EDTA-K2抗凝剂比较，肝素钠和枸橼酸钠抗凝的血标本PLT计数显著低于EDTA-K2抗凝血标本，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1　不同抗凝剂血常规参数测定结果［（s），n=120］

表1　不同抗凝剂血常规参数测定结果［（s），n=120］

检测项目肝素钠枸橼酸钠E D T A -K2P值R B C（× 1 012/ L）W B C（× 1 09/ L）P L T（× 1 09/ L）4 . 3 2 ± 0 . 7 9 8 . 0 7 ± 1 . 6 3 1 5 2 . 9 ± 3 9 . 5 4 . 1 9 ± 0 . 8 5 7 . 9 8 ± 1 . 6 7 1 5 5 . 6 ± 4 1 . 4 4 . 2 5 ± 0 . 7 3 8 . 1 1 ± 1 . 5 9 2 1 6 . 4 ± 4 5 . 8＞0 . 0 5＞0 . 0 5＜0 . 0 5

2.2室温下不同时间血细胞计数结果

25℃室温保存下血标本WBC、RBC和PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的测定结果差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2　室温保存（25℃）不同时间血细胞计数结果［n=120，（±s）］

表2　室温保存（25℃）不同时间血细胞计数结果［n=120，（±s）］

项目3 0 m i n 2 h 4 h 6 h P值R B C（1 012/ L）W B C（1 09/ L）P L T（1 011/ L）4 . 2 5 ± 0 . 7 3 8 . 1 1 ± 1 . 5 9 2 1 6 . 4 ± 4 5 . 8 4 . 2 1 ± 0 . 6 5 8 . 3 0 ± 1 . 6 6 2 2 1 . 5 ± 4 1 . 6 4 . 5 2 ± 0 . 7 3 8 . 0 5 ± 1 . 3 9 2 1 8 . 5 ± 4 9 . 0 4 . 1 7 ± 0 . 5 1 8 . 2 7 ± 1 . 5 3 2 1 9 . 7 ± 4 5 . 0＞0 . 0 5＞0 . 0 5＞0 . 0 5

2.3低温保存下不同时间血细胞计数结果

在4℃低温保存下血标本WBC、RBC在30 min、2 h、4 h、6 h的测定结果差异无统计学意义（P＞0.05）。而PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的测定结果差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3　低温保存（4℃）不同时间检测血细胞计数的结果［n=120，（±s）］

表3　低温保存（4℃）不同时间检测血细胞计数的结果［n=120，（±s）］

项目3 0 m i n 2 h 4 h 6 h P值R B C（1 012/ L）W B C（1 09/ L）P L T（1 011/ L）4 . 2 5 ± 0 . 7 3 8 . 1 1 ± 1 . 5 9 2 1 6 . 4 ± 4 5 . 8 4 . 3 1 ± 0 . 6 2 8 . 1 5 ± 1 . 6 6 1 8 8 . 6 ± 4 4 . 5 4 . 0 1 ± 0 . 2 1 8 . 3 2 ± 1 . 2 9 1 5 6 . 0 ± 4 0 . 3 3 . 9 9 ± 0 . 3 1 7 . 9 5 ± 1 . 3 0 1 0 9 . 3 ± 3 8 . 0＞0 . 0 5＞0 . 0 5＜0 . 0 5

3　讨论

随着医疗科技的发展和检测手段的不断进步，全自动血液分析仪在临床实验室得到了广泛应用。全自动血液分析仪通常采用电阻抗技术、半导体流式细胞分析系统、细胞化学染色技术和荧光检测技术，实现对正常细胞进行计数和分类的功能。但是全自动血液分析仪仍不可代替手工计数，在外周血液出现血小板聚集、有核红细胞、异常淋巴细胞、原始幼稚细胞等情况下，检测结果需要涂片染色后用显微镜法进行人工识别并确认［6-7］。同时，外周血细胞计数时还受到体外多种因素的影响［8-9］。

选择合适的抗凝剂是影响血细胞准确计数的关键因素之一。目前，血液检验中常用的抗凝剂有EDTA盐、肝素、枸橼酸盐等。肝素抗凝机制主要是由于其具有抗凝血酶Ⅲ活性，可抑制凝血活酶与凝血酶形成，并激活纤溶酶而发挥作用。EDTA盐和枸橼酸盐的抗凝作用是通过络合凝血因子Ⅳ（Ca2+），从而阻止血液凝固。肝素钠、枸橼酸钠和EDTA-K2抗凝剂检测WBC和RBC差异无统计学意义（P＞0.05），而3种抗凝剂检测血小板差异有统计学意义，且与EDTA-K2抗凝剂比较，肝素钠和枸橼酸钠抗凝的血标本PLT计数显著低于EDTA-K2（P＜0.05）。肝素导致血液分析仪计数PLT降低的原因可能是肝素能引起PLT聚集和发生肿胀，并且过量的肝素还可导致PLT被破坏［10］。而枸橼酸钠是碱性物质，也可引起PLT聚集。PLT一旦发生聚集，通过仪器检测微孔时，由于体积较大，不易被准确识别，往往被误认为是红细胞或淋巴细胞，这与文献报道相符［11-12］。故国际血液学标准化委员会推荐使用EDTA-K2作为血细胞计数的抗凝剂。

该结果显示，25℃室温保存下血标本WBC、RBC和PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的测定结果差异无统计学意义。在4℃低温保存下血标本WBC、RBC在30 min、2 h、4 h、6 h的测定结果之间比较无显著性差异。而PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的测定结果之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。这说明血标本保存温度对PLT计数也有一定影响。可能的原因是长时间低温条件下，PLT容易发生粘附和聚集，使得仪器检测PLT计数偏低［12-14］。而且随着保存时间的延长，血小板计数下降越来越明显。

综上可知，抗凝剂、温度和检测时间均是影响外周血细胞计数的重要影响因素。此外，还有其他一些因素，包括仪器状态、患者准备、溶血和脂血标本也可对血液分析产生影响。一般情况下，选择EDTA-K2作为抗凝剂、室温保存6 h内的血细胞计数结果不会发生明显影响。

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Study on Influence Factors of Peripheral Blood Cells Counts of the Fully Automatic Hematology Analyzer

WANG Yu
Department of Clinical Laboratory，Hospital of Civil Aviation Flight University of China，Guanghan，Sichuan Province，618307 China

R44

A

1672-5654（2016）09（b）-0089-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.26.089

2016-06-16）

王宇（1975-），女，四川广汉人，本科，主管检验技师，主要从事临床检验及实验室质量控制管理工作。