李秋兰 饶卫芳 黄立军
摘 要:对重瓣一品红新品种锦上花组织培养育苗技术进行研究,结果表明:以MS+2-4D2.0mg/L+6BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+蔗糖40g/L+卡拉胶6.5g/L培养基,是一种适宜的愈伤组织诱导培养基;以MS+6BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖40g/L+卡拉胶6.5g/L培养基为最合适诱导的不定芽培养基;以MS+6BA0.35/L+IBA0.3/L+蔗糖40g/L+卡拉胶6.5g/L为最佳增殖培养基;以1/2MS+IBA0.6mg/L+ +NAA1.0mg/L+蔗糖40g/L+卡拉胶6.5g/L为最佳生根培养基。搭建大棚移植重瓣一品红新品种锦上花组培苗,选用黄心土+沤熟的轻机质(v\v=5:1),作为移栽基质,移栽成活率93%以上。
关键词:重瓣一品红新品种锦上花;组织培养;移植技术
锦上花是重瓣一品红新品种,大戟科直立灌木,茎光滑,乳汁,含叶互生, 卵状椭圆形至披针形,顶部花序下的叶较狭,片状通常全茎苞缘,开花时呈朱红色,生杯状花絮,顶聚伞状排列,花期 1 0月至次年 3月,该品种花朵巨大,呈立体双层皇冠状,花径25-35厘米,高20多厘米,花基部由20多片平展大苞叶组成托盘,大苞叶长约15厘米,宽6-8厘米;花芯雌雄蕊全部苞叶化,变成向上伸出长10多厘米,宽2-4厘米密集丛生小苞叶,数百片小苞叶构成莲座状的花上花,花色鲜红耀眼;由于雌雄蕊消失,全花由300-400片苞叶组成,不受花开花谢影响,故花期特别长,如保管得好观赏期可长达半年之久。锦上花对南方原产暖地有特殊的适应能力,在粤北偶有霜冻地区,冬季薄膜防寒,夏季荫网防晒即可。是一品红(别名猩猩木、圣诞花、老来娇,属于大戟科大戟属常绿或半常绿灌木,原产墨西哥及中美洲,现在我国各地广泛栽培利用)历时17年对变异种进行培育、定型而形成的植物新品种,已获得国家新品种权保护(品种权号:20110011)。其花形硕大,呈立体双层皇冠状的,给人“花上有花”、“锦上添花”的感觉。虽然粤北隆冬寒气逼人,但一盆盆“锦上花”却怒张着一簇簇艳红宽大的花朵,一派喜气欢腾的模样,仿佛寒风中在绿枝熊熊燃烧的一团火焰。“锦上花”新品种已获得国家花卉新品种权保护。这标志着在中国使用极其广泛的“一品红”花卉系列中,终于有了第一个具有中国知识产权的产品。“锦上花”新品种市场选育成果曾获韶关市科技进步一等奖,具有广阔而良好的推广应用前景。我所项目组通过3年组织培养的研究试验,已成功组培出了重瓣一品红新品种锦上花,该项技术的研究是国内首次利用生物组织培养方法繁殖该新重瓣一品红品种,填补了国内采用组培方式繁殖该新品种的空白,具有自主知识产权,这将会引领该品种产业的科学发展,使更多的花农得到实惠,实现了重瓣一品红新品种锦上花优良基因的稳定性,具有大批量生产的能力。
一、材料与方法
1.组培育苗
(1)材料来源及处理。把“锦上花”母本拿过来是正值韶关最冷的2月,因此把母體放在温室养了2个月,是使得其苗子的污染降到最少,同时在取才的前10天进行了控水,在下午的时候,剪取了母本的顶芽、腋芽,切取3—5cm长带有腋芽的茎段、顶芽和嫩稍进行试验,首先用洗衣粉水冲洗干净,然后放在水龙头下以最小量的水下间断冲洗一个晚上,第二天早上进行处理后接于培养基上。在接种前,用70%的酒精消毒5-6秒,用无菌水冲洗5次,再用0.1%的升汞消毒8分钟,用无菌水冲洗5-6次。最后用干净滤纸吸干外植体表面水分,接到诱导愈伤组织的培养基上。
(2) 愈伤组织的诱导与增殖。把处理好的外植体,接于愈伤组织的诱导培养基上,我们设置了两个配方的培养进行对比,①MS+2-4D2.0mg/L+6BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+蔗糖40g/L+卡拉胶6.5g/L②MS+6BA0.8mg/L+蔗糖40g/L+卡拉胶6.5g/LPH值都为5.8,都在25℃条件下培养25-30天。
将愈伤组织转移到不定芽的诱导培养基上,我们也设置了两个培养基配方,①MS+6BA2mg/L+ NAA1.0mg/L+蔗糖40g/L+卡拉胶6.5g/L,②MS+6BA1mg/L+糖40g/L+卡拉胶6.5g/L,PH值都为5.8,温度在25℃,光照在2000 LX条件下进行培养。
