注射用盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的有关物质研究

北京四环科宝制药有限公司（100070）陈婧 方贤罗 陈红燕 高万峰

盐酸甲砜霉素甘氨酸酯是甲砜霉素的衍生物，是氯霉素的同类物，抗菌谱和抗菌作用与氯霉素相似。其水溶性好，当溶液的pH值增高或受到体内酶的作用后，迅速释放出甲砜霉素而发挥作用[1]。盐酸甲砜霉素甘氨酸酯拓宽了甲砜霉素的临床应用，克服了其水溶性差的劣势[2]。我们在大量研究的基础上建立了一种准确快速检测注射用盐酸甲砜霉素甘氨酸酯有关物质的高效液相色谱法并对杂质进行了归属研究，同时对自制样品与市售样品的杂质水平进行了对比。

1 仪器与试药

岛津LC Solution高效液相色谱仪（日本岛津公司）；Sartorius PB-10型酸度计（德国赛多利斯公司）；CP225D型电子天平（德国赛多利斯公司）；甲醇为色谱纯，水为纯化水，其余试剂均为分析纯。

2 HPLC测定方法的建立与验证

2.1 色谱条件的建立 经试验，流动相pH值对盐酸甲砜霉素甘氨酸酯主峰及其杂质峰峰形、峰面积和分离度均有影响。对流动相pH值为3.0和4.5的对比发现，前者明显比后者峰型对称性好，积分结果准确，各杂质峰与主成分峰分离度好。最终确认以甲醇-0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液-三乙胺（20∶80∶0.05）用磷酸调节pH至3.0为流动相，能保证各杂质有效检出。

2.2 溶液pH值对样品稳定性的影响 分别选用pH4.5流动相、0.001 mol/L盐酸、0.01mol/L盐酸，以有关物质为指标，考察样品配制后放置稳定性情况。结果表明：不同pH值的溶剂对盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的稳定性有明显影响。在pH值对杂质的影响考察中发现，在考察的3h内，在同一pH值条件下，有关物质随放置时间延长而增长，因此为保证结果准确，有关物质测定时样品应现配现用；在考察的3h内，随着溶液pH值的降低，样品在放置相同的时间内，杂质增长幅度明显降低，因此选用溶解样品的溶剂为0.01mol/L盐酸，能保证测定结果更加准确。具体数据见附表1。

2.3 专属性试验 取本品适量，进行酸、碱、氧化、高温、光照等条件的强制降解试验，考察降解产物等杂质与主成分的分离情况。通过试验可知，在此色谱条件下，甲砜霉素甘氨酸酯峰与杂质峰能够完全分离，说明此色谱条件可以完全满足本品有关物质的测定。

2.4 杂质研究 结合盐酸甲砜霉素甘氨酸酯原料的合成工艺，选择甲砜霉素作为对照定位制剂中的杂质。取甲砜霉素适量，配制成浓度约为10μg/mL的溶液，按有关物质测定方法进样分析，根据参考文献[1]中的相应研究并结合实际检测结果，可以确定与盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的相对保留时间约为2.0左右的杂质为甲砜霉素。

2.5 与市售制剂有关物质对比研究 取市售的注射用盐酸甲砜霉素甘氨酸酯作为对照药，与自制样品，按上述有关物质的检测方法进行检测，记录色谱图（见附图1～2），由色谱图可以看出，市售样品杂质个数比自制样品多，且市售样品杂质峰与主成分峰分离度不理想。按面积归一化法进行计算，市售样品最大单一杂质和总杂质均比自制样品大。结果见附表2。

附图1 自制样品色谱图

附图2 市售样品色谱图

附表1 溶液稳定性考察结果

附表2 自制样品与市售样品杂质对比

3 讨论

本文在对盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的有关物质色谱条件的流动相的组成及其pH值的考察和对溶解样品溶剂的pH值对样品稳定性的研究的基础上进行了有关物质的方法学的研究。证明本方法测定有关物质，能保证各杂质有效检出，峰型对称性好，积分结果准确，且各杂质峰与主成分峰分离度较好；可用于注射用盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量控制。结合盐酸甲砜霉素甘氨酸酯原料的合成工艺，选择甲砜霉素作为对照定位制剂中的杂质，研究表明与盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的相对保留时间约为2.0左右的杂质为甲砜霉素。按上述选定的有关物质检测方法检验自制样品与市售样品，由对比数据可以看出，自制样品的有关物质明显小于市售样品。