(3)增殖培养。把诱导培养基上形成的丛生芽剪取下来,在无菌状态下接种于增殖培养基上。增殖培养基我们设置了3个配方进行了试验。①MS+IBA0.05mg/L+6BA0.05mg/L+糖40 g/L+卡拉胶6.5g/L,②MS+IBA0.3mg/L+6BA0.05 mg /L+糖40 g/L+卡拉胶6.5g/L,③MS+IBA0.3mg/L+6BA0.35 mg /L+糖40 g/L+卡拉胶6.5g /L,培养30d后观察记录“锦上花”芽苗生长状况,计算增殖倍数。
(4)生根培养。我们设置了两个培养基的配方。①1/2 MS+IBA0.6mg/L+NAA1.0mg/L+糖40g/L+卡拉胶6.5g/L+活性炭0.8g/L,②1/2 MS+ NAA1.0mg/L+糖40g/L+卡拉胶6.5g/L+活性炭0.8g/L,培养30d后观察记录“锦上花”芽苗生长状况,计算生根率。
2.组培苗移植
(1)育苗场地 。场地设在通风、凉爽、平坦的地方,并在场地上搭建大棚,每个大棚建成长30m、宽10m、高6m,棚顶覆盖塑料薄膜,并加盖70%的遮荫网,棚内安装自动雾状喷头,出入口安装防虫网。
(2)苗床设置 。用10 cm~15 cm厚的黄心土+沤熟的轻机质,体质比为5:1,作为移栽基质,床面宽1 m、高10 cm~15 cm,床间步道宽30 cm~40 cm,四周设置排水沟,移植前2 d用2000 mg/L高锰酸钾溶液进行消毒处理。
(3)移植方法。在生根培养基上培养二十天后,根部长出根后就把瓶苗在温室内炼苗一星期,然后逐渐开瓶炼苗1-2天,即可将苗的根部培养基充分洗净后,用800-1000倍的多菌灵溶液浸泡1-2分钟,移栽至消毒的基质中,栽植后浇透水。
(4)温度管理。大棚内温度控制在25℃左右,冬冷季节采用密封大棚以保温防冻伤,夏季气温过高时打开喷头喷雾以降温保湿。
(5)湿度管理。移栽后在新根未长之前空气湿度保持在95%左右,长出新根后空气湿度保持在75%左右,逐渐减少遮阴和喷雾次数。
(6)肥水管理。移植1个月后开始施肥,每隔15 d淋施腐熟的花生麸水肥一次。
(7) 病虫害防治。移植1个月内每隔7d喷洒1次多菌灵,防治病菌感染,注意出入口防虫网随手关闭,防止昆虫进入。
二、结果与分析
1.组培育苗试验结果
(1)不同浓度激素组合对“锦上添花”芽苗增殖的影响。“锦上添花”组培研究试验结果表明:采用MS+2-4D2.0mg/L+6BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+蔗糖40g/L+卡拉胶6.5g/L培养基,植体切口处长出许多愈伤组织,利用茎段诱导率达到90%,是一种适宜的愈伤组织诱导培养基;以MS+6BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L+糖40g/L+卡拉膠6.5g/L培养基最为合适诱导的不定芽出芽率达到95%;以MS+6BA0.35/L+IBA0.3/L+糖40g/L+卡拉胶6.5g/L培养基为最佳。
(2) 不同浓度激素组合对重瓣一品红锦上花芽苗生根的影响。重瓣一品红锦上花组培研究试验结果表明:以1/2MS+IBA0.6mg/L+ +NAA1.0mg/L+糖40g/L+卡拉胶6.5g/L培养基为最佳,生根率达到88%。
2.组培苗移植试验结果
(1)炼苗。重瓣一品红锦上花新品种植试验表明,移栽前必须进行炼苗才能提高移栽成活率,也可以缩短苗木对环境适应时间,使苗木较快抽芽生长。
(2)植后管理。重瓣一品红锦上花新品种瓶苗的移栽要注意保温保湿,土壤湿度不能太大,温度要在28摄氏度以下,以25-26摄氏度为宜,幼苗成活后,每半个月施腐熟的花生麸水肥一次,并逐渐加大施肥浓度,光照一定要好,光照一定要好,否则叶子变黄,茎节变长,变弱,容易倒伏,形状难看,在管理过程中,需要打几次顶,促其侧芽生长,让分枝更多,使得重瓣一品红锦上花树形饱满漂亮。
三、结论与讨论
重瓣一品红锦上花是一个新品种,它现有的数量不多,要通过扦插育苗的话必定会芽条不足,而且很可能会再产生变异,在短时间内快速大量地生产苗木是很困难,我们成功研制了组培苗后很好解决了这些矛盾,重瓣一品红锦上花新品种组培苗繁殖后代整齐一致,能保持原有品种的优良性状,可进行周年工厂化生产人工控制的条件下进行的集约化生产,不受自然环境中季节和恶劣天气的影响,所以不受季节限制,可以全年进行连续生产,生产效率高。
参考文献:
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